| 中文摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-14页 |
| 1 干扰素（IFN）概述 | 第15-26页 |
| 1.1 干扰素的分类及其受体分布 | 第15-16页 |
| 1.2 IFN-λ的空间结构 | 第16-17页 |
| 1.3 模式识别受体及其介导的信号通路 | 第17-19页 |
| 1.4 JAK-STAT信号通路 | 第19-20页 |
| 1.5 干扰素诱导基因 | 第20-22页 |
| 1.6 干扰素的免疫调节 | 第22-23页 |
| 1.7 昆虫杆状病毒表达系统 | 第23-24页 |
| 1.8 国内外研究现状分析 | 第24页 |
| 1.9 研究内容及方法 | 第24-25页 |
| 1.10 研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 2 实验材料及方法 | 第26-45页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 质粒、受体菌、细胞系 | 第27页 |
| 2.3 实验试剂 | 第27页 |
| 2.4 主要试剂配制 | 第27-31页 |
| 2.4.1 分子克隆相关培养基和缓冲液配制 | 第27-28页 |
| 2.4.2 Western Blot相关试剂配制 | 第28-31页 |
| 2.5 引物 | 第31页 |
| 2.6 重组杆状病毒供体质粒的构建 | 第31-35页 |
| 2.6.1 犬IFN-λ基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.6.2 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第32-33页 |
| 2.6.3 酶切反应 | 第33页 |
| 2.6.4 连接反应 | 第33-34页 |
| 2.6.5 连接产物转化 | 第34页 |
| 2.6.6 菌液测序 | 第34页 |
| 2.6.7 质粒小量提取 | 第34-35页 |
| 2.7 转座及蓝/白斑筛选 | 第35页 |
| 2.8 重组穿梭质粒的无内毒素提取及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.9 重组穿梭质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.10 转染 | 第37-38页 |
| 2.11 重组杆状病毒DNA的提取与鉴定 | 第38页 |
| 2.11.1 提取病毒DNA | 第38页 |
| 2.11.2 PCR鉴定重组杆状病毒 | 第38页 |
| 2.12 重组杆状病毒的繁殖及病毒滴度测定 | 第38-39页 |
| 2.12.1 病毒繁殖 | 第38-39页 |
| 2.12.2 TCID50法测定病毒滴度 | 第39页 |
| 2.13 IFA检测重组蛋白的表达 | 第39-40页 |
| 2.14 重组蛋白在昆虫细胞中的表达检测 | 第40-41页 |
| 2.14.1 细胞处理 | 第40页 |
| 2.14.2 蛋白样品的制备 | 第40页 |
| 2.14.3 蛋白定量 | 第40页 |
| 2.14.4 Western Blot步骤 | 第40-41页 |
| 2.15 蛋白纯化 | 第41-42页 |
| 2.15.1 His柱子亲和层析 | 第41-42页 |
| 2.16 实时荧光定量PCR（qPCR） | 第42-44页 |
| 2.16.1 RNA的提取 | 第42页 |
| 2.16.2 mRNA的反转录 | 第42-43页 |
| 2.16.3 Real-time PCR | 第43-44页 |
| 2.17 重组干扰素的体外活性检测 | 第44-45页 |
| 3 实验结果与分析 | 第45-52页 |
| 3.1 犬IFN-λ基因的PCR扩增 | 第45页 |
| 3.2 重组供体质粒pFast-IFN-λ的构建以及鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3 重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-IFN-λ的的提取和鉴定 | 第46-47页 |
| 3.4 重组杆状病毒rBac-IFN-λ的PCR鉴定 | 第47页 |
| 3.5 扩增重组杆状病毒 | 第47-48页 |
| 3.6 间接免疫荧光以及免疫印迹检测CaIFN-γ的表达 | 第48-49页 |
| 3.7 蛋白纯化及SDS-PAGE验证 | 第49页 |
| 3.8 犬λ干扰素刺激MDCK细胞对干扰素诱导基因的影响 | 第49-50页 |
| 3.9 犬λ干扰素的抗病毒活性测定 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
