| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略词 | 第14-16页 |
| 图表目录 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-46页 |
| 1 脂肪细胞分化的研究进展 | 第17-28页 |
| 1.1 脂肪组织概述及研究脂肪细胞分化的重要意义 | 第17-20页 |
| 1.2 脂肪细胞的分化过程 | 第20-25页 |
| 1.2.1 从间充质干细胞向前体脂肪细胞的命运决定 | 第21-23页 |
| 1.2.2 从前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞的定向分化 | 第23-25页 |
| 1.3 脂肪细胞分化的转录调控 | 第25-26页 |
| 1.4 研究脂肪细胞分化的细胞模型 | 第26-28页 |
| 2 调控脂肪细胞分化的因子 | 第28-35页 |
| 2.1 cAMP信号通路对脂肪细胞分化的调控 | 第28-31页 |
| 2.2 核转录因子PPAR家族对脂肪细胞分化的调控 | 第31-33页 |
| 2.3 脂肪酸对脂肪细胞分化的调控 | 第33-35页 |
| 3 小结 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-46页 |
| 第二章 hMADS细胞体外诱导分化为脂肪细胞与成骨细胞 | 第46-68页 |
| 1 材料和方法 | 第47-56页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第47页 |
| 1.2 主要实验材料和试剂 | 第47-48页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第48-50页 |
| 1.4 实验方法 | 第50-56页 |
| 1.4.1 hMADS细胞的常规培养 | 第50页 |
| 1.4.2 hMADS细胞的冻存与复苏 | 第50-51页 |
| 1.4.3 hMADS细胞向脂肪细胞的定向诱导分化 | 第51-52页 |
| 1.4.4 hMADS细胞向成骨细胞的定向诱导分化 | 第52页 |
| 1.4.5 油红O染色 | 第52页 |
| 1.4.6 茜素红染色 | 第52-53页 |
| 1.4.7 样品总RNA提取 | 第53页 |
| 1.4.8 cDNA第一链合成 | 第53-54页 |
| 1.4.9 引物设计与合成 | 第54页 |
| 1.4.10 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR | 第54-55页 |
| 1.4.11 数据统计 | 第55-56页 |
| 2 实验结果 | 第56-61页 |
| 2.1 hMADS细胞的培养及生长特性 | 第56-57页 |
| 2.2 hMADS细胞向脂肪细胞的定向诱导分化及相关基因的时序表达 | 第57-59页 |
| 2.3 hMADS细胞向成骨细胞方向的诱导分化及相关基因的时序表达 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 第三章 cAMP信号通路在hMADS细胞成脂分化中的作用研究 | 第68-104页 |
| 1 材料和方法 | 第70-85页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第70页 |
| 1.2 主要实验材料和试剂 | 第70-71页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第71-75页 |
| 1.4 实验方法 | 第75-85页 |
| 1.4.1 hMADS细胞向脂肪细胞的定向诱导分化 | 第75页 |
| 1.4.2 Rap1激活实验 | 第75-76页 |
| 1.4.3 Western-Blot | 第76-78页 |
| 1.4.4 样品总RNA提取 | 第78-79页 |
| 1.4.5 cDNA第一链合成 | 第79-80页 |
| 1.4.6 引物设计与合成 | 第80页 |
| 1.4.7 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR | 第80-81页 |
| 1.4.8 PKA激酶活性测定 | 第81-82页 |
| 1.4.9 hMADS细胞的逆转录病毒转染 | 第82-85页 |
| 1.4.10 数据统计 | 第85页 |
| 2 实验结果 | 第85-97页 |
| 2.1 hMADS细胞的成脂分化依赖于cAMP激活剂的诱导 | 第85-87页 |
| 2.2 Epac和Rap基因在hMADS细胞成脂分化过程中的表达 | 第87-89页 |
| 2.3 cAMP的促成脂分化作用是由PKA和Epac共同介导的 | 第89-92页 |
| 2.4 PKA拮抗剂对hMADS细胞成脂分化的作用 | 第92-93页 |
| 2.5 显性失活的Epac1的表达抑制hMADS细胞的成脂分化 | 第93-96页 |
| 2.6 ROCK抑制剂Y-27632对hMADS细胞成脂分化的作用 | 第96-97页 |
| 3 讨论 | 第97-100页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 第四章 PPAR配体及多种脂肪酸对hMADS细胞成脂分化的作用研究 | 第104-124页 |
| 1 材料和方法 | 第106-111页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第106页 |
| 1.2 主要实验材料和试剂 | 第106页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第106-108页 |
| 1.4 实验方法 | 第108-111页 |
| 1.4.1 多种PPAR配体对hMADS细胞成脂分化的诱导 | 第108页 |
| 1.4.2 多种脂肪酸对hMADS细胞成脂分化的诱导 | 第108-109页 |
| 1.4.3 Carbaprostacyclin对hMADS细胞成脂分化的作用 | 第109-110页 |
| 1.4.4 GPDH活性测定 | 第110-111页 |
| 1.4.5 数据统计 | 第111页 |
| 2 实验结果 | 第111-116页 |
| 2.1 多种PPAR配体对hMADS细胞成脂分化的作用 | 第111-112页 |
| 2.2 多种脂肪酸对hMADS细胞成脂分化的作用 | 第112-114页 |
| 2.3 Carbaprostacyclin对hMADS成脂分化的作用 | 第114-116页 |
| 3 讨论 | 第116-119页 |
| 参考文献 | 第119-124页 |
| 结论 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 博士期间发表的主要论文 | 第127页 |
