| 英文缩略表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 雌激素 | 第12-14页 |
| 1.1.1 简介 | 第12页 |
| 1.1.2 雌激素的作用方式 | 第12页 |
| 1.1.3 雌激素与某些疾病的关系 | 第12-14页 |
| 1.2 雌激素受体 | 第14-17页 |
| 1.2.1 雌激素受体结构及其特点 | 第14-15页 |
| 1.2.2 雌激受体的作用介绍 | 第15页 |
| 1.2.3 雌激素受体介导的基因转录及调控 | 第15-17页 |
| 1.3 激光共聚焦的简介 | 第17-18页 |
| 1.4 研究的背景和目的意义 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究背景 | 第18-19页 |
| 1.4.2 研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 比格犬ERβ及其剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)重组慢病毒质粒的构建 | 第20-30页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.1 质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器和耗材 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 PCR方法获得目的基因 | 第20-23页 |
| 2.2.2 重组慢病毒质粒的构建与鉴定 | 第23-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-28页 |
| 2.3.1 重组质粒的PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.2 重组质粒的双酶切鉴定 | 第28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 构建比格犬ERβ及其剪切异构体ERβ_(419)、ERβ_(431)稳定表达的细胞系 | 第30-40页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.2 方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第31页 |
| 3.2.2 病毒包装 | 第31-32页 |
| 3.2.3 病毒收集 | 第32页 |
| 3.2.4 慢病毒滴度测定 | 第32页 |
| 3.2.5 病毒感染细胞后抗生素筛选 | 第32-33页 |
| 3.2.6 提取细胞总蛋白 | 第33页 |
| 3.2.7 BCA方法测定蛋白浓度 | 第33-34页 |
| 3.2.8 Western blot检测蛋白表达 | 第34-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-38页 |
| 3.3.1 细胞系GFP的表达 | 第35-37页 |
| 3.3.2 稳定细胞系蛋白表达的检测 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38页 |
| 3.5 小结 | 第38-40页 |
| 第四章 目的蛋白ERβ、ERβ_(419)、ERβ_(431)的亚细胞定位 | 第40-44页 |
| 4.1 材料 | 第40页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 4.2 方法 | 第40-41页 |
| 4.2.1 PKH26对细胞膜的染色 | 第40页 |
| 4.2.2 Hoechst33258对细胞核的染色 | 第40-41页 |
| 4.2.3 激光共聚焦显微镜观察 | 第41页 |
| 4.3 结果 | 第41-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 4.5 小结 | 第43-44页 |
| 第五章 比格犬雌激素受体ERβ、ERβ_(419)、ERβ_(431)的转录活性分析 | 第44-58页 |
| 5.1 材料 | 第44-45页 |
| 5.1.1 主要仪器设备和耗材 | 第44页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 5.2 方法 | 第45-52页 |
| 5.2.1 构建ERE-LUC重组质粒 | 第45-47页 |
| 5.2.2 构建hRLUC重组质粒 | 第47-50页 |
| 5.2.3 ERE-LUC以及海肾荧光素酶载体导入构建好的稳定细胞系内 | 第50-51页 |
| 5.2.4 检测加入刺激物后荧光素酶和海肾荧光素酶的活性 | 第51-52页 |
| 5.3 结果 | 第52-54页 |
| 5.3.1 ERE-LUC重组质粒的鉴定 | 第52页 |
| 5.3.2 RLUC重组质粒的鉴定 | 第52-53页 |
| 5.3.3 双荧光素酶系统检测结果分析 | 第53-54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-56页 |
| 5.5 小结 | 第56-58页 |
| 第六章 结论 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 个人简历 | 第74-75页 |
