| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语对照表 | 第13-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-48页 |
| 1.1 本草考证 | 第18-19页 |
| 1.2 大豆组成成分 | 第19-25页 |
| 1.2.1 大豆活性成分 | 第19-20页 |
| 1.2.2 大豆蛋白组成 | 第20-25页 |
| 1.3 蛋白糖基化修饰的种类和功能 | 第25-30页 |
| 1.3.1 N-糖基化 | 第25-27页 |
| 1.3.2 O-糖基化 | 第27-28页 |
| 1.3.3 糖蛋白的生物学功能 | 第28-30页 |
| 1.4 N-糖链分析 | 第30-35页 |
| 1.4.1 N-糖链释放 | 第30-32页 |
| 1.4.2 N-糖链富集和纯化 | 第32-33页 |
| 1.4.3 N-糖链检测与分析 | 第33-35页 |
| 1.5 糖基化位点分析 | 第35-40页 |
| 1.5.1 糖肽的分离和富集 | 第36-38页 |
| 1.5.2 糖基化位点鉴定 | 第38-40页 |
| 1.6 糖链对蛋白质致敏性的影响 | 第40-46页 |
| 1.6.1 过敏反应机制 | 第41-42页 |
| 1.6.2 糖蛋白致敏性研究现状 | 第42-45页 |
| 1.6.3 过敏反应动物模型 | 第45-46页 |
| 1.7 本研究的主要目的和意义 | 第46-48页 |
| 第二章 大豆糖蛋白的SDS-PAGE分离及N-糖链分析 | 第48-66页 |
| 2.1 前言 | 第48页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第48-49页 |
| 2.2.1 材料 | 第48-49页 |
| 2.2.2 仪器 | 第49页 |
| 2.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 2.3.1 溶液配制 | 第49-50页 |
| 2.3.2 大豆蛋白制备 | 第50-51页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE分离大豆蛋白并回收胶条蛋白 | 第51页 |
| 2.3.4 PNGase F酶解法释放大豆蛋白N-糖链 | 第51页 |
| 2.3.5 PNGase F酶解N-糖链的标记和衍生 | 第51-52页 |
| 2.3.6 非还原性释放并且同时标记糖蛋白N-糖链 | 第52页 |
| 2.3.7 ESI-MS和MS/MS分析 | 第52页 |
| 2.3.8 在线LC-UV-MS/MS~2分析 | 第52-53页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第53-65页 |
| 2.4.1 大豆蛋白SDS-PAGE分析 | 第54-55页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE蛋白条带N-糖链双PMP衍生物的ESI-MS分析 | 第55-60页 |
| 2.4.3 N-糖链的分离和定量分析 | 第60-65页 |
| 2.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第三章 成熟与未成熟大豆N-糖链定性定量比较分析 | 第66-88页 |
| 3.1 前言 | 第66页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第66-67页 |
| 3.2.1 材料 | 第66-67页 |
| 3.2.2 仪器 | 第67页 |
| 3.3 实验方法 | 第67-69页 |
| 3.3.1 成熟与未成熟大豆蛋白的制备 | 第67页 |
| 3.3.2 成熟与未成熟大豆7S球蛋白的制备 | 第67-68页 |
| 3.3.3 成熟与未成熟大豆SDS-PAGE鉴定 | 第68-69页 |
| 3.3.4 化学法释放N-糖链 | 第69页 |
| 3.3.5 麦芽六糖的标记和衍生 | 第69页 |
| 3.3.6 ESI-MS和MS/MS分析 | 第69页 |
| 3.3.7 在线LC-UV-MS/MS~2分析 | 第69页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第69-86页 |
| 3.4.1 成熟与未成熟大豆蛋白SDS-PAGE比较分析 | 第69-71页 |
| 3.4.2 成熟与未成熟大豆蛋白N-糖链质谱分析 | 第71-76页 |
| 3.4.3 成熟与未成熟大豆蛋白N-糖链LC-UV-MS/MS~2分析 | 第76-79页 |
| 3.4.4 成熟与未成熟大豆蛋白N-糖链的定量比较分析 | 第79-83页 |
| 3.4.5 成熟与未成熟大豆7S球蛋白N-糖链质谱分析 | 第83-84页 |
| 3.4.6 成熟与未成熟大豆7S球蛋白N-糖链LC-UV-MS/MS~2分析 | 第84-85页 |
| 3.4.7 成熟与未成熟大豆7S球蛋白N-糖链的定量比较分析 | 第85-86页 |
| 3.5 本章小结 | 第86-88页 |
| 第四章 β-conglycinin和Gly m Bd 30K的糖基化位点分析 | 第88-112页 |
| 4.1 前言 | 第88-89页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第89-90页 |
| 4.2.1 材料 | 第89页 |
| 4.2.2 仪器 | 第89-90页 |
| 4.3 实验方法 | 第90-93页 |
| 4.3.1 β-conglycinin和Gly m Bd 30K分离纯化 | 第90页 |
| 4.3.2 β-conglycinin和Gly m Bd 30K蛋白SDS-PAGE分析 | 第90页 |
| 4.3.3 β-conglycinin和Gly m Bd 30K蛋白酶解 | 第90页 |
| 4.3.4 Con A凝集素亲和富集糖肽 | 第90-91页 |
| 4.3.5 糖肽的PNGase F和Endo H酶解 | 第91-92页 |
| 4.3.6 MALDI-TOF-MS检测糖肽 | 第92页 |
| 4.3.7 在线LC-UV-MS/MS~2分析 | 第92页 |
| 4.3.8 数据库检索与数据分析 | 第92-93页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第93-110页 |
| 4.4.1 等电点纯化大豆7S球蛋白 | 第94-95页 |
| 4.4.2 β-conglycinin和Gly m Bd 30K的分离纯化和鉴定 | 第95-96页 |
| 4.4.3 β-conglycinin蛋白糖肽的制备与ESI-MS分析 | 第96-98页 |
| 4.4.4 β-conglycinin糖基化位点分析 | 第98-108页 |
| 4.4.5 β-conglycinin蛋白糖肽N-糖链的ESI-MS分析 | 第108-109页 |
| 4.4.6 Gly m Bd 30K糖基化位点分析 | 第109-110页 |
| 4.5 本章小结 | 第110-112页 |
| 第五章 成熟与未成熟大豆糖蛋白致敏性分析研究 | 第112-126页 |
| 5.1 前言 | 第112页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第112-113页 |
| 5.2.1 材料 | 第112页 |
| 5.2.2 仪器 | 第112-113页 |
| 5.3 实验动物与饲养条件 | 第113页 |
| 5.4 实验方法 | 第113-119页 |
| 5.4.1 蛋白样品的制备 | 第113页 |
| 5.4.2 蛋白样品SDS-PAGE检测 | 第113页 |
| 5.4.3 小鼠致敏模型的构建 | 第113-117页 |
| 5.4.4 被动皮肤过敏试验 | 第117-119页 |
| 5.4.5 统计学分析 | 第119页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第119-125页 |
| 5.5.1 成熟与未成熟大豆7S球蛋白的鉴定 | 第119页 |
| 5.5.2 Balb/c小鼠IgE表达水平分析 | 第119-121页 |
| 5.5.3 Balb/c小鼠组胺水平分析 | 第121-123页 |
| 5.5.4 Balb/c小鼠特异性IgE抗体滴度测定 | 第123-125页 |
| 5.6 本章小结 | 第125-126页 |
| 第六章 大豆7S球蛋白N-糖链在过敏中作用研究 | 第126-140页 |
| 6.1 前言 | 第126-127页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第127页 |
| 6.2.1 材料 | 第127页 |
| 6.2.2 仪器 | 第127页 |
| 6.3 实验动物与饲养条件 | 第127页 |
| 6.4 实验方法 | 第127-131页 |
| 6.4.1 蛋白样品的制备 | 第127-128页 |
| 6.4.2 蛋白样品SDS-PAGE检测 | 第128页 |
| 6.4.3 小鼠致敏模型的构建 | 第128-129页 |
| 6.4.4 被动皮肤过敏试验 | 第129-131页 |
| 6.4.5 统计学分析 | 第131页 |
| 6.5 结果与讨论 | 第131-138页 |
| 6.5.1 7S球蛋白和去糖基7S球蛋白的鉴定 | 第131-132页 |
| 6.5.2 Balb/c小鼠IgE表达水平分析 | 第132-134页 |
| 6.5.3 Balb/c小鼠组胺水平分析 | 第134-137页 |
| 6.5.4 Balb/c小鼠特异性IgE抗体滴度测定 | 第137-138页 |
| 6.6 本章小结 | 第138-140页 |
| 总结与展望 | 第140-142页 |
| 参考文献 | 第142-162页 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 | 第162-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 作者简介 | 第166页 |
