| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文縮写注释 | 第19-21页 |
| 第一章 IL-8基因过表达慢病毒载体构建 | 第21-41页 |
| 1.1 前言 | 第21-23页 |
| 1.2 实验材料与方法 | 第23-30页 |
| 1.2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 1.2.2 PCR扩增目的基因 | 第25页 |
| 1.2.3 慢病毒载体酶切 | 第25-26页 |
| 1.2.4 重组克隆制备 | 第26页 |
| 1.2.5 阳性克隆的PCR鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.6 阳性克隆测序 | 第27页 |
| 1.2.7 质粒抽提 | 第27-28页 |
| 1.2.8 病毒包装细胞293T细胞的培养 | 第28页 |
| 1.2.9 慢病毒的包装 | 第28-29页 |
| 1.2.10 Real time定量PCR法测定滴度 | 第29-30页 |
| 1.3 结果与附图 | 第30-36页 |
| 1.3.1 PCR扩增目的基因 | 第31-32页 |
| 1.3.2 载体酶切后琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 1.3.3 阳性克隆的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 1.3.4 阳性克隆测序结果及结果分析 | 第33-34页 |
| 1.3.5 目的慢病毒感染293T细胞 | 第34-35页 |
| 1.3.6 Western Blot检测目的基因表达 | 第35页 |
| 1.3.7 实时定量PCR曲线图 | 第35-36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-40页 |
| 1.5 结论 | 第40-41页 |
| 第二章 慢病毒介导的IL-8表达对缺血心肌血管新生的影响及机制研究 | 第41-58页 |
| 2.1 前言 | 第41-42页 |
| 2.2 材料与方法 | 第42-47页 |
| 2.2.1 主要试剂及仪器 | 第42-44页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第44页 |
| 2.2.3 急性心肌梗死模型制备 | 第44-45页 |
| 2.2.4 体表心电图及超声心动图检查 | 第45页 |
| 2.2.5 实验分组 | 第45-46页 |
| 2.2.6 标本取材 | 第46页 |
| 2.2.7 苏木素—伊红(H.E)染色 | 第46页 |
| 2.2.8 EGFP免疫荧光检测 | 第46页 |
| 2.2.9 免疫组化染色 | 第46-47页 |
| 2.2.10 免疫印迹分析 | 第47页 |
| 2.2.11 统计学方法 | 第47页 |
| 2.3 结果 | 第47-49页 |
| 2.3.1 手术成功率 | 第47页 |
| 2.3.2 体表心电图 | 第47页 |
| 2.3.3 超声心动图检查 | 第47-48页 |
| 2.3.4 苏木素—伊红(H.E)染色 | 第48页 |
| 2.3.5 EGFP免疫荧光检测 | 第48页 |
| 2.3.6 免疫组化染色 | 第48-49页 |
| 2.3.7 免疫印迹分析 | 第49页 |
| 2.4 附图 | 第49-55页 |
| 2.5 讨论 | 第55-57页 |
| 2.6 结论 | 第57-58页 |
| 第三章 IL-8对缺氧脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响及机制研究 | 第58-75页 |
| 3.1 前言 | 第58-59页 |
| 3.2 材料与方法 | 第59-64页 |
| 3.2.1 主要试剂和仪器 | 第59-61页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第61页 |
| 3.2.3 人脐静脉内皮细胞的培养 | 第61-62页 |
| 3.2.4 CoCL2对HUVECs细胞的存活率/增殖能力影响 | 第62页 |
| 3.2.5 IL-8对缺氧HUVECs细胞的存活率/增殖能力影响 | 第62-63页 |
| 3.2.6 IL-8对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响 | 第63页 |
| 3.2.7 IL-8对脐静脉内皮细胞凋亡的影响 | 第63-64页 |
| 3.2.8 免疫印迹检测蛋白表达 | 第64页 |
| 3.2.9 统计学方法 | 第64页 |
| 3.3 结果 | 第64-66页 |
| 3.3.1 CoCL_2对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响 | 第64页 |
| 3.3.2 IL-8对缺氧脐静脉内皮细胞增殖能力的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.3 IL-8对脐静脉内皮细胞增殖能力的影响 | 第65页 |
| 3.3.4 IL-8对脐静脉内皮细胞凋亡的影响 | 第65页 |
| 3.3.5 IL-8对脐静脉内皮细胞表达磷酸化Akt的影响以及LY294002的干预作用 | 第65页 |
| 3.3.6 IL-8对脐静脉内皮细胞表达磷酸化GSK-3β~(ser9)的影响以及LY294002的干预作用 | 第65-66页 |
| 3.3.7 IL-8对脐静脉内皮细胞表达Caspase3的影响以及LY294002的干预作用 | 第66页 |
| 3.4 附图 | 第66-72页 |
| 3.5 讨论 | 第72-74页 |
| 3.6 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 综述 | 第80-91页 |
| 参考文献 | 第86-91页 |
| 攻读学位期间主要成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
