摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第11-21页 |
1.1 短季棉选育的意义 | 第11页 |
1.2 植物开花调控途径的概况 | 第11-18页 |
1.2.1 光周期途径 | 第11-13页 |
1.2.2 春化途径 | 第13-14页 |
1.2.3 赤霉素途径 | 第14页 |
1.2.4 自主途径 | 第14-15页 |
1.2.5 环境温度途径 | 第15-16页 |
1.2.6 年龄途径 | 第16-17页 |
1.2.7 糖代谢途径 | 第17-18页 |
1.3 开花时间的表观遗传控制 | 第18-19页 |
1.4 多梳蛋白在植物开花中的作用 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 开花相关基因的筛选 | 第21-27页 |
2.1 棉花开花相关基因的筛选 | 第21页 |
2.2 棉花总RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.1 准备工作 | 第21-22页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第22页 |
2.2.3 RNA的检测 | 第22页 |
2.3 cDNA合成 | 第22-23页 |
2.4 荧光定量PCR | 第23-24页 |
2.5 结果分析 | 第24-25页 |
2.5.1 GhSUVH5基因表达模式 | 第24页 |
2.5.2 GhEMF2基因表达模式 | 第24-25页 |
2.5.3 GhSUVH5基因和GhEMF2基因的功能注释 | 第25页 |
2.6 讨论 | 第25-27页 |
第三章 GhSUVH5和GhEMF2基因的生物信息学分析 | 第27-32页 |
3.1 基因的结构分析 | 第27页 |
3.2 蛋白质理化性质分析 | 第27页 |
3.3 蛋白质二级结构分析 | 第27页 |
3.4 磷酸化位点预测 | 第27页 |
3.5 保守结构域预测 | 第27-28页 |
3.6 多序列比对及进化树分析 | 第28-32页 |
3.6.1 GhSUVH5蛋白的多序列比对及进化树分析 | 第28-30页 |
3.6.2 GhEMF2蛋白的多序列比对及进化树分析 | 第30-32页 |
第四章 GhEMF2和GhSUVH5基因转化拟南芥 | 第32-41页 |
4.1 模式作物拟南芥 | 第32页 |
4.2 材料和方法 | 第32-36页 |
4.2.1 载体和材料 | 第32页 |
4.2.2 基因克隆 | 第32-33页 |
4.2.3 PCR片段的胶回收 | 第33-34页 |
4.2.4 pBI121-GhSUVH5和pBI121-GhEMF2过表达载体构建 | 第34页 |
4.2.5 转化大肠杆菌 | 第34-35页 |
4.2.6 质粒提取 | 第35页 |
4.2.7 农杆菌转化 | 第35-36页 |
4.2.8 阳性株鉴定 | 第36页 |
4.2.9 基因表达量检测 | 第36页 |
4.3 结果分析 | 第36-39页 |
4.3.1 转基因拟南芥阳性株鉴定结果 | 第36-37页 |
4.3.2 转GhSUVH5基因的拟南芥表型变化 | 第37-38页 |
4.3.3 转GhEMF2基因的拟南芥表型变化 | 第38-39页 |
4.4 讨论 | 第39-41页 |
第五章 VIGS技术诱导GhEMF2基因沉默 | 第41-47页 |
5.1 棉花皱叶病毒 | 第41页 |
5.2 材料与方法 | 第41-43页 |
5.2.1 载体和菌株 | 第41页 |
5.2.2 RNA提取和cDNA合成 | 第41页 |
5.2.3 VIGS片段克隆 | 第41-42页 |
5.2.4 VIGS沉默载体构建 | 第42页 |
5.2.5 VIGS载体转入农杆菌 | 第42页 |
5.2.6 接种方法 | 第42页 |
5.2.7 沉默载体检测 | 第42-43页 |
5.2.8 荧光定量PCR检测GhEMF2表达量 | 第43页 |
5.3 结果与分析 | 第43-46页 |
5.3.1 VIGS沉默载体构建 | 第43页 |
5.3.2 GhEMF2基因的沉默效率 | 第43-44页 |
5.3.3 VIGS表型观察 | 第44-46页 |
5.4 讨论 | 第46-47页 |
第六章 全文结论与展望 | 第47-48页 |
6.1 全文结论 | 第47页 |
6.2 全文展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简历 | 第60页 |