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松材线虫的核酸快速检测研究

摘要第2-3页
abstract第3-4页
引言第7-8页
第一章 耐热解旋酶的表达纯化第8-19页
    1.1 材料第8-10页
        1.1.1 试验材料第8-10页
    1.2 方法第10-15页
        1.2.1 热稳定解旋酶(Tte-UvrD)基因扩增第10-11页
        1.2.2 PCR产物回收第11-12页
        1.2.3 重组表达载体pET-15b-Tte-UvrD的构建第12-13页
        1.2.4 重组表达载体PCR鉴定第13页
        1.2.5 重组热稳定解旋酶在工程菌中的诱导表达第13-14页
        1.2.6 亲和层析纯化重组热稳定解旋酶第14页
        1.2.7 重组热稳定解旋酶活力的测定第14-15页
    1.3 结果与分析第15-18页
        1.3.1 重组表达载体鉴定结果第15页
        1.3.2 热稳定解旋酶序列分析第15-17页
        1.3.3 热稳定解旋酶基因在大肠杆菌中的诱导表达结果第17页
        1.3.4 亲和层析纯化重组热稳定解旋酶结果第17-18页
        1.3.5 重组热稳定解旋酶酶活力的测定结果第18页
    1.4 小结第18-19页
第二章 多种等温扩增技术对松材线虫的快速检测研究第19-34页
    2.1 材料第19-20页
        2.1.1 样品的来源第19页
        2.1.2 主要实验仪器第19-20页
        2.1.3 主要的试剂、培养基配置第20页
    2.2 实验方法第20-28页
        2.2.1 样品的制备第20-22页
        2.2.2 HDA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立第22-24页
        2.2.3 LAMP等温扩增技术对送松材线虫快速检测第24-25页
        2.2.4 改进CPA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立第25-26页
        2.2.5 SEA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立第26-28页
    2.3 实验结果与分析第28-33页
        2.3.1 HDA检测松材线虫方法建立结果第28-31页
        2.3.2 LAMP检测松材线虫结果第31页
        2.3.3 CPA方法检测松材线虫可行性分析结果第31-32页
        2.3.4 SEA方法检测松材线虫可行性分析结果第32-33页
    2.4 小结第33-34页
第三章 SEA等温扩增技术对松材线虫的快速检测研究第34-40页
    3.1 材料和试剂第34页
    3.2 实验方法第34-36页
        3.2.1 松材线虫样品核酸提取第34页
        3.2.2 松材线虫样品总RNA提取第34-35页
        3.2.3 SEA反应检测限实验第35页
        3.2.4 SEA检测松材线虫基因组DNA第35页
        3.2.5 SEA检测松材线虫特异性实验第35页
        3.2.6 SEA松材检测线虫样品第35-36页
        3.2.7 SEA具有RNA检测能力的证明第36页
    3.3 实验结果与分析第36-39页
        3.3.1 SEA检测DNA片段灵敏性实验结果第36页
        3.3.2 SEA检测松材线虫基因组结果第36-37页
        3.3.3 SEA检测单条线虫结果第37-38页
        3.3.4 SEA检测松材线虫特异性实验结果第38-39页
        3.3.5 SEA检测RNA结果第39页
    3.4 小结第39-40页
第四章 总结与展望第40-41页
    4.1 总结第40页
    4.2 展望第40-41页
参考文献第41-44页
综述第44-51页
    综述参考文献第49-51页
攻读学位期间的研究成果第51-52页
附录或缩略词表第52-53页
致谢第53-54页

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