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猪精子冷冻干燥保存技术建立及显微注射受精的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第8-12页
1 文献综述第12-26页
   ·冷冻干燥保存研究简史第12-13页
   ·冷冻干燥原理第13-14页
   ·影响冷冻干燥的因素第14-15页
   ·冷冻干燥主要应用第15页
   ·冷冻干燥保存的优点及研究意义第15-16页
   ·精子冷冻干燥保存第16-22页
     ·研究简史第16-20页
     ·冷冻干燥保护剂第20页
     ·冷冻干燥对精子形态的影响第20-21页
     ·冷冻干燥过程中遗传物质的损伤与防护第21页
     ·冷冻干燥精子的检测第21-22页
   ·猪精子冷冻干燥保存技术的研究进展第22-25页
     ·猪精子冷冻干燥的主要技术环节第22-23页
     ·猪精子冷冻干燥保存机理第23-24页
     ·猪冷冻干燥精子的研究现状第24-25页
   ·冷冻干燥猪精子研究的意义第25-26页
2 材料与方法第26-36页
   ·试验材料第26-28页
     ·试剂第26-27页
     ·仪器第27-28页
     ·耗材第28页
   ·试验方法第28-34页
     ·猪精子冷冻干燥第28-29页
     ·冷冻干燥猪精子再水化第29页
     ·顶体染色及分级观察第29-30页
     ·单细胞凝胶电泳实验第30-31页
     ·冻干猪精子超微结构观察第31-32页
     ·卵母细胞收集、体外成熟及成熟培养后COCs上卵丘细胞的去除第32-33页
     ·单精子显微注射第33页
     ·单精子注射后卵母细胞激活第33-34页
     ·雄原核染色观察第34页
   ·试验设计第34-35页
     ·建立猪精子冷冻干燥技术及冻干猪精子形态及超微结构观察第35页
     ·单精子注射第35页
   ·数据分析第35-36页
3 结果与分析第36-47页
   ·优化猪精子冷冻干燥步骤以及冻干后猪精子形态学观察第36-41页
     ·液氮处理对冷冻干燥猪精子形态的影响第36页
     ·保存温度对冷冻干燥猪精子形态的影响第36-37页
     ·保存时间对冷冻干燥猪精子形态的影响第37页
     ·水化后孵育时间对冷冻干燥猪精子形态的影响第37-38页
     ·猪冻干精子超微结构的观察第38-41页
   ·冷冻干燥对猪精子DNA损伤第41-42页
   ·冷冻干燥猪精子的单精注射第42-47页
     ·添加不同保护剂的冻干精子对ICSI后胚胎发育的影响第42-43页
     ·冷冻干燥猪精子的保存时间对胚胎发育的影响第43页
     ·冷冻干燥猪精子水化后孵育时间对培养发育的影响第43-44页
     ·电激活对单精受精卵的激活效果第44-45页
     ·电激活与化学激活对单精受精卵联合激活的效果第45页
     ·不同时间间隔的激活处理对ICSI后胚胎发育的影响第45-47页
4 讨论第47-54页
   ·冷冻干燥前液氮处理猪精子对冻干精子的影响第47页
   ·冷冻干燥过程对猪精子的结构的影响第47-49页
   ·冷冻干燥对猪精子DNA完整性的影响第49页
   ·不同保护剂在冷冻干燥过程中对猪精子的保护效果第49-51页
   ·冻干猪精子保存时间及水化后孵育时间对受精效果的影响第51-52页
   ·激活对ICSI受精卵发育的影响第52-54页
     ·激活方式对ICSI受精卵发育的影响第52-53页
     ·单精子注射后间隔时间对ICSI受精卵发育第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表的学术论文题目第62页

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