| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 英文缩略词表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 第一章 玉竹化感作用验证 | 第20-27页 |
| 1 试验材料 | 第20页 |
| 1.1 材料 | 第20页 |
| 1.2 仪器 | 第20页 |
| 2 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.1 玉竹根茎水浸液的制备 | 第20-21页 |
| 2.2 玉竹根际土壤水浸提液的制备 | 第21页 |
| 2.3 带药培养基的配制 | 第21页 |
| 2.4 种子生物测定 | 第21页 |
| 2.5 菌丝生长的测定 | 第21-22页 |
| 2.6 自毒作用的测定 | 第22页 |
| 2.7 评价指标 | 第22页 |
| 2.7.1 发芽率 | 第22页 |
| 2.7.2 发芽指数 | 第22页 |
| 2.7.3 菌丝生长速率 | 第22页 |
| 2.7.4 化感指数 | 第22页 |
| 2.8 数据分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-27页 |
| 3.1 玉竹根茎水浸提液对种子萌发的影响 | 第23-24页 |
| 3.2 玉竹根茎水浸提液对玉竹根腐病菌菌丝生长的影响 | 第24-25页 |
| 3.3 玉竹根际土壤水浸提液对玉竹幼苗生长的影响 | 第25-27页 |
| 第二章 玉竹化感物质对光合作用、抗氧化酶活性的影响 | 第27-39页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1 材料 | 第27页 |
| 1.2 仪器 | 第27页 |
| 1.3 试剂 | 第27-28页 |
| 1.4 方法 | 第28-30页 |
| 1.4.1 土壤样品采集及处理 | 第28页 |
| 1.4.2 根际土壤乙酸乙酯浸提液的制备 | 第28页 |
| 1.4.3 根际土壤乙酸乙酯浸提液中化感物质测定 | 第28页 |
| 1.4.4 玉竹幼苗盆栽实验设计 | 第28-29页 |
| 1.4.5 玉竹幼苗生理指标测定 | 第29-30页 |
| 1.4.6 统计学分析 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-39页 |
| 2.1 玉竹根际土壤中化合物的GC-MS鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2 代表性化感物质溶液的配制 | 第32-33页 |
| 2.3 不同化感物质胁迫对玉竹叶片叶绿素的含量的影响 | 第33-36页 |
| 2.4 不同化感物质胁迫对玉竹叶片SOD,POD,CAT酶的影响 | 第36-39页 |
| 第三章 不同化感条件对玉竹产量及其多糖的影响 | 第39-46页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 1.1 材料 | 第39页 |
| 1.2 仪器 | 第39页 |
| 1.3 试剂 | 第39页 |
| 1.4 方法 | 第39-41页 |
| 1.4.1 玉竹的产量测定 | 第39页 |
| 1.4.2 玉竹粗多糖溶液的提取 | 第39页 |
| 1.4.3 玉竹粗多糖提纯精制 | 第39-41页 |
| 1.4.4 标准曲线的绘制 | 第41页 |
| 1.4.5 玉竹粗多糖的含量测定 | 第41页 |
| 1.5 数据统计 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-46页 |
| 2.1 玉竹的产量测定 | 第41-43页 |
| 2.2 玉竹多糖及其多糖组分的含量测定 | 第43-46页 |
| 第四章 不同来源玉竹多糖体外抗肿瘤活性及其机制研究 | 第46-61页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1 玉竹多糖提取 | 第46页 |
| 1.2 细胞株 | 第46页 |
| 1.3 实验试剂 | 第46-47页 |
| 1.4 实验仪器 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-52页 |
| 2.1 细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.2 药物配制 | 第48页 |
| 2.3 MTT比色法测定细胞活性 | 第48页 |
| 2.4 AO/EB荧光染色观察细胞凋亡形态 | 第48-49页 |
| 2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第49页 |
| 2.6 Real Time PCR法测定凋亡基因Survivin、C-myc及Wnt/β-catenin信号的表达水平 | 第49-52页 |
| 2.6.1 引物设计与合成 | 第49-50页 |
| 2.6.2 提取细胞总RNA | 第50-51页 |
| 2.6.3 cDNA第一条链的合成 | 第51页 |
| 2.6.4 Real-time PCR扩增 | 第51页 |
| 2.6.5 结果分析方法 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-61页 |
| 3.1 人肺癌A549细胞形态学 | 第52页 |
| 3.2 玉竹多糖对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的影响 | 第52-53页 |
| 3.3 玉竹多糖对人肺癌细胞A549细胞周期的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 玉竹多糖对A549细胞凋亡率的影响 | 第54-55页 |
| 3.5 玉竹多糖对A549细胞Wnt/β-catenin信号表达水平的影响 | 第55-61页 |
| 3.5.1 不同来源玉竹多糖对A549细胞Survivin mRNA表达的影响 | 第55-56页 |
| 3.5.2 不同来源玉竹多糖对A549细胞C-Myc mRNA表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.5.3 不同来源玉竹多糖对A549细胞Wnt3a mRNA表达的影响 | 第57-58页 |
| 3.5.4 不同来源玉竹多糖对A549细胞β-catenin mRNA表达的影响 | 第58-59页 |
| 3.5.5 不同来源玉竹多糖对A549细胞CyclinD1 mRNA表达的影响 | 第59-61页 |
| 第五章 玉竹多糖对荷瘤小鼠的影响及其机制研究 | 第61-77页 |
| 1 实验材料 | 第61-62页 |
| 1.1 实验动物及细胞 | 第61页 |
| 1.2 受试药物 | 第61页 |
| 1.3 实验试剂和耗材 | 第61页 |
| 1.4 主要仪器 | 第61-62页 |
| 2 实验方法 | 第62-66页 |
| 2.1 体外细胞培养 | 第62页 |
| 2.2 荷瘤小鼠模型的建立 | 第62-63页 |
| 2.3 分组与给药 | 第63页 |
| 2.4 荷瘤小鼠瘤体积及瘤重测定 | 第63页 |
| 2.5 组织HE染色 | 第63-64页 |
| 2.6 瘤组织Tunel凋亡染色 | 第64页 |
| 2.7 Real Time PCR法测定凋亡和周期相关基因mRNA水平的变化 | 第64页 |
| 2.8 Western blot法测定Wnt/β-catenin信号通路相关分子蛋白水平的变化 | 第64-66页 |
| 2.9 统计分析 | 第66页 |
| 3 结果 | 第66-77页 |
| 3.1 不同来源玉竹多糖对裸鼠移植瘤的抑制作用 | 第66-67页 |
| 3.2 瘤组织病理形态 | 第67-68页 |
| 3.3 不同来源玉竹多糖对瘤组织细胞凋亡的影响 | 第68-69页 |
| 3.4 Real Time PCR法测定凋亡和周期相关基因mRNA水平的变化 | 第69-74页 |
| 3.5 Western blot法测定Wnt/β-catenin信号相关分子蛋白水平的变化 | 第74-77页 |
| 第六章 讨论 | 第77-85页 |
| 1. 中药种植的连作障碍 | 第77页 |
| 1.1 中药的连作现象 | 第77页 |
| 1.2 连作障碍发生的机理 | 第77页 |
| 2. 化感作用与连作障碍 | 第77-79页 |
| 2.1 化感自毒作用导致连作障碍 | 第77-78页 |
| 2.2 化感物质与化感自毒 | 第78-79页 |
| 2.3 常见化感物质的分析 | 第79页 |
| 3. 化感自毒作用对药材品质的影响 | 第79-81页 |
| 3.1 对幼苗生长的影响 | 第79-80页 |
| 3.2 化感物质对叶片叶绿素的影响 | 第80页 |
| 3.3 化感物质对叶片SOD,POD,CAT酶的影响 | 第80-81页 |
| 3.4 化感物质对药材产量及品质的影响 | 第81页 |
| 4. 玉竹的有效成分及其抗肿瘤作用 | 第81-85页 |
| 4.1 玉竹的主要有效成分 | 第81-82页 |
| 4.2 玉竹多糖的抗肿瘤作用 | 第82页 |
| 4.3 玉竹多糖的抗肿瘤作用机理 | 第82-85页 |
| 4.3.1 凋亡与肿瘤的发生及治疗 | 第82-83页 |
| 4.3.2 C-Myc、Survivin与凋亡 | 第83-85页 |
| 结论与创新点 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-93页 |
| 附录 | 第93页 |
| 附录一 文献综述 | 第93-104页 |
| 参考文献 | 第100-104页 |
| 附录二 在读期间发表的论文 | 第104页 |
