| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-26页 |
| 1. 硒在肿瘤预防及治疗中的应用 | 第15-19页 |
| ·硒在肿瘤预防中的作用 | 第16-17页 |
| ·硒在肿瘤治疗中的作用 | 第17-18页 |
| ·硒在肿瘤治疗中的其他作用 | 第18-19页 |
| 2. 急性早幼粒白血病(APL)的治疗 | 第19-20页 |
| 3. 线粒体介导的细胞凋亡 | 第20-21页 |
| 4. RhoA/ROCK1通路的研究现状 | 第21-23页 |
| 5. Erk1/2与细胞命运决定 | 第23-24页 |
| 6. 研究目的、内容及意义 | 第24-26页 |
| ·研究目的 | 第24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| ·研究意义 | 第25-26页 |
| 材料与方法 | 第26-57页 |
| 1. 实验材料 | 第26-32页 |
| ·细胞株 | 第26页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·使用的抗体 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR引物 | 第28页 |
| ·靶基因siRNA的合成 | 第28-29页 |
| ·主要溶液的配制 | 第29-31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| 2. 实验方法 | 第32-57页 |
| ·细胞的复苏、冻存及培养 | 第32-33页 |
| ·细胞增殖活力检测(CCK8分析法) | 第33页 |
| ·Annexin Ⅴ/PI双染流式细胞术凋亡检测 | 第33-35页 |
| ·JC-1染色检测线粒体膜电势 | 第35-36页 |
| ·荧光探针DCFH-DA检测活性氧 | 第36页 |
| ·透射电镜成像观察线粒体形态 | 第36-37页 |
| ·Western Blot | 第37-40页 |
| ·免疫共沉淀 | 第40页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第40-41页 |
| ·细胞转染(RNAi及质粒转染) | 第41-42页 |
| ·细菌转化与质粒提取 | 第42-43页 |
| ·荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第43-47页 |
| ·正常人外周血单核细胞的提取 | 第47-48页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第48-50页 |
| ·TUNEL检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·病理组织化学检验(HE染色) | 第51-52页 |
| ·免疫组织化学技术(EnVision方法) | 第52-53页 |
| ·肿瘤移植小鼠白细胞的获得 | 第53页 |
| ·蛋白质交联 | 第53-54页 |
| ·RhoA活性检测 | 第54-55页 |
| ·GST Pull-down | 第55-56页 |
| ·统计分析 | 第56-57页 |
| 实验结果 | 第57-118页 |
| 1. 亚硒酸钠诱导白血病细胞凋亡 | 第57-68页 |
| ·亚硒酸钠特异性得引起白血病细胞凋亡 | 第57-59页 |
| ·亚硒酸钠引发白血病细胞内源性凋亡 | 第59-62页 |
| ·亚硒酸钠抑制白血病细胞中RhoA/ROCK1通路 | 第62-64页 |
| ·活性氧抑制RhoA/ROCK1通路 | 第64-68页 |
| ·RhoA调节因子下调 | 第68页 |
| 2. RhoA/ROCK1通路调节亚硒酸钠诱导的细胞凋亡 | 第68-76页 |
| ·抑制RhoA/ROCK1通路增强亚硒酸钠引发的凋亡 | 第69-73页 |
| ·活化RhoA/ROCK1通路抑制亚硒酸钠引发的凋亡 | 第73-76页 |
| ·ROCK1介导RhoA对细胞凋亡的调节作用 | 第76页 |
| 3. Erk1/2的早期活化在亚硒酸钠诱导凋亡过程中起重要作用 | 第76-82页 |
| ·活性氧诱导Erk1/2活性迅速上调 | 第76-77页 |
| ·早期Erk1/2活化是亚硒酸钠诱导细胞凋亡所必需的 | 第77-79页 |
| ·Erk1/2活性晚期下调对细胞凋亡的影响较小 | 第79-80页 |
| ·Erk1与Erk2均调控细胞凋亡 | 第80-81页 |
| ·亚硒酸钠促进Erk1/2核转位 | 第81-82页 |
| 4. RhoA/ROCK1调节Erk1/2活性与定位 | 第82-91页 |
| ·ROCK1介导RhoA对Erk1/2活性的负调控 | 第83-84页 |
| ·RhoA/ROCK1通路调节Erk1/2的核转位 | 第84-86页 |
| ·RhoA/ROCK1与Mek1/2共同调节Erk1/2活性与细胞凋亡 | 第86-89页 |
| ·RhoA/ROCK1通路与Mek1/2信号彼此独立 | 第89-91页 |
| 5. RhoA调节ROCK1与Erk1/2的蛋白结合 | 第91-99页 |
| ·ROCK1与Erk1/2间分子结合被亚硒酸钠抑制 | 第91-96页 |
| ·RhoA调控ROCK1与Erk1/2的分子结合 | 第96-99页 |
| 6. 促凋亡蛋白Bax在亚硒酸钠诱导的线粒体途径凋亡中发挥重要作用 | 第99-106页 |
| ·亚硒酸钠诱导Bax表达与活性上调 | 第99-101页 |
| ·Bax调控亚硒酸钠诱导的细胞凋亡 | 第101-103页 |
| ·Erk1/2通路调节Bax的表达与寡聚化 | 第103-106页 |
| 7. 亚硒酸钠诱导移植瘤细胞凋亡 | 第106-118页 |
| ·亚硒酸钠对小鼠健康影响较小 | 第107-109页 |
| ·亚硒酸钠抑制移植瘤的生长与转移 | 第109-113页 |
| ·RhoA/ROCK1/Erk/Bax途径参与移植瘤细胞凋亡 | 第113-118页 |
| 讨论 | 第118-121页 |
| 1. RhoA/ROCK1通路与肿瘤 | 第118-119页 |
| 2. RhoA/ROCK1通路与Erk1/2 | 第119-121页 |
| 小结 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-134页 |
| 文献综述 | 第134-144页 |
| References | 第140-144页 |
| 缩略词表 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 研究生在读期间参加学术活动、发表论文情况 | 第147-148页 |
