| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 肿瘤靶向治疗策略 | 第12-18页 |
| 1.2.1 以生长、增殖分子为靶的肿瘤治疗 | 第12-15页 |
| 1.2.1.1 酪氨酸激酶抑制剂 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 单克隆抗体 | 第14-15页 |
| 1.2.2 以细胞存活因子为靶的肿瘤治疗 | 第15-16页 |
| 1.2.2.1 端粒酶抑制剂 | 第15页 |
| 1.2.2.2 细胞凋亡诱导剂 | 第15-16页 |
| 1.2.3 以侵袭转移分子为靶的肿瘤治疗 | 第16-17页 |
| 1.2.3.1 蛋白水解酶抑制剂 | 第16页 |
| 1.2.3.2 黏附分子抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.2.3.3 血管生成抑制剂 | 第17页 |
| 1.2.4 以多药耐受分子为靶的肿瘤治疗 | 第17-18页 |
| 1.2.4.1 药泵抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.2.4.2 特异性酶抑制剂 | 第18页 |
| 1.3 配体-受体系统介导的主动靶向肿瘤治疗 | 第18-23页 |
| 1.3.1 低密度脂蛋白(LDL)受体 | 第18-20页 |
| 1.3.2 转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR) | 第20-21页 |
| 1.3.3 激素受体 | 第21页 |
| 1.3.3.1 生长激素释放抑制激素受体(SSTR) | 第21页 |
| 1.3.3.2 生长激素释放激素(GHRH)受体 | 第21页 |
| 1.3.4 凝集素受体 | 第21-23页 |
| 1.3.4.1 去唾液酸糖蛋白受体 | 第22页 |
| 1.3.4.2 甘露糖受体 | 第22-23页 |
| 1.3.5 多靶向型受体 | 第23页 |
| 1.4 展望 | 第23页 |
| 1.5 课题的提出 | 第23-25页 |
| 参考文献 | 第25-29页 |
| 第二章 9B9单抗包裹基因转染载体材料的制备及理化性质研究 | 第29-61页 |
| 2.1 引言 | 第29-32页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第32-34页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.2 实验细胞 | 第33页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 实验方法与步骤 | 第34-41页 |
| 2.3.1 载体材料的合成 | 第34-35页 |
| 2.3.1.1 聚天冬氨酸(poly-D,L-succinimide,PSI)的合成 | 第34-35页 |
| 2.3.1.2 聚羟丙基天冬酰胺(α,β-poly-(N-2-hydroxypropyl)-D,L-aspartamide,PHPA)的合成 | 第35页 |
| 2.3.1.3 聚羟丙基天冬酰胺-聚乙烯亚胺(PHPA-PEI)的合成 | 第35页 |
| 2.3.2 载体材料的化学表征 | 第35-36页 |
| 2.3.2.1 核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第35页 |
| 2.3.2.2 素分析(C、H、N元素) | 第35-36页 |
| 2.3.2.3 凝胶色谱法(Gel Permeation Chromatography,GPC) | 第36页 |
| 2.3.3 载体材料的生物物理学表征 | 第36-38页 |
| 2.3.3.1 复合物的制备(Preparation of polyplexes) | 第36页 |
| 2.3.3.2 凝胶电泳阻滞实验(Gel retardation assay) | 第36-37页 |
| 2.3.3.3 肝素钠置换DNA(Release pDNA by heparin) | 第37页 |
| 2.3.3.4 复合物粒径和表面电荷测定(Particle size and zeta potential analysis) | 第37页 |
| 2.3.3.5 复合物的稳定性考察(The stability assay of polyplexes) | 第37-38页 |
| 2.3.4 载体材料的细胞生物学实验 | 第38-41页 |
| 2.3.4.1 细胞毒性测定(MTT cytotoxicity assay) | 第38页 |
| 2.3.4.2 荧光标记物的合成(Synthesis of fluorescent markers) | 第38-39页 |
| 2.3.4.3 细胞摄取实验(Cellular uptake investigation) | 第39页 |
| 2.3.4.4 细胞摄取抑制实验(Inhibition of endocytosis assay) | 第39-40页 |
| 2.3.4.5 体外转染实验(In vitro transfection efficiency assay) | 第40-41页 |
| 2.3.4.6 9B9单抗竞争抑制实验(9B9 mAb competition assay) | 第41页 |
| 2.3.4.7 数据统计学分析(Statistical Analysis) | 第41页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第41-58页 |
| 2.4.1 PHPA-PEI聚合物的合成 | 第41-42页 |
| 2.4.2 聚合物的表征 | 第42-45页 |
| 2.4.2.1 核磁共振氢谱 | 第42-44页 |
| 2.4.2.2 元素分析结果 | 第44页 |
| 2.4.2.3 PHPA分子量的测定 | 第44-45页 |
| 2.4.3 聚合物的生物学分析 | 第45-50页 |
| 2.4.3.1 DNA凝胶阻滞实验 | 第45页 |
| 2.4.3.2 肝素钠置换 | 第45-46页 |
| 2.4.3.3 粒径和表面电荷测定 | 第46-49页 |
| 2.4.3.4 复合物的稳定性考察 | 第49-50页 |
| 2.4.4 细胞毒性实验 | 第50-51页 |
| 2.4.5 细胞摄取实验 | 第51-53页 |
| 2.4.6 细胞摄取抑制实验 | 第53-55页 |
| 2.4.7 体外转染实验 | 第55-57页 |
| 2.4.8 竞争抑制实验 | 第57-58页 |
| 2.5 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第三章 PP9mN作为基因治疗载体在小鼠体内的生物学研究 | 第61-73页 |
| 3.1 引言 | 第61-62页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第62-63页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第62-63页 |
| 3.2.2 细胞与动物 | 第63页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第63页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第63-65页 |
| 3.3.1 PP9mN在ICR小鼠体内的生化指标的检测 | 第63页 |
| 3.3.2 PP9mN在荷瘤裸鼠瘤内转染实验 | 第63-64页 |
| 3.3.3 PP9mN在荷瘤裸鼠体内的组织分布 | 第64页 |
| 3.3.4 PP9mN携带AChE质粒对荷瘤裸鼠的基因治疗 | 第64-65页 |
| 3.3.5 Western blot检测肿瘤蛋白表达水平 | 第65页 |
| 3.3.6 数据统计学分析 | 第65页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第65-70页 |
| 3.4.1 PP9mN在ICR小鼠体内的生化指标的检测 | 第65-66页 |
| 3.4.2 PP9mN在荷瘤裸鼠瘤内转染实验 | 第66-67页 |
| 3.4.3 PP9mN在荷瘤裸鼠体内的组织分布 | 第67-68页 |
| 3.4.4 PP9mN携带AChE质粒对荷瘤裸鼠的基因治疗 | 第68-70页 |
| 3.4.5 Western blot检测肿瘤蛋白表达水平 | 第70页 |
| 3.5 小结 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| 全文总结与展望 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
