| 中文摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 缩写符号 | 第18-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-33页 |
| 1.1 结肠癌的发病机制 | 第19-22页 |
| 1.2 结肠癌的诊断与治疗 | 第22页 |
| 1.3 多糖研究进展 | 第22-27页 |
| 1.3.1 多糖的直接抗肿瘤作用 | 第23-25页 |
| 1.3.2 多糖通过免疫调节作用间接抑制肿瘤生长 | 第25-27页 |
| 1.4 多糖对肠道微生物组成的影响 | 第27-28页 |
| 1.5 多糖对肠道免疫的影响 | 第28-30页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第30-33页 |
| 第二章 黑根霉胞外多糖抑制结肠癌生长的作用机制 | 第33-77页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.1 实验动物与肿瘤细胞 | 第33-34页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-42页 |
| 2.2.1 黑根霉胞外多糖的提取与纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.2 肿瘤细胞培养及处理 | 第35页 |
| 2.2.3 小鼠结肠癌诱导模型的建立及处理 | 第35-36页 |
| 2.2.4 小鼠结肠癌肺转移模型的构建 | 第36页 |
| 2.2.5 样本收集及处理 | 第36页 |
| 2.2.6 免疫组织化学染色 | 第36-37页 |
| 2.2.7 蛋白提取 | 第37-38页 |
| 2.2.8 Western-blotting | 第38页 |
| 2.2.9 肿瘤细胞及组织样品总RNA提取 | 第38-39页 |
| 2.2.10 构建cDNA文库 | 第39页 |
| 2.2.11 Illumina测序数据过滤及拼接 | 第39页 |
| 2.2.12 测序数据与参考基因组比对 | 第39-40页 |
| 2.2.13 基因表达量分析 | 第40页 |
| 2.2.14 差异表达基因检测及分析 | 第40页 |
| 2.2.15 差异表达基因功能注释、GO功能富集分析和KEGG分析 | 第40-41页 |
| 2.2.16 荧光定量PCR验证 | 第41-42页 |
| 2.2.17 数据整理和统计 | 第42页 |
| 2.3 实验结果 | 第42-71页 |
| 2.3.1 EPS1-1对CT26细胞DNA片段化和集落形成的作用 | 第42-43页 |
| 2.3.2 EPS1-1对CT26细胞转录组及基因表达影响的分析 | 第43-50页 |
| 2.3.2.1 不同处理下CT26细胞Illumina测序数据质量分析 | 第43-44页 |
| 2.3.2.2 不同处理下CT26细胞样品间相关性分析 | 第44-45页 |
| 2.3.2.3 不同处理下CT26细胞不同处理组间差异表达基因分析 | 第45-46页 |
| 2.3.2.4 EPS1-1处理时间不同对CT26肿瘤细胞差异基因GO功能分类的影响 | 第46-48页 |
| 2.3.2.5 EPS1-1处理时间不同对CT26细胞差异基因KEGG通路富集的影响 | 第48-50页 |
| 2.3.2.6 CT26细胞中PI3K/Akt-mTOR相关信号转导通路相关基因分析及验证 | 第50页 |
| 2.3.3 EPS1-1对小鼠结肠癌转录组测序及基因表达影响的分析 | 第50-57页 |
| 2.3.3.1 不同处理下小鼠结肠癌Illumina测序数据质量分析 | 第50-51页 |
| 2.3.3.2 不同处理下结肠癌组织间相关性分析 | 第51-52页 |
| 2.3.3.3 不同处理下小鼠结肠癌组织间差异表达基因分析 | 第52-53页 |
| 2.3.3.4 EPS1-1对小鼠结肠癌组织中差异基因GO功能分类的影响 | 第53-54页 |
| 2.3.3.5 EPS1-1对小鼠结肠癌组织中差异表达基因KEGG通路富集的影响 | 第54-56页 |
| 2.3.3.6 小鼠结肠癌组织中PI3K/Akt-mTOR相关信号转导通路相关基因分析及验证 | 第56-57页 |
| 2.3.4 EPS1-1体内外对PI3K/Akt-mTOR信号转导通路相关蛋白表达的影响 | 第57-65页 |
| 2.3.5 EPS1-1抑制CT26细胞肺转移组织转录组的初步分析 | 第65-71页 |
| 2.3.5.1 CT26细胞肺转移组织Illumina测序数据质量分析 | 第65页 |
| 2.3.5.2 不同处组中CT26细胞肺转移组织间相关性分析 | 第65-66页 |
| 2.3.5.3 不同处理组中CT26细胞肺转移组织间基因差异表达分析 | 第66-67页 |
| 2.3.5.4 CT26肺转移组织内基因GO功能及KEGG富集分析 | 第67-69页 |
| 2.3.5.5 EPS1-1对CT26细胞肺转移组织内转移相关基因表达的影响 | 第69-71页 |
| 2.4 讨论 | 第71-77页 |
| 第三章 黑根霉胞外多糖对肠道的免疫调节作用 | 第77-95页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第78页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第78页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第78页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第78页 |
| 3.2 实验方法 | 第78-83页 |
| 3.2.1 胃酸环境模拟 | 第78-79页 |
| 3.2.2 结肠癌小鼠粪便样品收集 | 第79页 |
| 3.2.3 短链不饱和脂肪酸含量测定 | 第79-80页 |
| 3.2.4 组织学切片分析 | 第80页 |
| 3.2.5 阿利新蓝-过碘酸雪夫氏染色 | 第80-81页 |
| 3.2.6 肠道微生物多样性检测 | 第81-83页 |
| 3.2.7 统计方法 | 第83页 |
| 3.3 实验结果 | 第83-91页 |
| 3.3.1 EPS1-1对模拟胃环境的抗消化能力 | 第83-84页 |
| 3.3.2 EPS1-1对结肠癌小鼠肠道微生物的影响 | 第84-89页 |
| 3.3.3 EPS1-1对小鼠肠道中短链脂肪酸(SCFAs)及乳酸含量的影响 | 第89页 |
| 3.3.4 EPS1-1对小鼠肠道形态结构的影响 | 第89-90页 |
| 3.3.5 EPS1-1对小鼠肠道免疫细胞的影响 | 第90-91页 |
| 3.4 讨论 | 第91-95页 |
| 第四章 黑根霉胞外多糖对腹腔巨噬细胞的免疫调节机制 | 第95-111页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第95-96页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第95页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第95-96页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第96页 |
| 4.2 试验方法 | 第96-98页 |
| 4.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞制备及纯化 | 第96页 |
| 4.2.2 小鼠腹腔巨噬细胞活性检测 | 第96页 |
| 4.2.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性检测 | 第96页 |
| 4.2.4 细胞形态观察 | 第96-97页 |
| 4.2.5 细胞RNA提取 | 第97页 |
| 4.2.6 cDNA合成 | 第97页 |
| 4.2.7 引物设计及荧光定量分析 | 第97页 |
| 4.2.8 细胞蛋白提取 | 第97-98页 |
| 4.2.9 Western Blotting | 第98页 |
| 4.3 实验结果 | 第98-106页 |
| 4.3.1 EPS1-1对小鼠腹腔巨噬细胞的毒副作用 | 第98页 |
| 4.3.2 EPS1-1对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性的影响 | 第98-99页 |
| 4.3.3 EPS1-1对小鼠巨噬细胞形态的影响 | 第99-100页 |
| 4.3.4 EPS1-1对小鼠腹腔巨噬细胞内iNOS、IL-2和TNF-α mRNA表达的影响 | 第100-101页 |
| 4.3.5 EPS1-1激活小鼠腹腔巨噬细胞内NF-κB和MAPK信号通路 | 第101-103页 |
| 4.3.6 MAPK信号通路特异性抑制剂对巨噬细胞内iNOS、IL-2和TNF-αmRNA表达的影响 | 第103-104页 |
| 4.3.7 EPS1-1对小鼠腹腔巨噬细胞内信号通路的相互作用 | 第104-106页 |
| 4.4 讨论 | 第106-111页 |
| 第五章 总论 | 第111-117页 |
| 总结与展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-133页 |
| 附录 | 第133-153页 |
| 致谢 | 第153-155页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第155-156页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第156页 |
