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树鼩骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的研究

摘要第5-6页
Abstract第6页
前言第7-13页
第一部分 树鼩骨髓间充质干细胞的分离与培养及鉴定第13-28页
    1. 实验材料第13-14页
        1.1 实验动物第13页
        1.2 主要试剂与耗材第13-14页
        1.3 主要仪器第14页
    2 实验方法第14-17页
        2.1 树鼩骨髓间充质干细胞的获取第14-15页
        2.2 树鼩骨髓间充质干细胞的培养与保存第15页
        2.3 不同血清浓度下树鼩骨髓间充质干细胞生长曲线的测定第15-16页
        2.4 树鼩骨髓间充质干细胞的成脂诱导及检测第16页
        2.5 树鼩骨髓间充质干细胞的成骨诱导及检测第16-17页
        2.6 树鼩骨髓间充质干细胞的分子表明抗原检测第17页
    3 结果及分析第17-24页
        3.1 骨髓间充质干细胞原代培养形态学观察第17-19页
        3.2 骨髓间充质干细胞的传代培养形态学观察第19-21页
        3.4 骨髓间充质干细胞的成脂肪细胞诱导第21-22页
        3.5 骨髓间充质干细胞的成骨细胞诱导第22-23页
        3.6 树鼩骨髓间充质干细胞的分子表明标志分析第23-24页
    4 讨论第24-27页
        4.1 不同分离方法对于树鼩骨髓间充质干细胞原代培养的影响第24-25页
        4.2 不同血清浓度对于骨髓间充质干细胞传代培养的影响第25页
        4.3 不同年龄段骨髓间充质干细胞的生长能力比较第25页
        4.4 树鼩骨髓间充质成骨及成脂诱导及树鼩间充质干细胞的鉴定探讨第25-27页
    5 小结第27-28页
第二部分 树鼩肝细胞生长因子(HGF)全长编码序列的克隆及分子特征分析第28-43页
    1 实验材料第28-29页
        1.1 实验动物第28页
        1.2 主要试剂与耗材第28页
        1.3 主要仪器第28-29页
    2 实验方法第29-34页
        2.1 肝组织总RNA的提取第29页
        2.2 树鼩肝细胞生长因子全长编码序列的克隆第29-33页
        2.3 树鼩肝细胞生长因子全长编码序列的特征分析第33-34页
    3 结果第34-35页
        3.1 树鼩HGF全长编码序列扩增结果第34-35页
        3.2 树鼩HGF三维分子模型的构建第35页
    4 分析与讨论第35-42页
        4.1 树鼩HGF核苷酸序列的分析讨论第35页
        4.2 树鼩HGF氨基酸序列的分析讨论第35-42页
    5 小结第42-43页
第三部分 树鼩骨髓间充质干细胞的成肝样细胞诱导第43-57页
    1 实验材料第43-45页
        1.1 实验细胞第43页
        1.2 主要试剂与耗材第43-44页
        1.3 主要仪器第44-45页
    2. 实验方法第45-50页
        2.1 骨髓间充质干细胞的复苏第45页
        2.2 骨髓间充质干细胞的成肝样细胞诱导第45-46页
        2.3 肝样细胞的检测第46-50页
            2.3.2 肝细胞细胞标志物血清白蛋白的检测第49页
            2.3.3 肝细胞糖原PAS法染色第49-50页
    3 结果及分析第50-54页
        3.1 骨髓间充质干细胞成肝诱导细胞的形态学观察第50-51页
        3.2 骨髓间充质干细胞成肝诱导过程中的肝细胞标记PCR产物的电泳检测第51-52页
        3.3 骨髓间充质干细胞成肝过程中的血清白蛋白的间接免疫荧光检测第52-54页
    4 讨论第54-56页
        4.1 骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导方法的选择第54-55页
        4.2 肝样细胞的鉴定指标的选择与结果评估第55-56页
        4.3 诱导形成的肝样细胞中出现脂滴积累的讨论第56页
    5 小结第56-57页
结论第57-58页
展望第58-59页
参考文献第59-64页
附录一 缩写词中英文对照第64-65页
附录二 主要溶液配方第65-68页
致谢第68-70页
研究生简历第70-71页

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