| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 柑橘碎叶病毒研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1 生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.1.1 病毒分布 | 第13页 |
| 1.1.2 危害症状、寄主和传播方式 | 第13-15页 |
| 1.1.3 病毒粒子与理化性质 | 第15页 |
| 1.2 分子生物学特性 | 第15-17页 |
| 1.2.1 病毒的基因组结构、表达策略和功能 | 第15-16页 |
| 1.2.2 病毒株系分化 | 第16-17页 |
| 1.3 CTLV检测技术 | 第17-18页 |
| 1.3.1 生物学检测法 | 第17页 |
| 1.3.2 血清学方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 分子生物学方法 | 第18页 |
| 1.4 防治策略 | 第18-19页 |
| 2 香蕉束顶病毒研究进展 | 第19-23页 |
| 2.1 生物学特性 | 第19-20页 |
| 2.1.1 病毒分布 | 第19页 |
| 2.1.2 病毒症状、寄主和传播方式 | 第19-20页 |
| 2.1.3 病毒粒子与理化特性 | 第20页 |
| 2.2 BBTV分子生物学特性 | 第20-22页 |
| 2.2.1 病毒的基因结构、功能和表达策略 | 第20-21页 |
| 2.2.2 病毒株系分化 | 第21-22页 |
| 2.3 BBTV检测技术 | 第22-23页 |
| 2.3.1 生物学检测法 | 第22页 |
| 2.3.2 血清学方法 | 第22-23页 |
| 2.3.3 分子生物学方法 | 第23页 |
| 3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用 | 第23-31页 |
| 3.1 抗体的基本结构及其特性 | 第24-25页 |
| 3.2 单克隆抗体技术 | 第25-28页 |
| 3.2.1 杂交瘤技术基本原理 | 第25-27页 |
| 3.2.2 杂交瘤技术基本流程 | 第27-28页 |
| 3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用 | 第28-31页 |
| 3.3.1 病毒病害的诊断与检测 | 第28-29页 |
| 3.3.2 病毒株系鉴定及分离物分型 | 第29页 |
| 3.3.3 病毒蛋白抗原表位分析 | 第29-30页 |
| 3.3.4 作为探针分析病毒基因产物的功能 | 第30页 |
| 3.3.5 其他方面应用 | 第30-31页 |
| 4 研究目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 柑橘碎叶病毒外壳蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备 | 第33-56页 |
| 1 材料与方法 | 第33-48页 |
| 1.1 病毒 | 第33-34页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第34页 |
| 1.3 试剂 | 第34页 |
| 1.4 CTLV CP基因克隆及其原核表达载体的构建 | 第34-39页 |
| 1.5 CTLV CP基因在大肠杆菌中的表达及蛋白纯化 | 第39-43页 |
| 1.5.1 诱导表达 | 第39-40页 |
| 1.5.2 表达产物在非变性条件下的纯化 | 第40页 |
| 1.5.3 重组蛋白的SDS-PAGE及WESTERN BLOT鉴定 | 第40-43页 |
| 1.6 多克隆抗体和单克隆抗体的制备 | 第43-46页 |
| 1.6.1 多抗血清的制备 | 第43-44页 |
| 1.6.2 单克隆抗体制备 | 第44-46页 |
| 1.7 用制备的单抗建立测定CTLV的ELISA方法 | 第46-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-54页 |
| 2.1 CTLV外壳蛋白基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 2.2 CTLV外壳蛋白的原核表达与纯化 | 第49-50页 |
| 2.3 柑橘碎叶病毒单克隆抗体的制备和鉴定 | 第50-51页 |
| 2.4 抗CTLV CP单克隆抗体的特性 | 第51-52页 |
| 2.5 TAS-ELISA和WESTERN BLOT检测抗体特异性 | 第52-53页 |
| 2.6 DOT-ELISA检测方法的建立 | 第53-54页 |
| 2.7 样品检测结果 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 香蕉束顶病毒单克隆抗体的制备 | 第56-64页 |
| 1 材料和方法 | 第56-59页 |
| 1.1 病毒、培养基和抗体 | 第56-57页 |
| 1.2 香蕉束顶病毒的提纯 | 第57页 |
| 1.3 单克隆抗体的制备 | 第57页 |
| 1.4 腹水制备、抗体纯化、抗体类型及亚类鉴定和效价测定 | 第57-58页 |
| 1.5 WESTERNBOLT检测 | 第58页 |
| 1.6 BBTV的ACP-ELISA检测方法 | 第58页 |
| 1.7 DOT-ELISA的建立及检测应用 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-62页 |
| 2.1 香蕉束顶病毒的提纯及抗原制备 | 第59页 |
| 2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第59-60页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第60页 |
| 2.4 单抗的WESTERN BLOT分析 | 第60-61页 |
| 2.5 DOT-ELISA的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第61-62页 |
| 2.6 样品检测结果 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第71-73页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第73-78页 |
| 在学期间所取得的成果 | 第78页 |
