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ADMA在糖尿病视网膜病变早期血—视网膜屏障损伤中的作用及机制

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
目录第12-14页
专业名词缩写中英文对照表第14-15页
1 前言第15-18页
2 材料与方法第18-29页
    2.1 试剂与仪器第18-21页
        2.1.1 主要试剂第18-20页
        2.1.2 主要仪器第20-21页
    2.2 方法第21-29页
        2.2.1 动物及模型制备第21页
        2.2.2 动物模型检测指标第21-22页
        2.2.3 RPCs分离与培养第22-23页
        2.2.4 血浆、房水与细胞上清液ADMA水平的测定第23-24页
        2.2.5 细胞透性功能检测方案第24页
        2.2.6 RPCs凋亡的测定第24页
        2.2.7 细胞间通讯功能检测—细胞划痕实验法(SLDT)第24-25页
        2.2.8 PCR检测DDAH1、DDAH2、Cx43以及EphA2 mRNA表达第25-26页
        2.2.9 Western blot检测DDAH1、DDAH2、Cx43和p-Cx43蛋白表达第26-27页
        2.2.10 细胞免疫荧光检测RPCs Cx43以及p-Cx43的表达第27-28页
        2.2.11 细胞转染第28页
        2.2.12 统计学分析第28-29页
3 结果第29-34页
    3.1 建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型第29页
    3.2 大鼠血-视网膜屏障功能变化第29页
    3.3 大鼠视网膜电镜图像第29页
    3.4 血浆、房水ADMA水平与血浆NO水平变化第29页
    3.5 大鼠RPCs鉴定第29-30页
    3.6 高糖对RPCs透性和凋亡功能的影响第30页
        3.6.1 高糖对RPCs透性的影响第30页
        3.6.2 高糖对RPCs凋亡的影响第30页
    3.7 高糖对RPCs分泌ADMA和NO的影响第30页
    3.8 外源性ADMA对RPCs透性和凋亡的影响第30-31页
    3.9 NO供体对ADMA诱导RPCs透性和凋亡的改变的影响第31页
    3.10 Cx43、p-Cx43的表达变化第31-32页
        3.10.1 视网膜组织中Cx43和p-Cx43的表达第31页
        3.10.2 高糖对Cx43和p-Cx43表达的影响第31页
        3.10.3 外源性ADMA对Cx43和p-Cx43表达的影响第31页
        3.10.4 NO供体对ADMA诱导的Cx43 mRNA表达变化的影响第31-32页
    3.11 高糖和外源性ADMA对细胞间通讯功能GJIC的影响第32页
    3.12 EphA2的表达变化第32页
        3.12.1 视网膜组织中EphA2的表达第32页
        3.12.2 高糖对EphA2表达的影响第32页
        3.12.3 外源性ADMA对EphA2表达的影响第32页
        3.12.4 NO供体对ADMA诱导的EphA2表达变化的影响第32页
    3.13 DDAH1、DDAH2及DDAH1+2 siRNA的原代大鼠RPCs的建立第32-33页
    3.14 DDAH siRNA对RPCs上清液中ADMA和NO水平的影响第33页
    3.15 DDAH siRNA对高糖诱导的RPCs透性和凋亡增加的影响第33页
    3.16 DDAH siRNA对高糖诱导的Cx43和p-Cx43表达下调的影响第33页
    3.17 DDAH siRNA对高糖诱导的EphA2表达上调的影响第33-34页
附图第34-50页
4 讨论第50-53页
5 小结第53-54页
6 结论第54-55页
参考文献第55-60页
综述第60-69页
攻读学位期间主要的研究成果第69-70页
致谢第70页

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