中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
一 高分子麦谷蛋白与小麦品质关系的研究进展 | 第11-18页 |
1. 高分子量麦谷蛋白及其编码基因 | 第11-12页 |
2. 高分子量麦谷蛋白(HMW-GS)对小麦品质的遗传效应 | 第12-14页 |
·高分子量麦谷蛋白与面筋弹性的关系 | 第12页 |
·HMW-GS编码位点对品质性状的效应 | 第12页 |
·HMW-GS及亚基组合对品质性状的效应 | 第12-14页 |
3. HMW-GS的分离鉴定 | 第14-15页 |
·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第14-15页 |
·高效液相色谱(HPLC) | 第15页 |
·高效毛细管电泳(HPCE) | 第15页 |
·生物质谱分析技术 | 第15页 |
4. HMW-GS基因的分子标记研究 | 第15-18页 |
二 小麦穗发芽研究进展 | 第18-24页 |
1. 小麦穗发芽及其危害 | 第18页 |
2. 影响穗发芽的主要因素 | 第18页 |
3. 穗发芽的分子机理 | 第18-21页 |
·穗发芽QTLs研究 | 第18-19页 |
·种子休眠与穗发芽 | 第19-21页 |
·ABA与种子休眠 | 第19-21页 |
·Vp-1基因与种子休眠 | 第21页 |
4. 抗穗发芽基因工程途径 | 第21-24页 |
·Vp-1基因工程途径 | 第22页 |
·Trxs基因工程途径 | 第22-24页 |
三 研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 小麦优质谷蛋白亚基分子标记多重PCR体系的建立 | 第26-33页 |
引言 | 第26页 |
一. 材料与方法 | 第26-30页 |
1. 实验材料 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26-27页 |
·主要试剂和仪器 | 第27页 |
2 实验方法 | 第27-30页 |
·CTAB法提取小麦植物DNA | 第27-28页 |
·试剂配制 | 第27页 |
·操作步骤 | 第27-28页 |
·PCR引物序列及扩增条件 | 第28-29页 |
·PCR引物序列 | 第28页 |
·PCR扩增反应体系 | 第28-29页 |
·PCR反应和电泳条件 | 第29页 |
·西藏小麦高分子谷蛋白优质亚基的检测 | 第29-30页 |
二. 结果与分析 | 第30-32页 |
1. 单一PCR扩增体系 | 第30页 |
2. AxNull、Bx7~(OE)和Dx5多重PCR体系的建立 | 第30-31页 |
3. 西藏小麦HMW-GS组成的多重PCR鉴定 | 第31-32页 |
三. 小结与讨论 | 第32-33页 |
第三章 大麦HvABA8’OH-1基因RNAi载体的遗传转化 | 第33-41页 |
引言 | 第33页 |
一. 材料与方法 | 第33-38页 |
1. 实验材料 | 第33-34页 |
·受体材料及菌株 | 第33页 |
·实验试剂及主要仪器 | 第33-34页 |
·实验试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
2. 试验方法 | 第34-38页 |
·试剂配制 | 第34页 |
·大肠杆菌质粒的提取 | 第34-35页 |
·农杆菌(AGL1)感受态细胞的制备(电激法)和转化 | 第35-36页 |
·农杆菌感受态细胞制备操作步骤 | 第35页 |
·农杆菌的转化(电激法) | 第35-36页 |
·阳性农杆菌菌株的鉴定 | 第36页 |
·农杆菌对水稻愈伤的转化 | 第36-37页 |
·培养基的配制(附录2) | 第36页 |
·水稻愈伤的转化 | 第36-37页 |
·转基因水稻阳性植株的鉴定 | 第37-38页 |
·转基因水稻T0代种子萌发实验 | 第38页 |
二. 结果与分析 | 第38-40页 |
1. 大麦HvABA8’OH-1基因RNAi载体对根瘤农杆菌的转化鉴定 | 第38页 |
2. 水稻转基因组织及植株的获得 | 第38-39页 |
3. 转基因植株鉴定 | 第39页 |
4. 种子萌发实验统计 | 第39-40页 |
三 讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-51页 |
附录1 转基因所用载体pOHS/C示意图 | 第51-52页 |
附录2:主要培养基配制方法 | 第52-54页 |
1. NB培养基配方 | 第52-53页 |
2. AMM培养基配方 | 第53-54页 |
附录3:转基因水稻植株图片 | 第54-55页 |
附录4:缩略词表 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第57页 |