| 摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-12页 |
| 英文缩写词(Abbreviations) | 第17-18页 |
| 引言 | 第18-22页 |
| 第一部分 筛选β-胡萝卜素作用后ESCC细胞中差异表达的miRNA | 第22-39页 |
| 前言 | 第22页 |
| 1.1 材料与方法 | 第22-32页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.2 主要设备 | 第23-24页 |
| 1.1.3 细胞系及细胞培养 | 第24页 |
| 1.1.4 细胞复苏、培养及冻存 | 第24页 |
| 1.1.5 Real-timePCR检测miRNA及mRNA的表达 | 第24-30页 |
| 1.1.6 β-胡萝卜素的配制 | 第30页 |
| 1.1.7 Western blot检测蛋白表达 | 第30-32页 |
| 1.2 结果与分析 | 第32-36页 |
| 1.2.1 筛选β-胡萝卜素作用后TE1细胞中差异表达的miRNA | 第32-33页 |
| 1.2.2 β-胡萝卜素对不同ESCC细胞中miR-375表达的影响 | 第33-34页 |
| 1.2.3 miR-375在ESCC细胞中的表达情况 | 第34页 |
| 1.2.4 不同浓度β-胡萝卜素对ESCC细胞中miR-375表达的影响 | 第34-35页 |
| 1.2.5 β-胡萝卜素作用后ESCC细胞中靶基因转录及蛋白水平表达变化 | 第35-36页 |
| 1.3 讨论 | 第36-38页 |
| 1.4 小结 | 第38-39页 |
| 第二部分 体外研究miR-375在β-胡萝卜素对ESCC抗肿瘤过程中的作用 | 第39-68页 |
| 前言 | 第39页 |
| 2.1 材料和方法 | 第39-44页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 2.1.3 细胞培养、传代及冻存 | 第40页 |
| 2.1.4 miR-375转染及分组 | 第40页 |
| 2.1.5 CCK-8法检测细胞增殖 | 第40-41页 |
| 2.1.6 FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.1.7 流式细胞仪检测细胞周期 | 第41-42页 |
| 2.1.8 Transwell法检测细胞迁移 | 第42-43页 |
| 2.1.9 细胞内活性氧(ROS)检测 | 第43页 |
| 2.1.10 细胞内丙二醛(MDA)检测 | 第43页 |
| 2.1.11 细胞线粒体膜电位检测 | 第43-44页 |
| 2.2 结果与分析 | 第44-65页 |
| 2.2.1 筛选miR-375 inhibitor和mimic最佳转染浓度 | 第44-45页 |
| 2.2.2 qRT-PCR检测转染后ESCC细胞中miR-375的表达 | 第45页 |
| 2.2.3 qRT-PCR检测β-胡萝卜素对转染后ESCC细胞中miR-375的表达 | 第45-46页 |
| 2.2.4 miR-375对β-胡萝卜素抑制细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
| 2.2.5 miR-375对β-胡萝卜素促进ESCC细胞凋亡的影响 | 第47-49页 |
| 2.2.6 miR-375对β-胡萝卜素阻遏ESCC细胞周期的影响 | 第49-51页 |
| 2.2.7 miR-375对β-胡萝卜素抑制ESCC细胞迁移的影响 | 第51-53页 |
| 2.2.8 miR-375对β-胡萝卜素调控ESCC细胞中氧化还原水平的影响 | 第53-60页 |
| 2.2.9 β-胡萝卜素对转染后细胞内miR-375靶蛋白表达的影响 | 第60-62页 |
| 2.2.10 miR-375对β-胡萝卜素调控ESCC细胞中β-catenin蛋白表达的影响 | 第62-65页 |
| 2.3 讨论 | 第65-67页 |
| 2.4 小结 | 第67-68页 |
| 第三部分 体内研究miR-375对β-胡萝卜素抗肿瘤作用的影响 | 第68-79页 |
| 前言 | 第68页 |
| 3.1 材料和方法 | 第68-72页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第68页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第68-69页 |
| 3.1.3 裸鼠及饲养 | 第69页 |
| 3.1.4 细胞转染及裸鼠分组 | 第69页 |
| 3.1.5 裸鼠人ESCC移植瘤模型的建立 | 第69页 |
| 3.1.6 体内药物浓度配制及给药方式 | 第69-70页 |
| 3.1.7 肿瘤体积的测量 | 第70页 |
| 3.1.8 组织内miR-375 RNA提取 | 第70页 |
| 3.1.9 组织内miR-375基因表达水平检测 | 第70页 |
| 3.1.10 组织细胞内ROS水平检测 | 第70页 |
| 3.1.11 免疫组织化学检测蛋白表达 | 第70-71页 |
| 3.1.12 TUNEL法检测组织细胞凋亡 | 第71页 |
| 3.1.13 数据处理与统计分析 | 第71-72页 |
| 3.2 结果与分析 | 第72-77页 |
| 3.2.1 miR-375对β-胡萝卜素抑制裸鼠ESCC移植瘤生长的影响 | 第72-74页 |
| 3.2.2 qRT-PCR检测miR-375在移植瘤内的表达水平 | 第74页 |
| 3.2.3 裸鼠移植瘤中ROS水平变化 | 第74-75页 |
| 3.2.4 TUNEL法检测移植瘤中ESCC细胞凋亡变化 | 第75-77页 |
| 3.2.5 免疫组化检测移植瘤组织中凋亡蛋白表达变化 | 第77页 |
| 3.3 讨论 | 第77-78页 |
| 3.4 小结 | 第78-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 综述 microRNAs在癌症中的新作用 | 第86-96页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 个人简历 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
