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陆地棉早熟性状候选基因的筛选及功能验证

摘要第6-7页
abstract第7页
第一章 引言第11-21页
    1.1 短季棉选育的意义第11页
    1.2 植物开花调控途径的概况第11-18页
        1.2.1 光周期途径第11-13页
        1.2.2 春化途径第13-14页
        1.2.3 赤霉素途径第14页
        1.2.4 自主途径第14-15页
        1.2.5 环境温度途径第15-16页
        1.2.6 年龄途径第16-17页
        1.2.7 糖代谢途径第17-18页
    1.3 开花时间的表观遗传控制第18-19页
    1.4 多梳蛋白在植物开花中的作用第19-20页
    1.5 本研究的目的意义第20-21页
第二章 开花相关基因的筛选第21-27页
    2.1 棉花开花相关基因的筛选第21页
    2.2 棉花总RNA的提取第21-22页
        2.2.1 准备工作第21-22页
        2.2.2 总RNA提取第22页
        2.2.3 RNA的检测第22页
    2.3 cDNA合成第22-23页
    2.4 荧光定量PCR第23-24页
    2.5 结果分析第24-25页
        2.5.1 GhSUVH5基因表达模式第24页
        2.5.2 GhEMF2基因表达模式第24-25页
        2.5.3 GhSUVH5基因和GhEMF2基因的功能注释第25页
    2.6 讨论第25-27页
第三章 GhSUVH5和GhEMF2基因的生物信息学分析第27-32页
    3.1 基因的结构分析第27页
    3.2 蛋白质理化性质分析第27页
    3.3 蛋白质二级结构分析第27页
    3.4 磷酸化位点预测第27页
    3.5 保守结构域预测第27-28页
    3.6 多序列比对及进化树分析第28-32页
        3.6.1 GhSUVH5蛋白的多序列比对及进化树分析第28-30页
        3.6.2 GhEMF2蛋白的多序列比对及进化树分析第30-32页
第四章 GhEMF2和GhSUVH5基因转化拟南芥第32-41页
    4.1 模式作物拟南芥第32页
    4.2 材料和方法第32-36页
        4.2.1 载体和材料第32页
        4.2.2 基因克隆第32-33页
        4.2.3 PCR片段的胶回收第33-34页
        4.2.4 pBI121-GhSUVH5和pBI121-GhEMF2过表达载体构建第34页
        4.2.5 转化大肠杆菌第34-35页
        4.2.6 质粒提取第35页
        4.2.7 农杆菌转化第35-36页
        4.2.8 阳性株鉴定第36页
        4.2.9 基因表达量检测第36页
    4.3 结果分析第36-39页
        4.3.1 转基因拟南芥阳性株鉴定结果第36-37页
        4.3.2 转GhSUVH5基因的拟南芥表型变化第37-38页
        4.3.3 转GhEMF2基因的拟南芥表型变化第38-39页
    4.4 讨论第39-41页
第五章 VIGS技术诱导GhEMF2基因沉默第41-47页
    5.1 棉花皱叶病毒第41页
    5.2 材料与方法第41-43页
        5.2.1 载体和菌株第41页
        5.2.2 RNA提取和cDNA合成第41页
        5.2.3 VIGS片段克隆第41-42页
        5.2.4 VIGS沉默载体构建第42页
        5.2.5 VIGS载体转入农杆菌第42页
        5.2.6 接种方法第42页
        5.2.7 沉默载体检测第42-43页
        5.2.8 荧光定量PCR检测GhEMF2表达量第43页
    5.3 结果与分析第43-46页
        5.3.1 VIGS沉默载体构建第43页
        5.3.2 GhEMF2基因的沉默效率第43-44页
        5.3.3 VIGS表型观察第44-46页
    5.4 讨论第46-47页
第六章 全文结论与展望第47-48页
    6.1 全文结论第47页
    6.2 全文展望第47-48页
参考文献第48-54页
附录第54-59页
致谢第59-60页
作者简历第60页

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