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三叶斑潜蝇气味结合蛋白的鉴定及功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
第一章 引言第17-23页
    1.1 三叶斑潜蝇第17-18页
        1.1.1 三叶斑潜蝇的起源及分布第17页
        1.1.2 三叶斑潜蝇的寄主及危害第17页
        1.1.3 三叶斑潜蝇的生活习性第17-18页
    1.2 昆虫气味结合蛋白研究进展第18-21页
        1.2.1 昆虫气味结合蛋白的类型及结构第18页
        1.2.2 昆虫气味结合蛋白的表达与分布第18-19页
        1.2.3 昆虫气味结合蛋白的作用机制及合成降解第19-20页
        1.2.4 昆虫气味结合蛋白的生理功能第20-21页
    1.3 论文研究思路第21-23页
        1.3.1 研究目的及意义第21页
        1.3.2 研究内容第21页
        1.3.3 技术路线第21-23页
第二章 三叶斑潜蝇OBPS基因的克隆及生物信息学分析第23-32页
    2.1 材料与方法第23-26页
        2.1.1 供试昆虫第23页
        2.1.2 主要试剂及仪器设备第23-24页
        2.1.3 三叶斑潜蝇转录组测序及OBPs基因的筛选第24页
        2.1.4 三叶斑潜蝇OBPs基因的克隆及验证第24-26页
        2.1.5 三叶斑潜蝇OBPs基因的生物信息学分析第26页
    2.2 结果与分析第26-31页
        2.2.1 三叶斑潜蝇转录组数据中OBPs基因的克隆验证第26-28页
        2.2.2 三叶斑潜蝇OBPs基因的序列分析第28-29页
        2.2.3 三叶斑潜蝇OBPs基因的系统发育分析第29-31页
    2.3 讨论第31-32页
第三章 三叶斑潜蝇OBPS基因的表达谱分析第32-41页
    3.1 材料与方法第32-34页
        3.1.1 三叶斑潜蝇不同发育阶段及组织样品的收集第32页
        3.1.2 主要试剂及仪器设备第32页
        3.1.3 RNA提取及反转录第32-33页
        3.1.4 qPCR引物设计及反应体系第33-34页
    3.2 结果与分析第34-39页
        3.2.1 荧光定量各个样品的RNA提取第34页
        3.2.2 qPCR引物扩增效率及特异性检测第34-35页
        3.2.3 不同发育阶段的表达情况第35-36页
        3.2.4 不同组织部位的表达情况第36-39页
    3.3 讨论第39-41页
第四章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的原核表达及纯化第41-53页
    4.1 材料与方法第41-45页
        4.1.1 供试虫源第41页
        4.1.2 主要试剂及仪器设备第41页
        4.1.3 溶液配制第41-43页
        4.1.4 试验方法第43-45页
    4.2 结果与分析第45-52页
        4.2.1 开放阅读框特异性扩增第45-46页
        4.2.2 重组表达质粒的构建第46-48页
        4.2.3 重组蛋白的诱导表达第48页
        4.2.4 重组蛋白的纯化第48-52页
    4.3 讨论第52-53页
第五章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的气味结合特性研究第53-65页
    5.1 材料与方法第53-56页
        5.1.1 供试材料第53页
        5.1.2 主要试剂及仪器设备第53页
        5.1.3 试验方法第53-56页
    5.2 结果与分析第56-64页
        5.2.1 LtriOBP1-7与1-NPN的结合常数及方程验证第56-58页
        5.2.2 LtriOBP1-7与25种气味配基的竞争性结合第58-64页
    5.3 讨论第64-65页
第六章 三叶斑潜蝇气味结合蛋白的免疫荧光定位第65-77页
    6.1 材料与方法第65-66页
        6.1.1 供试昆虫第65页
        6.1.2 主要试剂及仪器设备第65页
        6.1.3 三叶斑潜蝇气味结合蛋白抗体的制备第65页
        6.1.4 三叶斑潜蝇组织的冷冻切片第65-66页
        6.1.5 三叶斑潜蝇组织的免疫染色第66页
    6.2 结果与分析第66-75页
        6.2.1 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在触角中的定位情况第66-71页
        6.2.2 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在口器中的定位情况第71-72页
        6.2.3 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在头部中的定位情况第72-73页
        6.2.4 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在前足附节中的定位情况第73-74页
        6.2.5 三叶斑潜蝇LtriOBP1-7在幼虫及蛹中的定位情况第74-75页
    6.3 讨论第75-77页
第七章 全文结论第77-79页
参考文献第79-88页
致谢第88-89页
作者简历第89页

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