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欧洲白桦BpCUC2基因及其启动子的克隆与功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第9-19页
    1.1 研究背景第9-14页
        1.1.1 欧洲白桦第9页
        1.1.2 NAC转录因子第9-13页
        1.1.3 植物顶端分生组织建成第13-14页
        1.1.4 叶片边缘形态建成第14页
    1.2 CUC2基因研究进展第14-17页
        1.2.1 CUC2基因简介第14页
        1.2.2 CUC2蛋白的结构特征第14-15页
        1.2.3 CUC2基因的功能第15-17页
    1.3 本研究目的和意义第17-19页
2 BpCUC2基因的克隆、载体构建及生物信息学分析第19-43页
    2.1 实验材料第19-20页
        2.1.1 材料与试剂第19页
        2.1.2 仪器与软件第19-20页
    2.2 实验方法第20-23页
        2.2.1 总RNA提取及cDNA的合成第20页
        2.2.2 BpCUC2基因全长cDNA的克隆第20-21页
        2.2.3 BpCUC2基因植物表达载体构建第21-23页
        2.2.4 BpCUC2生物信息学分析第23页
    2.3 结果与分析第23-41页
        2.3.1 总RNA质量检测第23-24页
        2.3.2 BpCUC2基因全长cDNA的克隆第24-25页
        2.3.3 BpCUC2基因植物表达载体构建分析第25-28页
        2.3.4 BpCUC2蛋白一级结构预测第28-33页
        2.3.5 BpCUC2蛋白二级结构预测第33-34页
        2.3.6 BpCUC2模体的识别和解析第34-35页
        2.3.7 BpCUC2蛋白三级结构预测第35-38页
        2.3.8 BpCUC2与其他物种的相似性比较及分子进化遗传分析第38-41页
    2.4 讨论第41-42页
    2.5 本章小结第42-43页
3 欧洲白桦不同组织部位BpCUC2基因差异表达分析第43-50页
    3.1 实验材料第43页
        3.1.1 材料与试剂第43页
        3.1.2 仪器与软件第43页
    3.2 实验方法第43-45页
        3.2.1 组织培养与组培苗的移栽第43-44页
        3.2.2 总RNA提取及cDNA的合成第44页
        3.2.3 实时荧光定量PCR第44-45页
    3.3 结果与分析第45-48页
        3.3.1 定量引物特异性与方法可行性分析第45-47页
        3.3.2 BpCUC2基因组织表达差异分析第47-48页
    3.4 讨论第48-49页
    3.5 本章小结第49-50页
4 白桦BpCUC2基因启动子的克隆及功能分析第50-64页
    4.1 实验材料第50-51页
        4.1.1 材料与试剂第50页
        4.1.2 仪器与软件第50-51页
    4.2 实验方法第51-55页
        4.2.1 基因组DNA的提取与启动子区域的克隆第51页
        4.2.2 电泳检测及PCR产物回收第51-52页
        4.2.3 BpCUC2基因启动子植物表达载体构建第52页
        4.2.4 拟南芥的遗传转化第52-54页
        4.2.5 Luc2组织化学定位第54-55页
        4.2.6 BpCUC2基因启动子的序列分析第55页
    4.3 结果与分析第55-62页
        4.3.1 BpCUC2基因启动子区域的克隆第55页
        4.3.2 重组质粒DNA拼接测序第55-58页
        4.3.3 转BpCUC2基因启动子拟南芥的筛选和PCR验证第58页
        4.3.4 PBpCUC2::Luc2在转基因拟南芥中的表达分析第58-59页
        4.3.5 BpCUC2基因启动子的序列分析第59-62页
    4.4 讨论第62-63页
    4.5 本章小结第63-64页
5 高表达BpCUC2基因拟南芥的获得及表型分析第64-75页
    5.1 实验材料第64-65页
        5.1.1 材料与试剂第64页
        5.1.2 仪器与软件第64-65页
    5.2 实验方法第65页
        5.2.1 拟南芥的遗传转化第65页
        5.2.2 高表达BpCUC2基因拟南芥表型观察第65页
    5.3 结果与分析第65-73页
        5.3.1 高表达BpCUC2基因拟南芥筛选与PCR验证第65-66页
        5.3.2 高表达BpCUC2基因拟南芥表型分析第66-73页
    5.4 讨论第73-74页
    5.5 本章小结第74-75页
结论第75-76页
参考文献第76-84页
附录第84-93页
攻读学位期间发表的学术论文第93-94页
致谢第94-95页

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