摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1.背景 | 第7-12页 |
1.1 辽宁绒山羊的概述 | 第7页 |
1.2 辽宁绒山羊基因的部分研究进展 | 第7-8页 |
1.2.1 MAPK信号通路及支架蛋白 | 第7-8页 |
1.2.2 鸟甘酸还原酶 2 | 第8页 |
1.3 基因表达的研究方法 | 第8-9页 |
1.3.1 RNA干扰 | 第8-9页 |
1.3.2 慢病毒(Lentiviral vectors)载体 | 第9页 |
1.4 影响毛发生长的主要因素 | 第9-11页 |
1.4.1 褪黑激素(Melatonin,MT) | 第9-10页 |
1.4.2 成纤维细胞因子(Fibroblast Growth Factor,FGF5) | 第10页 |
1.4.3 类胰岛素细胞因子(Insulinlike Growth Factor,IGF-1) | 第10-11页 |
1.5 研究目的及意义 | 第11-12页 |
2.材料与方法 | 第12-22页 |
2.1 材料 | 第12-13页 |
2.2 方法 | 第13-22页 |
2.2.1 辽宁绒山羊皮肤细胞培养 | 第13页 |
2.2.2 摸索最佳MOI值 | 第13-14页 |
2.2.3 Noggin基因干扰载体的构建 | 第14-17页 |
2.2.4 Noggin基因干扰慢病毒的包装、收集和滴度测定 | 第17-18页 |
2.2.5 慢病毒感染辽宁绒山羊皮肤细胞 | 第18-20页 |
2.2.6 外源蛋白处理辽宁绒山羊皮肤细胞 | 第20-22页 |
3. 结果 | 第22-40页 |
3.1 细胞培养 | 第22-23页 |
3.2 最佳MOI值 | 第23-24页 |
3.3 Noggin基因干扰载体的构建与鉴定 | 第24-27页 |
3.4 Noggin基因干扰慢病毒包装 | 第27-30页 |
3.5 慢病毒感染辽宁绒山羊皮肤细胞 | 第30-32页 |
3.6 MP1基因在辽宁绒山羊皮肤细胞中的表达 | 第32-36页 |
3.7 GMPR2基因在皮肤中的表达分析 | 第36-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录A 质粒抽提方法 | 第50-51页 |
附录B goat ACTB内参基因、MP1和GMPR2基因曲线图 | 第51-52页 |
附录C 病毒液感染后GMPR2的扩增曲线及溶解曲线 | 第52-53页 |
附录D MP1基因在MT组荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第53-56页 |
附录E MP1基因在FGF5组荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第56-59页 |
附录F GMPR2基因在FGF5组荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第59-62页 |
附录G MP1基因在IGF-1 组荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第62-65页 |
附录H GMPR2基因在IGF-1 组荧光定量的扩增曲线及溶解曲线 | 第65-68页 |
附录I 协同实验组的扩增曲线及溶解曲线 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |