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小麦重要优质亚基分子标记的多重PCR体系建立及ABA8-羟化酶基因的RNAi调控研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-10页
第一章 文献综述第10-26页
 一 高分子麦谷蛋白与小麦品质关系的研究进展第11-18页
  1. 高分子量麦谷蛋白及其编码基因第11-12页
  2. 高分子量麦谷蛋白(HMW-GS)对小麦品质的遗传效应第12-14页
   ·高分子量麦谷蛋白与面筋弹性的关系第12页
   ·HMW-GS编码位点对品质性状的效应第12页
   ·HMW-GS及亚基组合对品质性状的效应第12-14页
  3. HMW-GS的分离鉴定第14-15页
   ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第14-15页
   ·高效液相色谱(HPLC)第15页
   ·高效毛细管电泳(HPCE)第15页
   ·生物质谱分析技术第15页
  4. HMW-GS基因的分子标记研究第15-18页
 二 小麦穗发芽研究进展第18-24页
  1. 小麦穗发芽及其危害第18页
  2. 影响穗发芽的主要因素第18页
  3. 穗发芽的分子机理第18-21页
   ·穗发芽QTLs研究第18-19页
   ·种子休眠与穗发芽第19-21页
     ·ABA与种子休眠第19-21页
     ·Vp-1基因与种子休眠第21页
  4. 抗穗发芽基因工程途径第21-24页
   ·Vp-1基因工程途径第22页
   ·Trxs基因工程途径第22-24页
 三 研究的目的和意义第24-26页
第二章 小麦优质谷蛋白亚基分子标记多重PCR体系的建立第26-33页
 引言第26页
 一. 材料与方法第26-30页
  1. 实验材料第26-27页
   ·植物材料第26-27页
   ·主要试剂和仪器第27页
  2 实验方法第27-30页
   ·CTAB法提取小麦植物DNA第27-28页
     ·试剂配制第27页
     ·操作步骤第27-28页
   ·PCR引物序列及扩增条件第28-29页
     ·PCR引物序列第28页
     ·PCR扩增反应体系第28-29页
     ·PCR反应和电泳条件第29页
   ·西藏小麦高分子谷蛋白优质亚基的检测第29-30页
 二. 结果与分析第30-32页
  1. 单一PCR扩增体系第30页
  2. AxNull、Bx7~(OE)和Dx5多重PCR体系的建立第30-31页
  3. 西藏小麦HMW-GS组成的多重PCR鉴定第31-32页
 三. 小结与讨论第32-33页
第三章 大麦HvABA8’OH-1基因RNAi载体的遗传转化第33-41页
 引言第33页
 一. 材料与方法第33-38页
  1. 实验材料第33-34页
   ·受体材料及菌株第33页
   ·实验试剂及主要仪器第33-34页
     ·实验试剂第33页
     ·主要仪器第33-34页
  2. 试验方法第34-38页
   ·试剂配制第34页
   ·大肠杆菌质粒的提取第34-35页
   ·农杆菌(AGL1)感受态细胞的制备(电激法)和转化第35-36页
     ·农杆菌感受态细胞制备操作步骤第35页
     ·农杆菌的转化(电激法)第35-36页
   ·阳性农杆菌菌株的鉴定第36页
   ·农杆菌对水稻愈伤的转化第36-37页
     ·培养基的配制(附录2)第36页
     ·水稻愈伤的转化第36-37页
   ·转基因水稻阳性植株的鉴定第37-38页
   ·转基因水稻T0代种子萌发实验第38页
 二. 结果与分析第38-40页
  1. 大麦HvABA8’OH-1基因RNAi载体对根瘤农杆菌的转化鉴定第38页
  2. 水稻转基因组织及植株的获得第38-39页
  3. 转基因植株鉴定第39页
  4. 种子萌发实验统计第39-40页
 三 讨论第40-41页
参考文献第41-51页
附录1 转基因所用载体pOHS/C示意图第51-52页
附录2:主要培养基配制方法第52-54页
 1. NB培养基配方第52-53页
 2. AMM培养基配方第53-54页
附录3:转基因水稻植株图片第54-55页
附录4:缩略词表第55-56页
致谢第56-57页
攻读学位期间发表的学术论文目录第57页

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