中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第11-15页 |
第一部分 尼古丁对巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES表达的调控及分子机制 | 第15-39页 |
1.材料与方法 | 第17-32页 |
1.1 试剂和仪器 | 第17-22页 |
1.1.1 实验试剂 | 第17-20页 |
1.1.2 实验材料与仪器 | 第20-22页 |
1.2 细胞培养 | 第22页 |
1.3 蛋白免疫印迹分析 | 第22-27页 |
1.3.1 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总蛋白提取 | 第23页 |
1.3.2 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总蛋白测定 | 第23-24页 |
1.3.3 蛋白样本处理 | 第24页 |
1.3.4 SDS-PAGE凝胶配制 | 第24-25页 |
1.3.5 电泳 | 第25-26页 |
1.3.6 转膜 | 第26页 |
1.3.7 封闭及杂交 | 第26-27页 |
1.3.8 显影 | 第27页 |
1.4 RealTimePCR析 | 第27-31页 |
1.4.1 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总RNA的提取 | 第27-28页 |
1.4.2 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总RNA的定量 | 第28页 |
1.4.3 逆转录反应 | 第28-29页 |
1.4.4 RealTimePCR反应 | 第29-31页 |
1.5 统计学分析 | 第31-32页 |
2.结果 | 第32-35页 |
2.1 尼古丁诱导巨噬细胞ERK1/2和c-Jun的磷酸化 | 第32-34页 |
2.2 U0126抑制尼古丁诱导巨噬细胞ERK1/2和c-Jun的磷酸化及MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES的表达 | 第34页 |
2.3 尼古丁诱导主动脉平滑肌细胞c-Jun磷酸化 | 第34-35页 |
3.讨论 | 第35-38页 |
4.结论 | 第38-39页 |
第二部分 α7-nAChR对尼古丁诱导巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES高表达的调控及分子机制 | 第39-62页 |
1.材料与方法 | 第40-55页 |
1.1 试剂和仪器 | 第40-45页 |
1.1.1 实验试剂 | 第40-43页 |
1.1.2 实验材料与仪器 | 第43-45页 |
1.2 细胞培养 | 第45-46页 |
1.3 蛋白免疫印迹分析 | 第46-50页 |
1.3.1 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总蛋白提取 | 第46页 |
1.3.2 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总蛋白测定 | 第46-47页 |
1.3.3 蛋白样本处理 | 第47页 |
1.3.4 SDS-PAGE凝胶配制 | 第47-48页 |
1.3.5 电泳 | 第48-49页 |
1.3.6 转膜 | 第49页 |
1.3.7 封闭及杂交 | 第49-50页 |
1.3.8 显影 | 第50页 |
1.4 RealTimePCR分析 | 第50-55页 |
1.4.1 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总RNA的提取 | 第50-51页 |
1.4.2 巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞总RNA的定量 | 第51页 |
1.4.3 逆转录反应 | 第51-52页 |
1.4.4 RealTimePCR反应 | 第52-55页 |
1.5 统计学分析 | 第55页 |
2.结果 | 第55-59页 |
2.1 PNU-282987抑制尼古丁诱导巨噬细胞ERK1/2和c-Jun的磷酸化和MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES的高表达 | 第55-57页 |
2.2 PNU-282987抑制尼古丁诱导主动脉平滑肌细胞c-Jun的磷酸化和MMP-9,MMP-2,MCP-1和RANTES的高表达 | 第57-59页 |
3.讨论 | 第59-61页 |
4.结论 | 第61-62页 |
全文总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
综述 | 第73-82页 |
参考文献 | 第79-82页 |
英文缩略词表 | 第82-85页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |