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褪黑素介导人成骨细胞系hFOB 1.19细胞凋亡的机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
英文缩略语第9-13页
第一部分 前言第13-20页
    1.1 特发性脊柱侧凸(IS)简介第13页
    1.2 褪黑素与特发性脊柱侧凸的联系第13-14页
    1.3 内质网应激与细胞凋亡第14-15页
    1.4 骨膜蛋白(Periostin,POSTN)第15-17页
    1.5 Septin7(SEPT7)第17-18页
    1.6 研究内容第18页
        1.6.1 人成骨细胞系hFOB1.19的培养第18页
        1.6.2 褪黑素介导人成骨细胞内质网应激的机制研究第18页
        1.6.3 POSTN与褪黑素介导的人成骨细胞凋亡的相关性研究第18页
        1.6.4 SEPTIN7与褪黑素介导的人成骨细胞凋亡的相关性研究第18页
    1.7 研究目标及意义第18-19页
    1.8 技术路线第19-20页
第二部分 材料与方法第20-33页
    2.1 材料第20-21页
        2.1.1 研究对象第20页
        2.1.2 主要试剂第20-21页
    2.2 主要仪器第21-22页
        2.2.1 分子实验主要仪器第21-22页
        2.2.2 流式细胞技术主要仪器第22页
    2.3 主要耗材第22页
    2.4 实验方法第22-32页
        2.4.1 人成骨细胞系hFOB1.19的复苏第22页
        2.4.2 细胞换液与传代第22页
        2.4.3 MTT试验第22-23页
        2.4.4 流式细胞技术第23-24页
        2.4.5 qPCR检测第24-27页
        2.4.6 Westernblotting第27-31页
        2.4.7 人成骨细胞的转染第31-32页
    2.5 统计方法第32-33页
第三部分 实验结果第33-43页
    3.1 褪黑素作用于人成骨细胞后褪黑素受体MTNR1a和MTNR1b表达量的变化第33页
    3.2 褪黑素作用于人成骨细胞后内质网应激相关特征性蛋白GRP78和GRP94表达水平的变化第33页
    3.3 不同浓度的褪黑素作用于成骨细胞后流式细胞检测凋亡的变化第33-35页
    3.4 褪黑素受体抑制剂作用后褪黑素对人成骨细胞凋亡影响力的变化第35页
    3.5 褪黑素作用于人成骨细胞后对内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白mRNA和表达水平的变化第35-36页
    3.6 褪黑素作用于人成骨细胞后细胞凋亡相关蛋白表达水平的变化第36-37页
    3.7 不同浓度褪黑素作用于成骨细胞后POSTN和SPET7的表达水平变化第37页
    3.8 POSTN和SEPT7过表达质粒和干扰RNA转染成骨细胞后mRNA水平的变化第37-38页
    3.9 POSTN小干扰RNA转染成骨细胞后对不同处理组成骨细胞的内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白表达水平的变化第38-39页
    3.10 SEPT7过表达质粒和干扰RNA转染成骨细胞后对不同处理组成骨细胞的内质网应激相关通路和凋亡相关蛋白表达水平的变化第39-43页
第四部分 讨论第43-48页
第五部分 结论第48-49页
本论文创新性的自我评价第49-50页
参考文献第50-60页
综述第60-69页
    参考文献第64-69页
攻读学位期间取得的研究成果第69-70页
致谢第70-71页
个人简历第71页

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