摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
1.1 非小细胞肺癌概述 | 第10-11页 |
1.2 染色体结构维持蛋白4(structuralmaintenanceofchromosomes4,SMC4) | 第11-12页 |
1.3 CyclinD | 第12-13页 |
第2章 材料与仪器 | 第13-16页 |
2.1 材料 | 第13-14页 |
2.1.1 组织样本采集 | 第13页 |
2.1.2 细胞系 | 第13-14页 |
2.2 主要仪器和试剂 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
2.3 主要仪器 | 第14-16页 |
第3章 实验方法 | 第16-23页 |
3.1 细胞培养 | 第16-17页 |
3.1.1 细胞复苏 | 第16页 |
3.1.2 细胞培养及传代 | 第16-17页 |
3.2 荧光定量PCR | 第17-18页 |
3.2.1 RNA提取 | 第17页 |
3.2.2 RNA反转录 | 第17-18页 |
3.2.3 real-timePCR | 第18页 |
3.3 .Westenblot | 第18-21页 |
3.3.1 样品的制备 | 第18-19页 |
3.3.2 BCA法测蛋白浓度 | 第19页 |
3.3.3 凝胶的配制 | 第19-20页 |
3.3.4 电泳、转膜、封闭、孵育抗体及显影 | 第20-21页 |
3.4 细胞筛选 | 第21页 |
3.5 瞬时转染(westernblot验证转染效果) | 第21页 |
3.6 EDU免疫荧光染色法检测细胞增殖情况 | 第21-22页 |
3.7 Westernblot检测过表达SMC4蛋白的非小细胞肺癌细胞中cyclinD1的表达情况 | 第22页 |
3.8 统计学处理 | 第22-23页 |
第4章 结果 | 第23-29页 |
4.1 SMC4蛋白及SMC4mRNA在NSCLC组织中高表达 | 第23-24页 |
4.2 SMC4及cyclinD1在非小细胞肺癌细胞系中高表达 | 第24-25页 |
4.3 过表达SMC4的A549/PC9细胞增殖能力明显增强 | 第25-27页 |
4.4 过表达SMC4的A549/PC9细胞中cyclinD1表达量增高 | 第27-29页 |
第5章 讨论 | 第29-33页 |
5.1 SMC4参与肿瘤的形成机制 | 第29-30页 |
5.2 SMC4通过正向调控cyclinD1促进肺癌细胞增殖 | 第30-31页 |
5.3 总结 | 第31-33页 |
第6章 结论与展望 | 第33-34页 |
6.1 全文总结 | 第33页 |
6.2 不足之处与展望 | 第33-34页 |
致谢 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
综述 | 第39-45页 |
参考文献 | 第43-45页 |