| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一部分 前言 | 第10-13页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-11页 |
| 1.1.1 肺癌的危害和现状 | 第10页 |
| 1.1.2 肺癌的治疗及前景 | 第10-11页 |
| 1.2 研究的目的和意义 | 第11-13页 |
| 第二部分 实验仪器与试剂 | 第13-15页 |
| 2.1 实验材料 | 第13页 |
| 2.1.1 实验采用的细胞系 | 第13页 |
| 2.1.2 实验药物 | 第13页 |
| 2.2 主要的药品 | 第13页 |
| 2.3 主要的实验仪器 | 第13-15页 |
| 第三部分 基础准备实验 | 第15-19页 |
| 3.1 准备实验 | 第15-17页 |
| 3.2 基础实验 | 第17-19页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第17页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第17-18页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第18-19页 |
| 第四部分MTT实验检测单药及双药联合对A549细胞增殖影响 | 第19-28页 |
| 4.1 药品的配制 | 第19-20页 |
| 4.1.1 顺铂的配制 | 第19页 |
| 4.1.2 岗田酸的配制 | 第19页 |
| 4.1.3 MTT工作液 | 第19-20页 |
| 4.2 实验方法 | 第20-21页 |
| 4.2.1 MTT实验检测顺铂对A549细胞增殖抑制率 | 第20页 |
| 4.2.2 MTT实验检测岗田酸对A549细胞增殖抑制率 | 第20页 |
| 4.2.3 MTT实验检测岗田酸联合顺铂对A549细胞增殖抑制率 | 第20-21页 |
| 4.3 实验结果 | 第21-27页 |
| 4.3.1 MTT实验检测顺铂对A549细胞增殖抑制率 | 第21-23页 |
| 4.3.2 MTT实验检测岗田酸对A549细胞增殖抑制率 | 第23-24页 |
| 4.3.3 MTT实验检测岗田酸联合顺铂对A549细胞的增殖抑制率 | 第24-27页 |
| 4.4 讨论与分析 | 第27-28页 |
| 第五部分 药物作用下A549细胞数量及显微形态的变化 | 第28-36页 |
| 5.1 药品的配制 | 第28页 |
| 5.1.1 台盼蓝染液 | 第28页 |
| 5.1.2 Giemsa染液 | 第28页 |
| 5.1.3 吖叮橙染液 | 第28页 |
| 5.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 5.2.1 台盼蓝染色检测药物作用下A549细胞数量的变化 | 第28-29页 |
| 5.2.2 倒置相差显微镜下观察药物作用下A549细胞形态变化 | 第29页 |
| 5.2.3 Giemsa染色观察A549细胞在药物处理下的形态变化 | 第29页 |
| 5.2.4 吖叮橙染色观察A549细胞在药物处理下的核形态变化 | 第29-30页 |
| 5.3 实验结果 | 第30-35页 |
| 5.3.1 台盼蓝染色检测药物作用下A549细胞数量的变化 | 第30页 |
| 5.3.2 倒置相差显微镜下观察药物作用下A549细胞形态变化 | 第30-32页 |
| 5.3.3 Giemsa染色观察A549细胞在药物处理下的形态变化 | 第32-33页 |
| 5.3.4 吖叮橙染色观察A549细胞在药物处理下的核形态变化 | 第33-35页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第35-36页 |
| 第六部分 药物联合作用对A549细胞亚显微结构的影响 | 第36-39页 |
| 6.1 实验方法 | 第36页 |
| 6.2 实验结果 | 第36-38页 |
| 6.2.1 细胞全貌变化 | 第36-37页 |
| 6.2.2 细胞膜及核变化 | 第37-38页 |
| 6.3 讨论与分析 | 第38-39页 |
| 第七部分 药物联合作用下A549细胞遗传物质DNA的变化 | 第39-44页 |
| 7.1 药品的配制 | 第39-41页 |
| 7.1.1 蛋白酶K（10mg/ml） | 第39页 |
| 7.1.2 乙酸钠（NaAc, 3mol/l） | 第39页 |
| 7.1.3 Rnase（10mg/ml，无Dnase） | 第39页 |
| 7.1.4 10% SDS | 第39-40页 |
| 7.1.5 EDTA（0.5mol/l, PH=8.0） | 第40页 |
| 7.1.6 TE缓冲液（PH=8.0） | 第40页 |
| 7.1.7 50×TAE缓冲液 | 第40-41页 |
| 7.1.8 6×Loading Buffer | 第41页 |
| 7.1.9 DNA裂解液 | 第41页 |
| 7.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 7.3 实验结果 | 第42-43页 |
| 7.4 讨论与分析 | 第43-44页 |
| 第八部分 药物作用下A549细胞总蛋白含量的变化 | 第44-48页 |
| 8.1 药品的配制 | 第44-45页 |
| 8.1.1 PMSF（10mmol/l） | 第44页 |
| 8.1.2 细胞裂解液 | 第44页 |
| 8.1.3 考马斯亮蓝G250染液 | 第44页 |
| 8.1.4 0.1mg/ml牛血清白蛋白（BSA） | 第44-45页 |
| 8.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 8.2.1 细胞总蛋白的提取 | 第45页 |
| 8.2.2 蛋白含量的测定 | 第45-46页 |
| 8.3 实验结果 | 第46-47页 |
| 8.3.1 蛋白标准曲线 | 第46页 |
| 8.3.2 药物作用后细胞总蛋白的检测 | 第46-47页 |
| 8.4 讨论与分析 | 第47-48页 |
| 第九部分 药物作用下细胞凋亡机制探讨 | 第48-56页 |
| 9.1 药品配制 | 第48-49页 |
| 9.1.1 Rhodamine 123 | 第48页 |
| 9.1.2 外源Ca2+ | 第48-49页 |
| 9.2 实验方法 | 第49-50页 |
| 9.2.1 活性氧试剂盒检测细胞内活性氧水平 | 第49页 |
| 9.2.2 外源型Ca2+对药物作用下A549细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| 9.2.3 Rhodamine 123检测线粒体膜电位的变化 | 第50页 |
| 9.2.4 Jc-1 试剂盒检测线粒体去极化 | 第50页 |
| 9.3 实验结果 | 第50-54页 |
| 9.3.1 活性氧试剂盒检测细胞内活性氧水平 | 第50-51页 |
| 9.3.2 外源型Ca2+对药物作用下A549细胞凋亡的影响 | 第51-53页 |
| 9.3.3 Rhodamine 123检测线粒体膜电位的变化 | 第53-54页 |
| 9.3.4 Jc-1 试剂盒检测线粒体去极化 | 第54页 |
| 9.4 讨论与分析 | 第54-56页 |
| 第十部分 结论与展望 | 第56-57页 |
| 10.1 结论 | 第56页 |
| 10.2 展望 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
