| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 IBV病原学 | 第11-14页 |
| 1.1.1 IBV基因组结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 IBV结构蛋白 | 第12-14页 |
| 1.2 IB流行病学 | 第14页 |
| 1.3 IB致病机理 | 第14-15页 |
| 1.4 IB临床症状和病理变化 | 第15-16页 |
| 1.5 IB诊断技术 | 第16-19页 |
| 1.5.1 血清学诊断方法 | 第16页 |
| 1.5.2 病毒分离 | 第16-17页 |
| 1.5.3 电镜鉴定 | 第17页 |
| 1.5.4 免疫组织化学 | 第17-18页 |
| 1.5.5 分子生物学诊断 | 第18-19页 |
| 1.5.6 鉴别诊断 | 第19页 |
| 1.6 IBV单克隆抗体研究进展 | 第19页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 病毒株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 动物及细胞 | 第21页 |
| 2.1.3 酶和主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 IBV单克隆抗体的制备 | 第24-27页 |
| 2.2.2 单克隆抗体生物学特征鉴定 | 第27-29页 |
| 2.2.3 抗原捕捉ELISA方法建立与应用 | 第29-32页 |
| 2.2.4 数据统计 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-52页 |
| 3.1 IBV单克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
| 3.1.1 免疫抗原的制备 | 第33页 |
| 3.1.2 ELISA筛选方法的建立 | 第33-34页 |
| 3.1.3 杂交瘤细胞的筛选 | 第34页 |
| 3.1.4 腹水制备 | 第34页 |
| 3.2 单克隆抗体生物学特征鉴定 | 第34-42页 |
| 3.2.1 单克隆抗体浓度与效价测定 | 第34-35页 |
| 3.2.2 单克隆抗体Western blot鉴定 | 第35-37页 |
| 3.2.3 单克隆抗体IFA检测 | 第37-39页 |
| 3.2.4 杂交瘤细胞分泌单克隆抗体稳定性试验 | 第39页 |
| 3.2.5 杂交瘤细胞染色体计数 | 第39-40页 |
| 3.2.6 单克隆抗体Ig亚类鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.7 单克隆抗体中和活性鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.8 单克隆抗体特异性分析 | 第42页 |
| 3.3 IBV抗原捕捉ELISA（AC-ELISA）方法建立与应用 | 第42-52页 |
| 3.3.1 抗原捕捉ELISA优化 | 第42-48页 |
| 3.3.2 抗原捕捉ELISA方法特异性试验 | 第48页 |
| 3.3.3 抗原捕捉ELISA方法灵敏性试验 | 第48-49页 |
| 3.3.4 抗原捕捉ELISA方法重复性试验 | 第49-50页 |
| 3.3.5 M41株IBV人工感染样本的检测 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 抗原的制备 | 第52页 |
| 4.2 单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| 4.3 单克隆抗体生物学特性鉴定 | 第53-54页 |
| 4.4 AC-ELISA检测方法建立 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |