中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略语词汇表 | 第15-17页 |
第一章 绪论 | 第17-23页 |
1.1 乳腺癌 | 第17-18页 |
1.1.1 乳腺癌的概述 | 第17页 |
1.1.2 三阴性乳腺癌 | 第17-18页 |
1.2 上皮间质转化(EMT) | 第18-20页 |
1.2.1 EMT的概述 | 第18-19页 |
1.2.2 EMT发生机制 | 第19-20页 |
1.2.3 EMT与肿瘤发展 | 第20页 |
1.3 泛素连接酶体系 | 第20-21页 |
1.3.1 泛素连接酶体系的概述 | 第20-21页 |
1.3.2 Pellino家族 | 第21页 |
1.4 Snail超家族 | 第21-23页 |
第二章 Pellino-1促进乳腺癌发展的研究 | 第23-38页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 细胞株 | 第23页 |
2.1.2 组织芯片及动物 | 第23页 |
2.1.3 试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要试剂配制 | 第23-24页 |
2.1.5 仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-29页 |
2.2.1 细胞的复苏、培养及冻存 | 第24-25页 |
2.2.2 免疫组化检测实验 | 第25-26页 |
2.2.3 提取组织蛋白 | 第26页 |
2.2.4 Western blotting | 第26-27页 |
2.2.5 稳转细胞株构建 | 第27-28页 |
2.2.6 提取RNA及实时定量PCR | 第28-29页 |
2.2.7 动物实验 | 第29页 |
2.2.8 数据分析 | 第29页 |
2.3 实验结果 | 第29-37页 |
2.3.1 乳腺癌组织中Pellino-1的蛋白表达显著增加 | 第29-31页 |
2.3.2 乳腺癌组织中Pellino-1的mRNA水平显著升高 | 第31-32页 |
2.3.3 Pellino-1在三阴性乳腺癌中表达明显提高 | 第32-34页 |
2.3.4 敲低Pellino-1对乳腺癌增殖和转移的影响 | 第34-37页 |
2.4 讨论 | 第37-38页 |
第三章 Pellino-1促进乳腺癌的分子机制研究 | 第38-51页 |
3.1 实验材料 | 第38-39页 |
3.1.1 细胞株 | 第38页 |
3.1.2 试剂 | 第38页 |
3.1.4 主要试剂配置 | 第38页 |
3.1.5 仪器 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-42页 |
3.2.1 细胞的复苏、培养及冻存 | 第39页 |
3.2.2 EdU增殖实验 | 第39-40页 |
3.2.3 Transwell侵袭实验 | 第40页 |
3.2.4 成球实验 | 第40页 |
3.2.5 免疫共沉淀实验(CO-IP) | 第40-41页 |
3.2.6 Western blotting | 第41页 |
3.2.7 RNA提取及实时定量PCR | 第41页 |
3.2.8 质粒及小干扰RNA转染 | 第41页 |
3.2.9 Pellino-1与Snail/Slug相关性的检测 | 第41-42页 |
3.3 实验结果 | 第42-47页 |
3.3.1 敲低Pellino-1对乳腺癌细胞增殖、侵袭和干性的影响 | 第42-43页 |
3.3.2 敲低Pellino-1抑制乳腺癌细胞的EMT | 第43-44页 |
3.3.3 过表达Snail/Slug逆转Pellino-1 KD的作用 | 第44-45页 |
3.3.4 Pellino-1与Snail/Slug存在相互作用 | 第45-47页 |
3.4 总结及讨论 | 第47-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间成果 | 第59-60页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第60页 |