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北京城区大气PM2.5组分分析及生物毒理研究

缩略词表第7-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
前言第17-19页
第一部分:北京城区大气PM_(2.5)及其组分化学、生物成分分析第19-30页
    1 实验材料第19页
        1.1 主要试剂及耗材第19页
        1.2 主要仪器第19页
    2 实验方法第19-30页
        2.1 大气颗粒物PM_(2.5)的采集第19-20页
        2.2 PM_(2.5)及其不同组分样品的制备第20页
        2.3 各组分样品化学成分分析第20-21页
            2.3.1 水溶性离子分析第20页
            2.3.2 元素分析第20-21页
            2.3.3 PAH分析第21页
        2.4 各组分样品生物成分分析第21-23页
            2.4.1 各组分样品内毒素含量分析第21-22页
            2.4.2 各组分样品细菌、真菌基因组定量第22页
                2.4.2.1 DNA基因组提取第22页
                2.4.2.2 合成细菌、真菌通用引物及制备标准品第22页
            2.4.3 荧光定量PCR法测定基因组含量第22-23页
        3 实验结果第23-27页
            3.1 PM_(2.5)各组分中水溶性离子特征第23页
            3.2 元素第23-25页
                3.2.1 PM_(2.5)各组分样本“酸提”元素分析结果第23-24页
                3.2.2 PM_(2.5)各组分样本“水提”元素分析结果第24-25页
            3.3 PM_(2.5)各组分样本PAH分析结果第25-26页
            3.4 PM_(2.5)各组分样本内毒素含量分析结果第26页
            3.5 PM_(2.5)各组分样本细菌、真菌基因组定量分析结果第26-27页
        4 讨论第27-29页
        5 小结第29-30页
第二部分:北京城区大气PM_(2.5)及其组分对人肺上皮A549细胞毒理研究第30-50页
    1 实验材料第30-31页
        1.1 细胞系第30页
        1.2 主要试剂及耗材第30页
        1.3 主要仪器第30-31页
    2 实验方法第31-33页
        2.1 PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)单纯颗粒物扫描电子显微镜(SEM)观察第31页
        2.2 细胞培养第31页
        2.3 各样本染毒母液及染毒用培养基的制备与剂量分组第31页
        2.4 细胞毒性试验第31页
        2.5 氧化损伤相关指标的测定第31-32页
            2.5.1 LD含量的测定第32页
            2.5.2 LDH活力的测定第32页
            2.5.3 SOD活力的测定第32页
        2.6 炎性损伤指标的测定第32-33页
            2.6.1 细胞培养上清炎性因子IL-6、TNF-α 的分泌量检测第32页
            2.6.2 炎性因子IL-6、TNF-α 的m RNA表达量检测第32-33页
        2.7 染毒后细胞DNA损伤测定第33页
    3 统计与分析第33页
    4 实验结果第33-45页
        4.1 标准粒子及PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)单纯颗粒物表征第33-34页
        4.2 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞活力的影响第34-35页
        4.3 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞LD含量的影响第35-37页
        4.4 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞LDH活力的影响第37-39页
        4.5 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞SOD活力的影响第39-41页
        4.6 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞炎性因子IL-6 和TNF-α 分泌量的影响第41-42页
            4.6.1 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞IL-6 含量的影响第41-42页
            4.6.2 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞TNF-α 分泌量的影响第42页
        4.7 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞染毒后炎性因子IL-6 和TNF-α m RNA的相对表达量第42-44页
            4.7.1 PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞染毒后IL-6 m RNA相对表达量第42-43页
            4.7.2 PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞染毒后TNF-α m RNA相对表达量第43-44页
        4.8 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对A549细胞DNA损伤的影响第44-45页
    5 讨论第45-49页
    6 小结第49-50页
第三部分:北京城区大气PM_(2.5)及其组分对大鼠心肌H9C2细胞毒理研究第50-61页
    1 实验材料第50页
        1.1 细胞系第50页
        1.2 主要试剂及耗材第50页
        1.3 主要仪器第50页
    2 实验方法第50-51页
        2.1 细胞培养第50页
        2.2 各样本染毒母液及染毒用培养基的制备与剂量分组第50页
        2.3 细胞毒性试验第50页
        2.4 氧化损伤相关指标的测定(LD含量、LDH和SOD活力)第50页
        2.5 炎性损伤指标的测定第50-51页
            2.5.1 细胞培养上清炎性因子IL-6、TNF-α 的分泌量检测第50-51页
            2.5.2 炎性因子IL-6、TNF-α 的m RNA表达量检测第51页
        2.6 染毒后细胞DNA损伤测定第51页
    3 统计与分析第51页
    4 实验结果第51-58页
        4.1 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞活力的影响第51-52页
        4.2 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞LD含量的影响第52-53页
        4.3 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞LDH活力的影响第53-55页
        4.4 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞SOD活力的影响第55-56页
        4.5 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞炎性因子IL-6 和TNF-α 分泌量和表达量的影响第56-57页
            4.5.1 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞炎性因子IL-6 和TNF-α 分泌量的影响第56页
            4.5.2 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞染毒后炎性因子IL-6 和TNF-αm RNA的相对表达量的影响第56-57页
        4.6 不同浓度PM_(2.5)各染毒样本对H9C2细胞DNA损伤的影响第57-58页
    5 讨论第58-60页
    6 小结第60-61页
第四部分:PM_(2.5)颗粒物成分对小鼠气溶胶攻毒的急性毒性作用研究第61-79页
    1 实验材料第61-62页
        1.1 动物品系第61页
        1.2 主要试剂及耗材第61页
        1.3 主要仪器第61-62页
    2 实验方法第62-64页
        2.1 实验动物饲养、分组及染毒方法第62页
        2.2 实验动物取血及血清制备、分装第62页
        2.3 实验动物肺灌洗及肺灌洗液分装第62页
        2.4 血常规和血生化指标测定第62-63页
        2.5 组织病理学检测第63页
        2.6 炎性因子检测第63页
            2.6.1 多炎性因子检测第63页
            2.6.2 炎性因子IL-8 检测第63页
            2.6.3 CRP含量测定第63页
        2.7 氧化损伤相关指标测定第63-64页
            2.7.1 肺组织匀浆SOD活力测定第63页
            2.7.2 肺组织匀浆MDA含量测定第63-64页
    3 统计分析第64页
    4 实验结果第64-75页
        4.1 血常规和血生化指标测定第64-66页
            4.1.1 实验动物全血血常规测定第64-65页
            4.1.2 实验动物血清血生化指标测定第65-66页
            4.1.3 实验动物肺灌洗液生化指标测定第66页
        4.2 组织病理学检测第66-68页
        4.3 血清炎性因子测定第68-69页
        4.4 肺灌洗液炎性因子测定第69-72页
        4.5 肺组织匀浆炎性因子测定第72-74页
        4.6 肺组织匀浆氧化损伤指标测定第74-75页
    5 讨论第75-78页
    6 小结第78-79页
结论第79-80页
参考文献第80-86页
个人简历第86-87页
致谢第87页

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