| 符号说明 | 第4-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-32页 |
| 1.1 来源 | 第15-16页 |
| 1.1.1 动物来源 | 第15-16页 |
| 1.1.2 环境来源 | 第16页 |
| 1.2 生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.2.1 形态特性 | 第16页 |
| 1.2.2 培养特性 | 第16-17页 |
| 1.2.3 生化特点 | 第17页 |
| 1.3 空肠弯曲菌的分型方法 | 第17-22页 |
| 1.3.1 血清学分型方法 | 第17-18页 |
| 1.3.2 基因分型 | 第18-22页 |
| 1.3.2.1 多位点序列分型(MLST) | 第18页 |
| 1.3.2.2 高脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术 | 第18-19页 |
| 1.3.2.3 随机扩增多态性分析（RAPD-PCR）技术 | 第19-20页 |
| 1.3.2.4 限制酶片段长度多态性（RFLP）分型 | 第20页 |
| 1.3.2.5 ERIC-PCR 指纹图谱技术 | 第20-22页 |
| 1.4 致病性 | 第22-24页 |
| 1.4.1 对人的致病性 | 第22-23页 |
| 1.4.2 对畜禽的致病性 | 第23-24页 |
| 1.5 与致病性有关的毒力因子 | 第24-27页 |
| 1.5.1 与粘附、定植有关的毒力因子 | 第24-25页 |
| 1.5.1.1 鞭毛蛋白（flagellin） | 第24页 |
| 1.5.1.2 黏附蛋白(PEB1) | 第24-25页 |
| 1.5.1.3 纤连结合蛋白(CadF) | 第25页 |
| 1.5.1.4 黏附定植相关基因(racR) | 第25页 |
| 1.5.2 趋化蛋白 | 第25页 |
| 1.5.3 磷脂酶活性蛋白基因(pldA) | 第25-26页 |
| 1.5.4 pVir 质粒 | 第26页 |
| 1.5.5 空肠弯曲菌的外毒素 | 第26页 |
| 1.5.6 空肠弯曲菌的内毒素 | 第26-27页 |
| 1.6 耐药方法及耐药机制 | 第27-29页 |
| 1.6.1 氟喹诺酮类药物 | 第27页 |
| 1.6.2 大环内酯类 | 第27-28页 |
| 1.6.3 四环素 | 第28页 |
| 1.6.4 氨基糖苷类 | 第28-29页 |
| 1.7 预防和控制 | 第29-31页 |
| 1.7.1 生物防控 | 第29-30页 |
| 1.7.2 物理防控 | 第30-31页 |
| 1.7.3 化学防控 | 第31页 |
| 1.8 研究目的和意义 | 第31-32页 |
| 2.材料和方法 | 第32-44页 |
| 2.1 材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 菌株 | 第32页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.3 培养基和主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.4 样品来源 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-44页 |
| 2.2.1 空肠弯曲菌的分离及鉴定 | 第34-36页 |
| 2.2.1.1 培养基的制备 | 第34页 |
| 2.2.1.2 样品的采集与运输 | 第34-35页 |
| 2.2.1.3 分离与纯化 | 第35页 |
| 2.2.1.4 菌种保存 | 第35-36页 |
| 2.2.2 双重 PCR 鉴定 | 第36页 |
| 2.2.2.1 分离株模板制备 | 第36页 |
| 2.2.2.2 引物设计 | 第36页 |
| 2.2.2.3 双重 PCR 条件的优化 | 第36页 |
| 2.2.2.4 特异性检测 | 第36页 |
| 2.2.2.5 双重 PCR 的应用 | 第36页 |
| 2.2.3 分离菌株的生化及 VADAS 鉴定 | 第36-38页 |
| 2.2.3.1 过氧化氢酶试验 | 第36页 |
| 2.2.3.2 氧化酶试验 | 第36-37页 |
| 2.2.3.3 马尿酸钠水解试验 | 第37页 |
| 2.2.3.4 API 生化鉴定 | 第37页 |
| 2.2.3.5 VIDAS 弯曲菌（CAM）试剂盒 | 第37-38页 |
| 2.2.4 药敏试验 | 第38页 |
| 2.2.5 血清学分型 | 第38-39页 |
| 2.2.6 ERIC-PCR 分型 | 第39-40页 |
| 2.2.6.1 ERIC-PCR 引物 | 第39页 |
| 2.2.6.2 ERIC-PCR 扩增 | 第39-40页 |
| 2.2.6.3 ERIC-PCR 产物检测 | 第40页 |
| 2.2.6.4 稳定性试验 | 第40页 |
| 2.2.7 毒力基因检测 | 第40-44页 |
| 2.2.7.1 细菌复苏 | 第40页 |
| 2.2.7.2 细菌模板的制备 | 第40页 |
| 2.2.7.3 毒力基因引物设计 | 第40-42页 |
| 2.2.7.4 毒力基因扩增 | 第42页 |
| 2.2.7.5 毒力基因 PCR 产物测序鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.7.6 多重 PCR 条件的优化 | 第43-44页 |
| 2.2.7.6.1 不同引物之间组合的优化 | 第43页 |
| 2.2.7.6.2 多重 PCR 退火温度的优化 | 第43页 |
| 2.2.7.6.3 多重 PCR 延伸时间的优化 | 第43页 |
| 2.2.7.6.4 多重 PCR Taq 酶量的优化 | 第43-44页 |
| 2.2.7.7 空肠弯曲菌分离株多重 PCR 的检测 | 第44页 |
| 2.2.8 动物实验 | 第44页 |
| 2.2.8.1 试验动物空肠弯曲菌分离 | 第44页 |
| 2.2.8.2 细菌的培养增值 | 第44页 |
| 2.2.8.3 动物攻毒 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-65页 |
| 3.1 细菌分离 | 第44-45页 |
| 3.2 双重 PCR 鉴定 | 第45-47页 |
| 3.2.1 双重 PCR 条件优化结果 | 第45-46页 |
| 3.2.3 双重 PCR 的特异性 | 第46-47页 |
| 3.3 双重 PCR 对空肠弯曲菌分离株的鉴定结果 | 第47-49页 |
| 3.3.1 农贸市场和养殖场鸡源空肠弯曲菌检测结果 | 第47-48页 |
| 3.3.2 肉鸡生产链中空肠弯曲菌的污染状况 | 第48页 |
| 3.3.3 肉鸡和蛋鸡场的检出结果 | 第48-49页 |
| 3.3.4 不同规模养殖场的检出结果 | 第49页 |
| 3.4 生化鉴定 | 第49-52页 |
| 3.4.1 马尿酸钠水解试验 | 第49-50页 |
| 3.4.2 氧化酶试验 | 第50页 |
| 3.4.3 过氧化氢酶试验 | 第50页 |
| 3.4.4 API 鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4.5 VIDAS 系统鉴定系统 | 第51-52页 |
| 3.5 药敏试验结果 | 第52-56页 |
| 3.5.1 质控菌株药敏结果 | 第52页 |
| 3.5.2 不同来源空肠弯曲菌分离株的耐药性情况 | 第52-54页 |
| 3.5.3 肉鸡、蛋鸡空肠弯曲菌的耐药情况 | 第54-55页 |
| 3.5.4 多重耐药情况 | 第55-56页 |
| 3.6 血清学分型结果 | 第56-57页 |
| 3.7 ERIC-PCR 分型结果 | 第57-61页 |
| 3.7.1 各养殖场的 ERIC-PCR 分型结果 | 第57-60页 |
| 3.7.1.1 蛋鸡场分离株 ERIC-PCR 分型结果 | 第57-59页 |
| 3.7.1.2 肉鸡场分离株 ERIC-PCR 分型结果 | 第59-60页 |
| 3.7.2 肉鸡生产链空肠弯曲菌分离株的 ERIC-PCR 分型结果 | 第60-61页 |
| 3.8 毒力基因检测结果 | 第61-64页 |
| 3.8.1 毒力基因扩增结果 | 第61页 |
| 3.8.2 毒力基因扩增片段产物鉴定 | 第61-62页 |
| 3.8.3 多重 PCR 方法建立 | 第62页 |
| 3.8.4 空肠弯曲菌分离株毒力基因分析 | 第62-64页 |
| 3.8.4.1 空肠弯曲菌总体检出情况 | 第62-63页 |
| 3.8.4.2 蛋鸡、肉鸡毒力基因检测结果 | 第63-64页 |
| 3.8.4.3 不同规模养殖场空肠弯曲菌的毒力基因检测结果 | 第64页 |
| 3.9 动物实验结果 | 第64-65页 |
| 4.讨论 | 第65-71页 |
| 4.1 鸡源空肠弯曲菌的分离情况 | 第65-66页 |
| 4.2 鸡源空肠弯曲菌的耐药情况 | 第66-68页 |
| 4.3 血清分型结果 | 第68页 |
| 4.4 ERIC-PCR 分型 | 第68-69页 |
| 4.5 鸡源空肠弯曲菌的毒力基因及其致病性 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 研究生期间发表论文 | 第82页 |
