| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一部分 FNC对人非小细胞肺癌H460细胞增殖和凋亡的影响 | 第17-39页 |
| 一 材料与仪器 | 第17-20页 |
| 1.细胞株 | 第17页 |
| 2.供试药物 | 第17-18页 |
| 3.主要试剂及耗材 | 第18-19页 |
| 4.实验所需仪器 | 第19-20页 |
| 二 实验方法 | 第20-32页 |
| 1.药物配制 | 第20页 |
| 1.1 FNC溶液的配制 | 第20页 |
| 1.2 顺铂溶液的配制 | 第20页 |
| 2.细胞培养 | 第20-22页 |
| 2.1 细胞培养所需溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.1 含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.2 PBS缓冲液 | 第21页 |
| 2.1.3 0.25 %的胰酶消化液 | 第21页 |
| 2.1.4 细胞冻存液 | 第21页 |
| 2.2 细胞的复苏 | 第21页 |
| 2.3 细胞的传代 | 第21-22页 |
| 2.4 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.5 单细胞悬液制备和细胞计数 | 第22页 |
| 3.检测方法 | 第22-32页 |
| 3.1 MTT法检测FNC对H460细胞增殖的影响 | 第22-23页 |
| 3.1.1 实验原理 | 第22-23页 |
| 3.1.2 实验所需溶液MTT的配制 | 第23页 |
| 3.1.3 实验方法 | 第23页 |
| 3.2 流式细胞术(AnnexinV-FITC/PI)检测FNC对H460细胞凋亡率的影响 | 第23-24页 |
| 3.2.1 实验原理 | 第23-24页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第24页 |
| 3.3 吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双荧光染色法检测FNC对H460细胞凋亡的影响 | 第24-25页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第24-25页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第25页 |
| 3.4 WesternBlot法检测FNC作用H460细胞后线粒体细胞色素C的变化. | 第25-26页 |
| 3.4.1 实验原理 | 第25页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 3.4.2.1 线粒体的提取 | 第25-26页 |
| 3.4.2.2 线粒体的裂解 | 第26页 |
| 3.4.2.3 细胞色素C的检测 | 第26页 |
| 3.5 WesternBlot法检测FNC对H460细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响 | 第26-32页 |
| 3.5.1 实验原理 | 第26-27页 |
| 3.5.2 实验所需溶液配制 | 第27页 |
| 3.5.3 实验方法 | 第27-32页 |
| 3.5.3.1 H460细胞总蛋白的提取 | 第27-28页 |
| 3.5.3.2 BCA蛋白定量法测定蛋白浓度 | 第28-29页 |
| 3.5.3.3 蛋白样品的处理 | 第29页 |
| 3.5.3.4 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第29-30页 |
| 3.5.3.5 转膜 | 第30-31页 |
| 3.5.3.6 免疫反应 | 第31页 |
| 3.5.3.7 ECL化学发光法检测 | 第31页 |
| 3.5.3.8 条带分析 | 第31-32页 |
| 3.6 统计学分析 | 第32页 |
| 三 结果 | 第32-39页 |
| 1 FNC对H460细胞增殖的影响 | 第32-34页 |
| 2 FNC对H460细胞凋亡的影响 | 第34-37页 |
| 2.1 流式细胞仪检测结果 | 第34-35页 |
| 2.2 吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双荧光染色法结果 | 第35-36页 |
| 2.3 细胞色素C释放情况 | 第36-37页 |
| 3 FNC对H460细胞凋亡通路相关蛋白表达的影响 | 第37-39页 |
| 第二部分 FNC对Lewis肺癌荷瘤小鼠增殖和凋亡的影响 | 第39-47页 |
| 一 材料与仪器 | 第39-41页 |
| 1 细胞株 | 第39页 |
| 2 供试药物的配制 | 第39页 |
| 2.1 FNC溶液的配制 | 第39页 |
| 2.2 顺铂的配制 | 第39页 |
| 3 实验动物 | 第39-40页 |
| 4 主要试剂及耗材 | 第40页 |
| 5 主要实验仪器 | 第40-41页 |
| 二 实验方法 | 第41-43页 |
| 1 FNC对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 | 第41-42页 |
| 2 WesternBlot法检测FNC对瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响 | 第42页 |
| 2.1 组织蛋白的提取 | 第42页 |
| 2.2 方法详同第一部分3.5. | 第42页 |
| 3 统计学分析 | 第42-43页 |
| 三 实验结果 | 第43-47页 |
| 1 FNC对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 | 第43-44页 |
| 2 FNC对瘤组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响 | 第44-47页 |
| 四 讨论 | 第47-50页 |
| 五 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 综述 | 第53-68页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 个人简介 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
