| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 干旱胁迫对植物生理的影响 | 第10-12页 |
| 1.2 植物响应干旱胁迫的生理及分子机制 | 第12-15页 |
| 1.2.1 植物响应干旱胁迫的生理机制 | 第12-14页 |
| 1.2.2 植物响应干旱胁迫的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.3 植物液泡膜H~+-PPase基因研究进展 | 第15-22页 |
| 1.3.1 H~+-PPase在生物体中的分布及类型 | 第16页 |
| 1.3.2 H~+-PPase的结构特点 | 第16-17页 |
| 1.3.3 H~+-PPase基因的功能 | 第17-19页 |
| 1.3.4 H~+-PPase在逆境胁迫响应中的作用 | 第19-22页 |
| 1.4 实验材料 | 第22页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 獐茅AlVP1基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 獐茅总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 獐茅AlVP1基因部分编码区的克隆 | 第25-29页 |
| 2.2.3 3'RACE法克隆獐茅AlVP1基因3'端cDNA序列 | 第29-33页 |
| 2.2.4 锚定PCR法克隆獐茅AlVP1基因5'端cDNA序列 | 第33-37页 |
| 2.2.5 AlVP1基因ORF的获得 | 第37-38页 |
| 2.2.6 AlVP1基因编码区的生物信息学分析 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-48页 |
| 2.3.1 AlVP1基因部分编码区的克隆 | 第38-41页 |
| 2.3.2 AlVP1基因3'端和5'端部分编码区的克隆 | 第41-43页 |
| 2.3.3 獐茅AlVP1基因编码区的获得 | 第43页 |
| 2.3.4 獐茅AlVP1基因生物信息学分析 | 第43-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-49页 |
| 2.5 小结 | 第49-51页 |
| 3 獐茅中AlVP1基因表达模式分析 | 第51-59页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第51-52页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第51页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 3.2.1 qPCR引物的设计 | 第52页 |
| 3.2.2 獐茅总RNA的提取及cDNA的获得 | 第52-53页 |
| 3.2.3 实时定量荧光PCR反应 | 第53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 3.3.1 不同胁迫条件下AlVP1基因在根中的表达分析 | 第54-55页 |
| 3.3.2 不同胁迫条件下AlVP1基因在叶中的表达分析 | 第55-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 4 AlVP1基因植物表达载体的构建、烟草转化及功能分析 | 第59-84页 |
| 4.1 实验材料及仪器设备 | 第59-60页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第59页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第59页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-72页 |
| 4.2.1 AlVP1基因植物表达载体的构建 | 第60-63页 |
| 4.2.2 重组质粒转化农杆菌EHA101 | 第63-65页 |
| 4.2.3 烟草的转化 | 第65-66页 |
| 4.2.4 转基因烟草的分子检测 | 第66-69页 |
| 4.2.5 转基因烟草耐旱生理检测 | 第69-72页 |
| 4.3 结果与分析 | 第72-82页 |
| 4.3.1 AlVP1基因植物表达载体的构建 | 第72-73页 |
| 4.3.2 重组质粒转化农杆菌EHA101 | 第73-74页 |
| 4.3.3 烟草的转化 | 第74-75页 |
| 4.3.4 转基因烟草的分子检测 | 第75-77页 |
| 4.3.5 转基因烟草耐旱生理检测 | 第77-82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-83页 |
| 4.5 小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 附录A 缩略语 | 第92-93页 |
| 附录B 论文中所用的DNA Marker | 第93-94页 |
| 附录C 论文中所用的质粒图谱 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第96-97页 |
