摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第12-27页 |
1.1 藻胆蛋白 | 第12-14页 |
1.2 藻胆色素 | 第14-16页 |
1.3 裂合酶催化合成色素蛋白 | 第16-18页 |
1.4 光敏色素 | 第18-19页 |
1.5 蓝细菌光敏色素 | 第19-21页 |
1.6 荧光蛋白研究现状 | 第21-23页 |
1.7 色素荧光蛋白的应用 | 第23-24页 |
1.8 本课题的研究意义 | 第24-27页 |
2 聚球藻WH8102藻红蛋白大肠杆菌体内合成研究 | 第27-45页 |
2.1 引言 | 第27-28页 |
2.2 材料与方法 | 第28-38页 |
2.3 各基因的克隆与表达 | 第38页 |
2.4 CpeY/Z催化聚球藻WH8102的CpeA连接PEB | 第38-42页 |
2.5 SYNW2007、MpeU、SYNW2019等与MpeA的体内重组 | 第42-43页 |
2.6 本章小结 | 第43-45页 |
3 结合藻尿胆素的藻胆蛋白大肠杆菌体内合成 | 第45-61页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 材料与方法 | 第46-48页 |
3.3 PecA结合PUB的大肠杆菌体内合成 | 第48-51页 |
3.4 PecE和PecF的同源性分析 | 第51-53页 |
3.5 裂合异构酶RpcG催化PecA和RpcA结合PUB或PVB | 第53-58页 |
3.6 天然RpcA的分离与鉴定 | 第58页 |
3.7 裂合异构酶RpcG不能单独异构藻胆色素 | 第58-59页 |
3.8 本章小结 | 第59-61页 |
4 异源连接的色素蛋白在大肠杆菌体内合成 | 第61-70页 |
4.1 引言 | 第61-62页 |
4.2 材料与方法 | 第62-63页 |
4.3 RpcA异源连接多种藻胆色素 | 第63-66页 |
4.4 PecA和CpcA异源结合PEB | 第66-67页 |
4.5 CpcB和PecB突变体异源结合PEB | 第67-68页 |
4.6 本章小结 | 第68-70页 |
5 基于GAF结构域的色素蛋白在大肠杆菌体内合成 | 第70-80页 |
5.1 引言 | 第70-71页 |
5.2 材料与方法 | 第71-72页 |
5.3 GAF3结构域自催化结合PCB或PΦB | 第72-73页 |
5.4 PCB-GAF3和PΦB-GAF3具有可逆光致变色效应 | 第73-77页 |
5.5 色素蛋白变性后的光谱分析 | 第77-78页 |
5.6 PCB-GAF3和PΦB-GAF3的SDS-PAGE电泳 | 第78-79页 |
5.7 本章小结 | 第79-80页 |
6 色素蛋白在大肠杆菌体内合成中的简化 | 第80-97页 |
6.1 引言 | 第80-81页 |
6.2 材料与方法 | 第81-86页 |
6.3 融合基因的构建 | 第86-87页 |
6.4 PecA、CpcB与融合蛋白重组细胞产物光谱分析 | 第87-88页 |
6.5 酶融合前后色素蛋白荧光活性的比较 | 第88-89页 |
6.6 重组色素蛋白纯化后吸收和荧光光谱 | 第89-92页 |
6.7 色素蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第92-93页 |
6.8 表达色素蛋白的活细胞荧光成像 | 第93-95页 |
6.9 本章小结 | 第95-97页 |
7 构建基于蓝细菌光敏色素GAF结构域的新型荧光蛋白 | 第97-117页 |
7.1 引言 | 第97-98页 |
7.2 材料与方法 | 第98-102页 |
7.3 融合基因的构建 | 第102-105页 |
7.4 融合前后色素蛋白荧光活性比较 | 第105-106页 |
7.5 色素蛋白PCB-GAF3:HO1:PcyA光谱分析 | 第106-110页 |
7.6 荧光色素蛋白PCB-GAF3:HO1:PcyA显微镜观察 | 第110-112页 |
7.7 ApcA:HO1:PcyA的光谱图以及活细胞显微镜观察 | 第112-114页 |
7.8 在包埋PCB-GAF3:HO1:PcyA的PVA膜上演示光致变色效应. | 第114-115页 |
7.9 本章小结 | 第115-117页 |
8 总结与展望 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-134页 |
附录1 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第134-136页 |
附录2 缩略词(Abbreviation) | 第136-137页 |