| 摘要 | 第2-3页 |
| abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 第一章 耐热解旋酶的表达纯化 | 第8-19页 |
| 1.1 材料 | 第8-10页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第8-10页 |
| 1.2 方法 | 第10-15页 |
| 1.2.1 热稳定解旋酶(Tte-UvrD)基因扩增 | 第10-11页 |
| 1.2.2 PCR产物回收 | 第11-12页 |
| 1.2.3 重组表达载体pET-15b-Tte-UvrD的构建 | 第12-13页 |
| 1.2.4 重组表达载体PCR鉴定 | 第13页 |
| 1.2.5 重组热稳定解旋酶在工程菌中的诱导表达 | 第13-14页 |
| 1.2.6 亲和层析纯化重组热稳定解旋酶 | 第14页 |
| 1.2.7 重组热稳定解旋酶活力的测定 | 第14-15页 |
| 1.3 结果与分析 | 第15-18页 |
| 1.3.1 重组表达载体鉴定结果 | 第15页 |
| 1.3.2 热稳定解旋酶序列分析 | 第15-17页 |
| 1.3.3 热稳定解旋酶基因在大肠杆菌中的诱导表达结果 | 第17页 |
| 1.3.4 亲和层析纯化重组热稳定解旋酶结果 | 第17-18页 |
| 1.3.5 重组热稳定解旋酶酶活力的测定结果 | 第18页 |
| 1.4 小结 | 第18-19页 |
| 第二章 多种等温扩增技术对松材线虫的快速检测研究 | 第19-34页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 样品的来源 | 第19页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要的试剂、培养基配置 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 样品的制备 | 第20-22页 |
| 2.2.2 HDA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立 | 第22-24页 |
| 2.2.3 LAMP等温扩增技术对送松材线虫快速检测 | 第24-25页 |
| 2.2.4 改进CPA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立 | 第25-26页 |
| 2.2.5 SEA等温扩增技术对松材线虫快速检测方法的建立 | 第26-28页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 HDA检测松材线虫方法建立结果 | 第28-31页 |
| 2.3.2 LAMP检测松材线虫结果 | 第31页 |
| 2.3.3 CPA方法检测松材线虫可行性分析结果 | 第31-32页 |
| 2.3.4 SEA方法检测松材线虫可行性分析结果 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 SEA等温扩增技术对松材线虫的快速检测研究 | 第34-40页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 松材线虫样品核酸提取 | 第34页 |
| 3.2.2 松材线虫样品总RNA提取 | 第34-35页 |
| 3.2.3 SEA反应检测限实验 | 第35页 |
| 3.2.4 SEA检测松材线虫基因组DNA | 第35页 |
| 3.2.5 SEA检测松材线虫特异性实验 | 第35页 |
| 3.2.6 SEA松材检测线虫样品 | 第35-36页 |
| 3.2.7 SEA具有RNA检测能力的证明 | 第36页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第36-39页 |
| 3.3.1 SEA检测DNA片段灵敏性实验结果 | 第36页 |
| 3.3.2 SEA检测松材线虫基因组结果 | 第36-37页 |
| 3.3.3 SEA检测单条线虫结果 | 第37-38页 |
| 3.3.4 SEA检测松材线虫特异性实验结果 | 第38-39页 |
| 3.3.5 SEA检测RNA结果 | 第39页 |
| 3.4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 总结与展望 | 第40-41页 |
| 4.1 总结 | 第40页 |
| 4.2 展望 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 综述 | 第44-51页 |
| 综述参考文献 | 第49-51页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
| 附录或缩略词表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
