中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
1 前言 | 第10-23页 |
·问题的提出 | 第10-11页 |
·现状及国内研究背景 | 第11-19页 |
·微囊藻毒素及污染现状 | 第11-13页 |
·研究背景 | 第13-19页 |
·微囊藻毒素提取的研究现状 | 第13-16页 |
·破损蓝藻细胞的方法 | 第13-14页 |
·溶剂萃取的主要体系 | 第14页 |
·固相萃取(SPE) | 第14-15页 |
·固相微萃取(SPME) | 第15页 |
·分离技术 | 第15-16页 |
·国内外微囊藻毒素分析方法进展 | 第16-17页 |
·酶联免疫检测在微囊藻毒素检测方法中的应用进展 | 第17-19页 |
·ELISA 及检测过程中的关键问题 | 第17-18页 |
·ELISA 的改进和发展 | 第18-19页 |
·研究意义 | 第19-20页 |
·各级环境监测站都有检测需要 | 第19-20页 |
·目前应用的HPLC 法――高价设备、前处理要求高、标准试剂品费用高 | 第20页 |
·ELISA 法简单易行,可作为是否实施HPLC 的前期试验 | 第20页 |
·研究难点 | 第20-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-25页 |
·实验仪器设备及耗材 | 第23页 |
·SDS-PAGE 电泳缓冲液准备 | 第23-24页 |
·ELISA 主要试剂配制 | 第24页 |
·细胞培养试剂系统 | 第24-25页 |
·实验动物及细胞 | 第25页 |
·方法 | 第25-35页 |
·MC-LR 的提取与纯化 | 第25-26页 |
·蓝藻样品的收集与预处理 | 第25页 |
·初步分离 MC-LR 色谱条件 | 第25页 |
·MC-LR 的纯化 | 第25-26页 |
·MC-LR 的鉴定及纯度测定 | 第26页 |
·完全抗原的合成 | 第26-29页 |
·合成原理 | 第26-27页 |
·MC-LR 完全抗原的人工合成 | 第26-27页 |
·产物的纯化及鉴定 | 第27页 |
·试验操作的具体过程 | 第27-29页 |
·微囊藻毒素的氨基活化 | 第27页 |
·戊二醛两步法合成微囊藻毒素完全抗原 | 第27-29页 |
·微囊藻毒素-LR 单克隆抗体细胞株系的研究 | 第29-35页 |
·实验原理 | 第29页 |
·动物免疫 | 第29-30页 |
·细胞融合 | 第30-32页 |
·骨髓瘤细胞的复苏与培养 | 第30-31页 |
·饲养细胞的制备 | 第31页 |
·细胞融合方法及具体步骤 | 第31-32页 |
·观察细胞生长情况 | 第32页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第32-33页 |
·阳性细胞孔的筛选 | 第32页 |
·阳性细胞孔的进一步筛选 | 第32-33页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆和扩大培养 | 第33页 |
·细胞的冻存 | 第33页 |
·ELISA 检测方法的建立 | 第33-35页 |
·包被抗原最适浓度的确定 | 第33-34页 |
·血清效价的测定 | 第34-35页 |
3 实验结果与分析 | 第35-49页 |
·MC-LR 提取与分离实验结果 | 第35-40页 |
·初步分离MC-LR 色谱条件 | 第35-36页 |
·MC-LR 的鉴定结果 | 第36-39页 |
·MC-LR 定性鉴定结果 | 第36-38页 |
·MC-LR 纯度鉴定结果 | 第38-39页 |
·MC-LR 提取总量 | 第39页 |
·小结 | 第39-40页 |
·MC-LR 人工抗原的鉴定及结果 | 第40-44页 |
·H2N-etMC-LR 的鉴定及结果 | 第40页 |
·微囊藻毒素完全抗原的定性鉴定 | 第40-41页 |
·微囊藻毒素完全抗原的定量鉴定 | 第41页 |
·微囊藻毒素完全抗原研制的讨论 | 第41-44页 |
·MC-LR 的氨基衍生化 | 第41-42页 |
·戊二醛两步法合成微囊藻毒素人工抗原 | 第42页 |
·完全抗原的鉴定 | 第42-44页 |
·微囊藻毒素-LR 单克隆抗体细胞株系建立的结果 | 第44-49页 |
·包被抗原最适浓度的确定 | 第44-45页 |
·血清抗体效价的测定 | 第45页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第45-47页 |
·阳性细胞孔的筛选 | 第45-47页 |
·阳性孔细胞的克隆和细胞保存 | 第47页 |
·小结与讨论 | 第47-49页 |
·包被抗原最适浓度的确定 | 第47页 |
·血清抗体效价的测定 | 第47-48页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第48-49页 |
4 结论 | 第49-51页 |
5 总结与展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |