| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 基因组学 | 第12-15页 |
| 1.1.1 基因组学研究 | 第12-13页 |
| 1.1.2 基因组学的热点研究 | 第13页 |
| 1.1.3 基因组学的研究意义 | 第13-14页 |
| 1.1.4 测序技术 | 第14-15页 |
| 1.2 细菌溶血素 | 第15-18页 |
| 1.2.1 溶血素的命名 | 第15页 |
| 1.2.2 几种代表性溶血素 | 第15-17页 |
| 1.2.3 溶血素的作用 | 第17-18页 |
| 1.3 蜡状芽孢杆菌研究简介 | 第18-20页 |
| 1.3.1 蜡状芽孢杆菌的生物学特性 | 第18-19页 |
| 1.3.2 蜡状芽孢杆菌的致病机理 | 第19-20页 |
| 1.4 技术路线 | 第20页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第20-22页 |
| 2 菌株分离、形态学分析及溶血活性验证 | 第22-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 患病大菱鲆 | 第22页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 蜡状芽孢杆菌WH2015菌株分离 | 第22页 |
| 2.2.2 蜡状芽孢杆菌WH2015革兰氏染色 | 第22页 |
| 2.2.3 蜡状芽孢杆菌WH2015扫描电镜分析 | 第22-23页 |
| 2.2.4 蜡状芽孢杆菌WH2015溶血活性验证 | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第24-25页 |
| 2.3.1 蜡状芽孢杆菌WH2015的形态 | 第24页 |
| 2.3.2 蜡状芽孢杆菌WH2015的溶血活性 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-26页 |
| 3 蜡状芽孢杆菌WH2015系统发育学分析 | 第26-32页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第26页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 蜡状芽孢杆菌WH2015 DNA模板制备 | 第27页 |
| 3.2.2 蜡状芽孢杆菌WH201516S r DNA扩增测序 | 第27-29页 |
| 3.2.3 蜡状芽孢杆菌WH2015系统发育树的构建 | 第29页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第29-31页 |
| 3.3.1 蜡状芽孢杆菌WH201516S r DNA扩增 | 第29-30页 |
| 3.3.2 阳性克隆筛选 | 第30页 |
| 3.3.3 蜡状芽孢杆菌WH2015系统发育树的构建 | 第30-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-32页 |
| 4 蜡状芽孢杆菌WH2015全基因组测序及功能注释 | 第32-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第32页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第32页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 4.2.1 蜡状芽孢杆菌WH2015总DNA提取 | 第32-33页 |
| 4.2.2 蜡状芽孢杆菌WH2015基因组测序、基因组拼接组装 | 第33页 |
| 4.2.3 蜡状芽孢杆菌WH2015基因组注释 | 第33页 |
| 4.2.4 毒力因子的鉴定及其与不同芽孢杆菌种间的对比分析 | 第33-34页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第34-42页 |
| 4.3.1 蜡状芽孢杆菌WH2015基因组测序 | 第34-35页 |
| 4.3.2 基因组的基本特性 | 第35页 |
| 4.3.3 毒力因子的鉴定及其与不同芽孢杆菌种间的对比分析 | 第35-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 蜡状芽孢杆菌WH2015 HBL、hly III基因的扩增、原核表达重组质粒的构 | 第43-53页 |
| 5.1 实验材料 | 第43页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第43页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第43页 |
| 5.1.3 质粒和受体菌 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 5.2.1 XL-Blue I感受态细胞制备 | 第43页 |
| 5.2.2 蜡状芽孢杆菌WH2015 HBL、hly III基因的扩增 | 第43-45页 |
| 5.2.3 p ET-28a（+）原核表达重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第47-53页 |
| 5.3.1 HBL、hly III基因扩增 | 第47-49页 |
| 5.3.2 原核表达重组质粒的构建 | 第49-53页 |
| 6 原核表达分析 | 第53-58页 |
| 6.1 实验材料 | 第53页 |
| 6.1.1 实验仪器 | 第53页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第53页 |
| 6.1.3 质粒和受体菌 | 第53页 |
| 6.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 6.2.1 BL21感受态细胞制备 | 第53-54页 |
| 6.2.2 BL21（DE3）p Lys S感受态细胞制备 | 第54页 |
| 6.2.3 原核表达 | 第54-55页 |
| 6.3 结果与分析 | 第55-56页 |
| 6.3.1 目的蛋白表达验证 | 第55-56页 |
| 6.3.2 目的蛋白活性验证 | 第56页 |
| 6.4 讨论 | 第56-58页 |
| 7 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68页 |
