| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一部分 阿司匹林对多发性骨髓瘤的抗肿瘤效应 | 第17-64页 |
| （一） 前言 | 第17-20页 |
| （二） 材料与方法 | 第20-35页 |
| 1. 材料 | 第20-23页 |
| 1.1 细胞系 | 第20页 |
| 1.2 实验药物及配制方法 | 第20页 |
| 1.3 实验动物 | 第20页 |
| 1.4 主要试剂 | 第20-22页 |
| 1.5 主要抗体 | 第22页 |
| 1.6 实验主要仪器 | 第22-23页 |
| 1.7 实验主要材料 | 第23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.1 实验分组 | 第23页 |
| 2.2 细胞培养 | 第23页 |
| 2.3 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第23-24页 |
| 2.4 Annexin V-FITC 检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第25-26页 |
| 2.6 比色法检测 Caspase-3、8、9 活性 | 第26-27页 |
| 2.7 Western blot 法检测 PARP 蛋白表达 | 第27-31页 |
| 3. 动物实验 | 第31-34页 |
| 3.1 实验动物饲养 | 第31页 |
| 3.2 建立 NOD/SCID 小鼠皮下人骨髓瘤移植瘤模型 | 第31-32页 |
| 3.3 实验小鼠分组 | 第32页 |
| 3.4 实验药物剂量与用法 | 第32页 |
| 3.5 观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况与生存时间 | 第32-33页 |
| 3.6 组织学观察 | 第33-34页 |
| 4. 统计学分析 | 第34-35页 |
| （三） 结果 | 第35-57页 |
| 1. 阿司匹林抑制骨髓瘤细胞增殖 | 第35-37页 |
| 2. 阿司匹林诱导骨髓瘤细胞凋亡 | 第37-40页 |
| 3. 阿司匹林诱导 MM 细胞 G1 期阻滞 | 第40-43页 |
| 4. 阿司匹林通过活化 Caspase-3、-8、-9 诱导 MM 细胞中凋亡 | 第43-47页 |
| 5. 阿司匹林抑制荷 MM 瘤小鼠的肿瘤生长与延长荷瘤小鼠生存期 | 第47-57页 |
| 5.1 建立人骨髓瘤细胞移植瘤 NOD/SCID 小鼠动物模型 | 第47-51页 |
| 5.2 阿司匹林抑制人 MM 细胞移植瘤 NOD/SCID 小鼠的肿瘤生长 | 第51-54页 |
| 5.3 阿司匹林延长人 MM 细胞移植瘤 NOD/SCID 小鼠的生存时间 | 第54-57页 |
| （四） 讨论 | 第57-63页 |
| 1. 阿司匹林抑制骨髓瘤细胞增殖 | 第57-59页 |
| 2. 阿司匹林诱导骨髓瘤细胞凋亡 | 第59-60页 |
| 3. 阿司匹林阻滞骨髓瘤细胞于 G1 期 | 第60-61页 |
| 4. 阿司匹林在多发性骨髓瘤中的“双重角色” | 第61-63页 |
| （五） 结论 | 第63-64页 |
| 第二部分 阿司匹林抗骨髓瘤作用的分子机制 | 第64-103页 |
| （一） 前言 | 第64-66页 |
| （二） 材料与方法 | 第66-77页 |
| 1. 材料 | 第66-69页 |
| 1.1 细胞系 | 第66页 |
| 1.2 实验药物及配制方法 | 第66页 |
| 1.3 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.4 主要抗体 | 第67-68页 |
| 1.6 实验主要仪器 | 第68-69页 |
| 1.7 实验主要材料 | 第69页 |
| 2. 实验方法 | 第69-76页 |
| 2.1 实验分组 | 第69页 |
| 2.2 细胞培养 | 第69页 |
| 2.3 实时荧光定量 PCR 法检测 Bcl-2、Bax 与 VEGF 的 mRNA 表达 | 第69-72页 |
| 2.4 Western blot 法检测 Bcl-2、Bax 与 VEGF 的蛋白表达 | 第72-76页 |
| 3. 统计学分析 | 第76-77页 |
| （三） 结果 | 第77-97页 |
| 1. 阿司匹林下调 MM 细胞 Bcl-2 与 VEGF 及上调 Bax mRNA 表达 | 第77-93页 |
| 2. 阿司匹林下调 MM 细胞 Bcl-2 与 VEGF 及上调 Bax 蛋白表达 | 第93-97页 |
| （四） 讨论 | 第97-102页 |
| 1. 阿司匹林抗癌机制的多样化与细胞类型特异性 | 第97-98页 |
| 2. 阿司匹林抗骨髓瘤作用的分子机制 | 第98-102页 |
| 2.1 阿司匹林调节骨髓瘤细胞 Bcl-2 与 Bax 表达 | 第98-100页 |
| 2.2 阿司匹林抑制骨髓瘤细胞 VEGF 表达 | 第100-102页 |
| （五） 结论 | 第102-103页 |
| 第三部分 阿司匹林与硼替佐米在多发性骨髓瘤细胞中的联合作用及其机制探讨 | 第103-135页 |
| （一） 前言 | 第103-106页 |
| （二） 材料与方法 | 第106-116页 |
| 1. 材料 | 第106-109页 |
| 1.1 细胞系 | 第106页 |
| 1.2 实验药物及配制方法 | 第106页 |
| 1.3 主要试剂 | 第106-107页 |
| 1.4 主要抗体 | 第107-108页 |
| 1.5 实验主要仪器 | 第108页 |
| 1.6 实验主要耗材 | 第108-109页 |
| 2. 实验方法 | 第109-115页 |
| 2.1 实验分组 | 第109页 |
| 2.2 细胞培养 | 第109页 |
| 2.3 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第109-110页 |
| 2.4 Annexin V-FITC 检测细胞凋亡 | 第110-111页 |
| 2.5 Western blot 法检测 p-AKT、总 AKT 与 Survivin 的蛋白表达 | 第111-115页 |
| 3. 统计学分析 | 第115-116页 |
| （三） 结果 | 第116-127页 |
| 1. 阿司匹林增强硼替佐米对 MM 细胞的抗增殖作用 | 第116-119页 |
| 2. 阿司匹林增强硼替佐米对 MM 细胞的诱导凋亡效应 | 第119-121页 |
| 3. 阿司匹林抑制硼替佐米诱导的 Akt 磷酸化 | 第121-124页 |
| 4. 阿司匹林抑制硼替佐米诱导的 Survivin 蛋白上调 | 第124-127页 |
| （四） 讨论 | 第127-134页 |
| 1. 硼替佐米的抗骨髓瘤作用 | 第127页 |
| 2. 阿司匹林增强硼替佐米的抗骨髓瘤效应 | 第127-128页 |
| 3. 阿司匹林通过抑制 Akt 磷酸化增强硼替佐米抗骨髓瘤作用 | 第128-130页 |
| 3.1 Akt 通路在多发性骨髓瘤中的作用 | 第128-129页 |
| 3.2 ASA 抑制骨髓瘤细胞 Akt 磷酸化 | 第129页 |
| 3.3 ASA 抑制硼替佐米诱导的 Akt 磷酸化起化疗增敏作用 | 第129-130页 |
| 4. 阿司匹林通过下调 Survivin 表达对硼替佐米起化疗增敏作用 | 第130-132页 |
| 4.1 Survivin 在多发性骨髓瘤中的作用 | 第130-131页 |
| 4.2 ASA 下调骨髓瘤细胞 Survivin 表达 | 第131页 |
| 4.3 ASA 抑制硼替佐米诱导 Survivin 表达起化疗增敏作用 | 第131-132页 |
| 5. 阿司匹林联合硼替佐米在多发性骨髓瘤中的应用前景 | 第132-134页 |
| （五） 结论 | 第134-135页 |
| 结论与展望 | 第135-137页 |
| 1. 总结论 | 第135页 |
| 2．展望 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-148页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第148-149页 |
| 综述 | 第149-163页 |
| Akt 依赖性与多发性骨髓瘤耐药 | 第149-157页 |
| 参考文献 | 第154-157页 |
| 硼替佐米“分子学副作用”介导的多发性骨髓瘤耐药 | 第157-163页 |
| 参考文献 | 第160-163页 |
