摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略语 | 第9-13页 |
第一部分 前言 | 第13-20页 |
1.1 特发性脊柱侧凸(IS)简介 | 第13页 |
1.2 褪黑素与特发性脊柱侧凸的联系 | 第13-14页 |
1.3 内质网应激与细胞凋亡 | 第14-15页 |
1.4 骨膜蛋白(Periostin,POSTN) | 第15-17页 |
1.5 Septin7(SEPT7) | 第17-18页 |
1.6 研究内容 | 第18页 |
1.6.1 人成骨细胞系hFOB1.19的培养 | 第18页 |
1.6.2 褪黑素介导人成骨细胞内质网应激的机制研究 | 第18页 |
1.6.3 POSTN与褪黑素介导的人成骨细胞凋亡的相关性研究 | 第18页 |
1.6.4 SEPTIN7与褪黑素介导的人成骨细胞凋亡的相关性研究 | 第18页 |
1.7 研究目标及意义 | 第18-19页 |
1.8 技术路线 | 第19-20页 |
第二部分 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 研究对象 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
2.2.1 分子实验主要仪器 | 第21-22页 |
2.2.2 流式细胞技术主要仪器 | 第22页 |
2.3 主要耗材 | 第22页 |
2.4 实验方法 | 第22-32页 |
2.4.1 人成骨细胞系hFOB1.19的复苏 | 第22页 |
2.4.2 细胞换液与传代 | 第22页 |
2.4.3 MTT试验 | 第22-23页 |
2.4.4 流式细胞技术 | 第23-24页 |
2.4.5 qPCR检测 | 第24-27页 |
2.4.6 Westernblotting | 第27-31页 |
2.4.7 人成骨细胞的转染 | 第31-32页 |
2.5 统计方法 | 第32-33页 |
第三部分 实验结果 | 第33-43页 |
3.1 褪黑素作用于人成骨细胞后褪黑素受体MTNR1a和MTNR1b表达量的变化 | 第33页 |
3.2 褪黑素作用于人成骨细胞后内质网应激相关特征性蛋白GRP78和GRP94表达水平的变化 | 第33页 |
3.3 不同浓度的褪黑素作用于成骨细胞后流式细胞检测凋亡的变化 | 第33-35页 |
3.4 褪黑素受体抑制剂作用后褪黑素对人成骨细胞凋亡影响力的变化 | 第35页 |
3.5 褪黑素作用于人成骨细胞后对内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白mRNA和表达水平的变化 | 第35-36页 |
3.6 褪黑素作用于人成骨细胞后细胞凋亡相关蛋白表达水平的变化 | 第36-37页 |
3.7 不同浓度褪黑素作用于成骨细胞后POSTN和SPET7的表达水平变化 | 第37页 |
3.8 POSTN和SEPT7过表达质粒和干扰RNA转染成骨细胞后mRNA水平的变化 | 第37-38页 |
3.9 POSTN小干扰RNA转染成骨细胞后对不同处理组成骨细胞的内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白表达水平的变化 | 第38-39页 |
3.10 SEPT7过表达质粒和干扰RNA转染成骨细胞后对不同处理组成骨细胞的内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白表达水平的变化 | 第39-43页 |
第四部分 讨论 | 第43-48页 |
第五部分 结论 | 第48-49页 |
本论文创新性的自我评价 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-60页 |
综述 | 第60-69页 |
参考文献 | 第64-69页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
个人简历 | 第71页 |