摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第9-19页 |
1.1 研究背景 | 第9-14页 |
1.1.1 欧洲白桦 | 第9页 |
1.1.2 NAC转录因子 | 第9-13页 |
1.1.3 植物顶端分生组织建成 | 第13-14页 |
1.1.4 叶片边缘形态建成 | 第14页 |
1.2 CUC2基因研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 CUC2基因简介 | 第14页 |
1.2.2 CUC2蛋白的结构特征 | 第14-15页 |
1.2.3 CUC2基因的功能 | 第15-17页 |
1.3 本研究目的和意义 | 第17-19页 |
2 BpCUC2基因的克隆、载体构建及生物信息学分析 | 第19-43页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第19页 |
2.1.2 仪器与软件 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-23页 |
2.2.1 总RNA提取及cDNA的合成 | 第20页 |
2.2.2 BpCUC2基因全长cDNA的克隆 | 第20-21页 |
2.2.3 BpCUC2基因植物表达载体构建 | 第21-23页 |
2.2.4 BpCUC2生物信息学分析 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-41页 |
2.3.1 总RNA质量检测 | 第23-24页 |
2.3.2 BpCUC2基因全长cDNA的克隆 | 第24-25页 |
2.3.3 BpCUC2基因植物表达载体构建分析 | 第25-28页 |
2.3.4 BpCUC2蛋白一级结构预测 | 第28-33页 |
2.3.5 BpCUC2蛋白二级结构预测 | 第33-34页 |
2.3.6 BpCUC2模体的识别和解析 | 第34-35页 |
2.3.7 BpCUC2蛋白三级结构预测 | 第35-38页 |
2.3.8 BpCUC2与其他物种的相似性比较及分子进化遗传分析 | 第38-41页 |
2.4 讨论 | 第41-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-43页 |
3 欧洲白桦不同组织部位BpCUC2基因差异表达分析 | 第43-50页 |
3.1 实验材料 | 第43页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第43页 |
3.1.2 仪器与软件 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 组织培养与组培苗的移栽 | 第43-44页 |
3.2.2 总RNA提取及cDNA的合成 | 第44页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-48页 |
3.3.1 定量引物特异性与方法可行性分析 | 第45-47页 |
3.3.2 BpCUC2基因组织表达差异分析 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-50页 |
4 白桦BpCUC2基因启动子的克隆及功能分析 | 第50-64页 |
4.1 实验材料 | 第50-51页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第50页 |
4.1.2 仪器与软件 | 第50-51页 |
4.2 实验方法 | 第51-55页 |
4.2.1 基因组DNA的提取与启动子区域的克隆 | 第51页 |
4.2.2 电泳检测及PCR产物回收 | 第51-52页 |
4.2.3 BpCUC2基因启动子植物表达载体构建 | 第52页 |
4.2.4 拟南芥的遗传转化 | 第52-54页 |
4.2.5 Luc2组织化学定位 | 第54-55页 |
4.2.6 BpCUC2基因启动子的序列分析 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-62页 |
4.3.1 BpCUC2基因启动子区域的克隆 | 第55页 |
4.3.2 重组质粒DNA拼接测序 | 第55-58页 |
4.3.3 转BpCUC2基因启动子拟南芥的筛选和PCR验证 | 第58页 |
4.3.4 PBpCUC2::Luc2在转基因拟南芥中的表达分析 | 第58-59页 |
4.3.5 BpCUC2基因启动子的序列分析 | 第59-62页 |
4.4 讨论 | 第62-63页 |
4.5 本章小结 | 第63-64页 |
5 高表达BpCUC2基因拟南芥的获得及表型分析 | 第64-75页 |
5.1 实验材料 | 第64-65页 |
5.1.1 材料与试剂 | 第64页 |
5.1.2 仪器与软件 | 第64-65页 |
5.2 实验方法 | 第65页 |
5.2.1 拟南芥的遗传转化 | 第65页 |
5.2.2 高表达BpCUC2基因拟南芥表型观察 | 第65页 |
5.3 结果与分析 | 第65-73页 |
5.3.1 高表达BpCUC2基因拟南芥筛选与PCR验证 | 第65-66页 |
5.3.2 高表达BpCUC2基因拟南芥表型分析 | 第66-73页 |
5.4 讨论 | 第73-74页 |
5.5 本章小结 | 第74-75页 |
结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
附录 | 第84-93页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |