| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| ·紫花苜蓿基因工程研究进展 | 第15-19页 |
| ·抗逆转基因苜蓿研究进展 | 第15-18页 |
| ·提高品质转基因苜蓿研究进展 | 第18-19页 |
| ·生物反应器转基因苜蓿研究进展 | 第19页 |
| ·启动子研究进展 | 第19-29页 |
| ·启动子的结构 | 第19-21页 |
| ·启动子的克隆方法 | 第21-24页 |
| ·启动子的分类及研究进展 | 第24-29页 |
| ·本研究的目的意义 | 第29-31页 |
| 第二章 启动子全长序列克隆及生物信息学分析 | 第31-43页 |
| ·材料和试剂 | 第31页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·酶和生化试剂 | 第31页 |
| ·试验所用仪器 | 第31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-38页 |
| ·溶液的配置 | 第31-32页 |
| ·DNA 提取 | 第32页 |
| ·全长启动子克隆 | 第32-34页 |
| ·转录起始位点的确定 | 第34-38页 |
| ·启动子序列分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·紫花苜蓿基因组 DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·全长启动子片段的克隆 | 第39页 |
| ·启动子序列转录起始位点确定及生物信息学分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 不同长度 5’缺失启动子表达载体的构建 | 第43-49页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·引物设计 | 第43-45页 |
| ·PCR 反应及克隆载体的构建 | 第45页 |
| ·表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·5’端缺失启动子的克隆 | 第46-47页 |
| ·克隆载体酶切鉴定 | 第47页 |
| ·表达载体酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 烟草转化及转基因烟草中缺失启动子活性的研究 | 第49-69页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料和菌株 | 第49页 |
| ·载体 | 第49页 |
| ·所需培养基 | 第49-50页 |
| ·试验仪器 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-58页 |
| ·农杆菌转化 | 第50页 |
| ·烟草转化 | 第50-51页 |
| ·转基因烟草的 PCR 检测 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草的 GUS 组织特异性分析 | 第52-53页 |
| ·转基因植株 GUS 荧光定量分析 | 第53-55页 |
| ·各种物理因素和化学因素诱导下 GUS 酶活性分析 | 第55-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-67页 |
| ·转基因烟草的再生 | 第58页 |
| ·含有不同 5’缺失启动子及全长启动子的转基因烟草 PCR 检测 | 第58-62页 |
| ·不同 5’缺失启动子及全长启动子转基因烟草的 GUS 蛋白组织特异性检测 | 第62-64页 |
| ·不同 5’缺失启动子及全长启动子转基因烟草的 GUS 酶活性检测 | 第64-65页 |
| ·不同 5’缺失启动子及全长启动子转基因烟草对化学和物理诱导的响应 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 下游基因 5’-UTR 区对启动子功能的影响 | 第69-82页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·植物材料及菌株 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-78页 |
| ·含有下游基因 5’-UTR 区的启动子片段的克隆 | 第69-72页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·农杆菌介导的烟草的转化及再生植株的 PCR 检测 | 第73-75页 |
| ·转基因烟草的组织化学染色分析 | 第75-76页 |
| ·转基因植株 GUS 荧光定量分析 | 第76-78页 |
| ·结果与分析 | 第78-81页 |
| ·目的片段的克隆 | 第78页 |
| ·克隆载体酶切鉴定 | 第78-79页 |
| ·表达载体酶切鉴定 | 第79页 |
| ·转基因烟草的 PCR 鉴定 | 第79-80页 |
| ·转基因烟草的 GUS 蛋白组织特异性检测 | 第80-81页 |
| ·转基因烟草的 GUS 酶活性检测 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| 第六章 全文结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-98页 |
| 附录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 作者简历 | 第101页 |
