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拟南芥Annexin3响应于干旱胁迫的初步研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-27页
    1.1 膜联蛋白家族研究现状第12页
    1.2 Annexins分子结构特征及结构第12-15页
        1.2.1 Annexins的C端保守结构域第13-14页
        1.2.2 Annexins的N端结构域及其翻译后修饰第14-15页
    1.3 植物Annexins的分布与定位第15-16页
    1.4 植物Annexins的主要功能第16-20页
        1.4.1 调节钙离子的动态平衡第16-17页
        1.4.2 作为F-actin的结合蛋白调节微丝动态平衡第17-18页
        1.4.3 参与植物细胞的定向分泌活动第18页
        1.4.4 植物Annexins对环境因子的适应——参与植物逆境生理第18-20页
    1.5 非生物胁迫对植物生长的影响第20-21页
    1.6 ABA与植物干旱胁迫第21-26页
        1.6.1 ABA在植物抗旱过程中发挥重要作用第21-22页
        1.6.2 ABA调节气孔运动的分子机理第22-24页
        1.6.3 ABA信号通路中的蛋白激酶和磷酸酶第24-25页
        1.6.4 ABA诱导气孔运动过程中微丝的动态变化第25-26页
    1.7 本实验的目的意义第26-27页
2 材料与方法第27-39页
    2.1 实验材料第27-28页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 菌株与质粒第27页
        2.1.3 酶与各种生化试剂第27页
        2.1.4 实验试剂配方第27-28页
        2.1.5 引物第28页
    2.2 实验方法第28-39页
        2.2.1 植物基因组的提取与纯化第28-29页
        2.2.2 载体构建第29-32页
            2.2.2.1 PCR扩增第29页
            2.2.2.2 连接到克隆载体第29-30页
            2.2.2.3 菌落PCR鉴定及测序第30页
            2.2.2.4 大肠杆菌质粒的提取第30-31页
            2.2.2.5 酶切、回收与连接第31-32页
        2.2.3 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)与转化第32页
            2.2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)第32页
            2.2.3.2 大肠杆菌感受态细胞的转化第32页
        2.2.4 根癌农杆菌(GV3101)感受态细胞的制备与转化第32-33页
            2.2.4.1 根癌农杆菌感受态细胞的制备第32-33页
            2.2.4.2 农杆菌感受态细胞的转化(冻融法)第33页
        2.2.5 纯合突变体植株的PCR鉴定第33-34页
        2.2.6 拟南芥的转化与转基因拟南芥的鉴定第34-35页
            2.2.6.1 拟南芥的转化第34页
            2.2.6.2 转基因拟南芥的鉴定第34-35页
        2.2.7 RNA的提取纯化与反转录第35-36页
            2.2.7.1 RNA提取第35页
            2.2.7.2 RNA的反转录第35-36页
        2.2.8 实时荧光定量PCR第36页
        2.2.9 GUS组织化学染色分析第36-37页
        2.2.10 ABA处理气孔运动实验分析第37页
        2.2.11 离体叶片的失水分析第37页
        2.2.12 短日照条件下的干旱处理表型分析第37-38页
        2.2.13 拟南芥的杂交第38-39页
3 结果与分析第39-45页
    3.1 AtANN3突变体的鉴定第39页
    3.2 AtANN3在气孔中表达第39-40页
    3.3 AtANN3与Actin存在共定位第40-41页
    3.4 AtANN3的突变体和超表达植株的失水实验第41-42页
    3.5 AtANN3超表达植株的气孔运动分析第42-43页
    3.6 ABI1和ABI2在AtANN3超表达植株中表达量上调第43-45页
4 讨论第45-47页
5 结论第47-48页
参考文献第48-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表论文情况第62页

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