甲型流感病毒核输出蛋白的原核表达及其抗体制备
| 英文缩略表 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-22页 |
| 1 流感病毒的基本概况及其危害性 | 第12-14页 |
| 2 甲型流感病毒的核输出蛋白 | 第14-20页 |
| 3 研究目的和意义 | 第20页 |
| 4 本研究应用的主要实验技术 | 第20-22页 |
| 4.1 杂交瘤技术 | 第20-21页 |
| 4.2 酶联免疫吸附试验 | 第21页 |
| 4.3 免疫印迹 | 第21-22页 |
| 第一章 流感病毒NEP基因的获取 | 第22-29页 |
| 第一节 材料与方法 | 第23-26页 |
| 1 材料 | 第23页 |
| 2 主要仪器 | 第23页 |
| 3 方法 | 第23-26页 |
| 第二节 结果与分析 | 第26-27页 |
| 1 从流感病毒获得病毒基因 | 第26页 |
| 2 PCR扩增全长NEP基因 | 第26-27页 |
| 第三节 讨论 | 第27-29页 |
| 第二章 流感病毒NEP的原核表达及纯化 | 第29-42页 |
| 第一节 材料与方法 | 第29-34页 |
| 1 材料 | 第29页 |
| 2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3 方法 | 第30-34页 |
| 第二节 结果与分析 | 第34-41页 |
| 1 NEP片段及载体双酶切 | 第34-35页 |
| 2 PCR鉴定阳性克隆 | 第35-36页 |
| 3 测序结果序列比对 | 第36-37页 |
| 4 NEP重组蛋白诱导表达及优化条件的确定 | 第37-39页 |
| 5 目的蛋白的大量表达及纯化 | 第39-41页 |
| 第三节 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 抗NEP单克隆抗体的制备 | 第42-53页 |
| 第一节 材料与方法 | 第43-47页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| 2 主要仪器 | 第43页 |
| 3 方法 | 第43-47页 |
| 第二节 结果与分析 | 第47-52页 |
| 1 SP2/0细胞体内壮复 | 第47-48页 |
| 2 小鼠血清效价测定 | 第48-49页 |
| 3 单克隆细胞株的建立 | 第49-50页 |
| 4 免疫印迹验证抗体特异性 | 第50页 |
| 5 免疫印迹验证抗体对病毒蛋白的特异性 | 第50-52页 |
| 第三节 讨论 | 第52-53页 |
| 第四章 总结及展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 综述 | 第62-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附件一 攻读学位期间发表论文目录 | 第72-73页 |
| 附件二 溶液配方 | 第73-75页 |
