| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 酒精概述 | 第12-17页 |
| 1.1.1 酒精在人体内的代谢机理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 酒精引起的几类疾病 | 第13-17页 |
| 1.2 解酒药物的研究进展 | 第17-22页 |
| 1.2.1 解酒药物的作用机理 | 第17-19页 |
| 1.2.2 解酒药物的分类 | 第19-22页 |
| 1.3 乙醛脱氢酶的研究 | 第22-27页 |
| 1.3.1 乙醛脱氢酶基因 | 第22-23页 |
| 1.3.2 乙醛脱氢酶与相关性疾病的研究 | 第23-25页 |
| 1.3.3 乙醛脱氢酶的研究方法进展 | 第25-27页 |
| 1.4 本实验的研究内容、背景及意义 | 第27-30页 |
| 1.4.1 课题研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 1.4.2 选题背景及意义 | 第28-30页 |
| 第2章 人ALDH2在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第30-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-33页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第30页 |
| 2.1.2 培养基 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30-33页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-40页 |
| 2.2.1 重组载体pBluescript SKII-ALDH2的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.2 表达载体pET32a-ALDH2的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.3 BL21(pET32a-ALDH2)的诱导表达及条件优化 | 第37-39页 |
| 2.2.4 目标蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-48页 |
| 2.3.1 质粒pBluescript SKII-ALDH2的构建 | 第40-42页 |
| 2.3.2 质粒pET32a-ALDH2的构建 | 第42-44页 |
| 2.3.3 pET32a-ALDH2的诱导表达及条件优化 | 第44-47页 |
| 2.3.4 乙醛脱氢酶的纯化 | 第47-48页 |
| 2.4 小结 | 第48-50页 |
| 第3章 乙醛脱氢酶活性检测 | 第50-62页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第50-54页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第51页 |
| 3.1.3 酶活性检测 | 第51-52页 |
| 3.1.4 包涵体变性、纯化和复性 | 第52-53页 |
| 3.1.5 复性缓冲液pH的研究 | 第53-54页 |
| 3.1.6 复性时间的优化 | 第54页 |
| 3.2 实验结果 | 第54-59页 |
| 3.2.1 不同复性条件的蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| 3.2.2 不同复性条件下ALDH2活性检测 | 第55-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-62页 |
| 第4章 小鼠醉酒实验 | 第62-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第62页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第62页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 4.2.1 ALDH2的发酵 | 第62-63页 |
| 4.2.2 ALDH2的纯化和复性 | 第63页 |
| 4.2.3 小鼠解酒实验 | 第63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-66页 |
| 4.4 小结 | 第66-68页 |
| 第5章 乙醛脱氢酶可溶性表达的研究 | 第68-76页 |
| 5.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 5.1.1 菌株和质粒 | 第68页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第68-69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69-71页 |
| 5.2.1 重组质粒pGEX-4T1ALDH2的构建 | 第69-70页 |
| 5.2.2 重组蛋白的表达及表达条件的优化 | 第70-71页 |
| 5.3 实验结果 | 第71-74页 |
| 5.3.1 质粒pGEX-4T1ALDH2的构建 | 第71-73页 |
| 5.3.2 目的蛋白的表达及条件优化 | 第73-74页 |
| 5.4 小结 | 第74-76页 |
| 第6章 结论及建议 | 第76-80页 |
| 6.1 结论 | 第76-77页 |
| 6.2 对后续工作的建议 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
