摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
前言 | 第7-13页 |
第一部分 树鼩骨髓间充质干细胞的分离与培养及鉴定 | 第13-28页 |
1. 实验材料 | 第13-14页 |
1.1 实验动物 | 第13页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第13-14页 |
1.3 主要仪器 | 第14页 |
2 实验方法 | 第14-17页 |
2.1 树鼩骨髓间充质干细胞的获取 | 第14-15页 |
2.2 树鼩骨髓间充质干细胞的培养与保存 | 第15页 |
2.3 不同血清浓度下树鼩骨髓间充质干细胞生长曲线的测定 | 第15-16页 |
2.4 树鼩骨髓间充质干细胞的成脂诱导及检测 | 第16页 |
2.5 树鼩骨髓间充质干细胞的成骨诱导及检测 | 第16-17页 |
2.6 树鼩骨髓间充质干细胞的分子表明抗原检测 | 第17页 |
3 结果及分析 | 第17-24页 |
3.1 骨髓间充质干细胞原代培养形态学观察 | 第17-19页 |
3.2 骨髓间充质干细胞的传代培养形态学观察 | 第19-21页 |
3.4 骨髓间充质干细胞的成脂肪细胞诱导 | 第21-22页 |
3.5 骨髓间充质干细胞的成骨细胞诱导 | 第22-23页 |
3.6 树鼩骨髓间充质干细胞的分子表明标志分析 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-27页 |
4.1 不同分离方法对于树鼩骨髓间充质干细胞原代培养的影响 | 第24-25页 |
4.2 不同血清浓度对于骨髓间充质干细胞传代培养的影响 | 第25页 |
4.3 不同年龄段骨髓间充质干细胞的生长能力比较 | 第25页 |
4.4 树鼩骨髓间充质成骨及成脂诱导及树鼩间充质干细胞的鉴定探讨 | 第25-27页 |
5 小结 | 第27-28页 |
第二部分 树鼩肝细胞生长因子(HGF)全长编码序列的克隆及分子特征分析 | 第28-43页 |
1 实验材料 | 第28-29页 |
1.1 实验动物 | 第28页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第28页 |
1.3 主要仪器 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-34页 |
2.1 肝组织总RNA的提取 | 第29页 |
2.2 树鼩肝细胞生长因子全长编码序列的克隆 | 第29-33页 |
2.3 树鼩肝细胞生长因子全长编码序列的特征分析 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-35页 |
3.1 树鼩HGF全长编码序列扩增结果 | 第34-35页 |
3.2 树鼩HGF三维分子模型的构建 | 第35页 |
4 分析与讨论 | 第35-42页 |
4.1 树鼩HGF核苷酸序列的分析讨论 | 第35页 |
4.2 树鼩HGF氨基酸序列的分析讨论 | 第35-42页 |
5 小结 | 第42-43页 |
第三部分 树鼩骨髓间充质干细胞的成肝样细胞诱导 | 第43-57页 |
1 实验材料 | 第43-45页 |
1.1 实验细胞 | 第43页 |
1.2 主要试剂与耗材 | 第43-44页 |
1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
2. 实验方法 | 第45-50页 |
2.1 骨髓间充质干细胞的复苏 | 第45页 |
2.2 骨髓间充质干细胞的成肝样细胞诱导 | 第45-46页 |
2.3 肝样细胞的检测 | 第46-50页 |
2.3.2 肝细胞细胞标志物血清白蛋白的检测 | 第49页 |
2.3.3 肝细胞糖原PAS法染色 | 第49-50页 |
3 结果及分析 | 第50-54页 |
3.1 骨髓间充质干细胞成肝诱导细胞的形态学观察 | 第50-51页 |
3.2 骨髓间充质干细胞成肝诱导过程中的肝细胞标记PCR产物的电泳检测 | 第51-52页 |
3.3 骨髓间充质干细胞成肝过程中的血清白蛋白的间接免疫荧光检测 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
4.1 骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导方法的选择 | 第54-55页 |
4.2 肝样细胞的鉴定指标的选择与结果评估 | 第55-56页 |
4.3 诱导形成的肝样细胞中出现脂滴积累的讨论 | 第56页 |
5 小结 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录一 缩写词中英文对照 | 第64-65页 |
附录二 主要溶液配方 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
研究生简历 | 第70-71页 |