摘要 | 第6-10页 |
ABSTRACT | 第10-15页 |
符号说明 | 第19-21页 |
绪论 | 第21-23页 |
第一部分:黄酮及联合阿霉素在体外对髓系白血病细胞增殖凋亡影响 | 第23-50页 |
引言 | 第23页 |
1. 材料和方法 | 第23-29页 |
1.1 主要仪器 | 第23-24页 |
1.2 主要细胞系及试剂 | 第24-25页 |
1.3 主要实验方法 | 第25-29页 |
1.3.1 刺五加注射液有效成分的鉴定 | 第25-26页 |
1.3.2 细胞培养 | 第26页 |
1.3.3 分离健康成人外周血单个核细胞及 AML 患者原代细胞 | 第26-27页 |
1.3.4 CCK8 法测白血病细胞株对黄酮和阿霉素的 IC50 | 第27页 |
1.3.5 黄酮及联合阿霉素对白血病细胞株生长抑制和凋亡作用 | 第27-28页 |
1.3.6 黄酮及联合阿霉素对白血病原代细胞的抑制和凋亡作用 | 第28-29页 |
1.4 统计分析 | 第29页 |
2. 结果 | 第29-47页 |
2.1 刺五加注射液黄酮及槲皮素含量 | 第29页 |
2.2 CCK8 法测白血病细胞株对黄酮和阿霉素的 IC50 | 第29-31页 |
2.3 黄酮及联合阿霉素对白血病细胞株生长抑制和凋亡作用 | 第31-45页 |
2.3.1 细胞增殖变化 | 第31-35页 |
2.3.2 细胞凋亡变化 | 第35-45页 |
2.4 黄酮及联合阿霉素对白血病原代细胞抑制和凋亡作用 | 第45-47页 |
2.4.1 对原代细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
2.4.2 原代细胞凋亡的变化 | 第47页 |
3. 讨论 | 第47-50页 |
第二部分 黄酮及联合阿霉素诱导髓系白血病细胞凋亡的作用机制 | 第50-92页 |
引言 | 第50页 |
1. 材料和方法 | 第50-64页 |
1.1 主要仪器 | 第50-51页 |
1.2 主要细胞系及试剂 | 第51-53页 |
1.3 主要实验方法 | 第53-64页 |
1.3.1 细胞培养 | 第53页 |
1.3.2 基因芯片 | 第53-59页 |
1.3.3 Western blot 相关蛋白检测 | 第59-62页 |
1.3.4 流式细胞仪检测线粒体跨膜电位的变化 | 第62页 |
1.3.5 RT‐PCR 检测 K562、HL60/ADR 及 K672/ADR 中 MDR、MRP1 和 LRP 基因表达 | 第62-63页 |
1.3.6 流式细胞仪检测膜转运蛋白表达 | 第63-64页 |
1.4 统计分析 | 第64页 |
2. 结果 | 第64-88页 |
2.1 四种细胞株加入黄酮后信号通路的变化 | 第64-70页 |
2.2 黄酮单药及联合阿霉素后对细胞凋亡信号通路的研究 | 第70-81页 |
2.2.1 黄酮及联合阿霉素通过降低线粒体跨膜电位诱导 HL60、HL60/ADR、K562、K562/ADR 细胞的凋亡 | 第70-76页 |
2.2.2 黄酮及联合阿霉素对 HL60、HL60/ADR、K562/ADR 细胞株通过激活Caspase 途径诱导细胞的凋亡 | 第76-77页 |
2.2.3 黄酮及联合阿霉素对 HL60、HL60/ADR、K562/ADR 细胞株 Bcl‐2 家族凋亡途径的影响 | 第77-79页 |
2.2.4 黄酮及联合阿霉素作用 HL60、HL60/ADR、K562/ADR 细胞株通过对MAPK/ERK/JNK 信号通路诱导细胞凋亡 | 第79-81页 |
2.3 黄酮及联合阿霉素对 HL60/ADR 及 K562/ADR 耐药蛋白作用机制的研究 | 第81-85页 |
2.3.1 MDR、MRP1 及 LRP 基因在 K562/ADR、HL60/ADR、K562 细胞中的表达情况 | 第81-83页 |
2.3.3 黄酮及联合阿霉素后 K562/ADR 和 HL60/ADR 细胞株膜表面 MDR 和 MRP1蛋白的变化 | 第83-85页 |
2.4 黄酮单药及联合阿霉素后对 AML 患者原代细胞凋亡信号通路的研究 | 第85-88页 |
3. 讨论 | 第88-92页 |
第三部分 黄酮及联合阿霉素对髓系白血病荷瘤鼠体内作用研究 | 第92-118页 |
引言 | 第92页 |
1. 材料和方法 | 第92-97页 |
1.1 实验试剂及主要仪器 | 第92页 |
1.2 细胞系 | 第92页 |
1.3 实验动物 | 第92-93页 |
1.3.1 品系 | 第92-93页 |
1.3.2 饲养条件 | 第93页 |
1.4 实验方法 | 第93-97页 |
1.4.1 HL60 裸鼠成瘤试验 | 第93页 |
1.4.2. 裸鼠对黄酮耐受性及体液免疫的检测 | 第93-94页 |
1.4.3 HL60 荷瘤鼠模型的建立 | 第94-97页 |
1.5 统计分析 | 第97页 |
2. 结果 | 第97-115页 |
2.1 HL60 细胞接种裸鼠后成瘤情况 | 第97-98页 |
2.2 黄酮对裸鼠的耐受性及体液免疫变化 | 第98-100页 |
2.3 黄酮及联合阿霉素后对荷瘤鼠的影响 | 第100-115页 |
2.3.1 给药后荷瘤鼠生长状态及体重的变化 | 第100页 |
2.3.2 药物对荷瘤鼠的抑瘤作用 | 第100-102页 |
2.3.3 黄酮对荷瘤鼠的免疫增加作用 | 第102页 |
2.3.4 荷瘤鼠给药后外周血象的变化 | 第102-103页 |
2.3.5 黄酮、阿霉素及联合用药对荷瘤鼠凋亡机制的研究 | 第103-115页 |
3. 讨论 | 第115-118页 |
第四部分 黄酮在体内外对抗血管新生的作用机制 | 第118-143页 |
引言 | 第118页 |
1. 材料和方法 | 第118-127页 |
1.1 主要仪器 | 第118-119页 |
1.2 主要细胞及试剂 | 第119-120页 |
1.3 实验方法 | 第120-127页 |
1.3.1 细胞培养及加药 | 第120页 |
1.3.2 qRT‐PCR 检测 HL60 细胞血管新生因子 | 第120-123页 |
1.3.3 Western blot 检测 HL60 细胞血管新生因子蛋白 | 第123-124页 |
1.3.4 黄酮对斑马鱼新生血管的检测 | 第124-126页 |
1.3.5 HL60 荷瘤鼠肿瘤组织免疫组化测定血管新生因子蛋白情况 | 第126-127页 |
1.4 统计分析 | 第127页 |
2. 结果 | 第127-135页 |
2.1 黄酮对 HL60 细胞血管新生调控因子基因和蛋白的影响 | 第127-129页 |
2.2 Tg(fli1:EGFP)斑马鱼使用黄酮后血管发育抑制的活体荧光检测 | 第129-131页 |
2.3 Tg(fli1:EGFP)斑马鱼使用黄酮后血管新生调控因子基因的变化 | 第131-132页 |
2.4 黄酮、阿霉素及联合用药对 HL60 荷瘤鼠抗血管新生作用机制的研究 | 第132-135页 |
3. 讨论 | 第135-143页 |
全文总结 | 第143-144页 |
参考文献 | 第144-151页 |
附录:实验常用试剂的配制 | 第151-153页 |
致谢 | 第153-155页 |
学术论文和科研成果目录 | 第155-156页 |