摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第12-22页 |
1. 表观遗传学 | 第12-15页 |
1.1 表观遗传学定义 | 第12页 |
1.2 DNA甲基化背景 | 第12-14页 |
1.3 植物DNA甲基化的生物学功能 | 第14-15页 |
2. 植物胚乳基因的研究意义及研究进展 | 第15-16页 |
3. DNA甲基化抑制剂5-azaC及其功能 | 第16-18页 |
3.1 5-azaC简介 | 第17页 |
3.2 5-azaC在植物中的作用 | 第17-18页 |
4. DNA去甲基化的研究进展 | 第18-19页 |
5. DNA甲基化的研究方法 | 第19-21页 |
5.1 HPLC | 第19页 |
5.2 亚硫酸氢钠测序法 | 第19-20页 |
5.3 甲基化敏感的限制性内切酶结合Southern杂交分析法 | 第20页 |
5.4 MSAP | 第20-21页 |
6. 立题依据 | 第21-22页 |
第二部分 材料与方法 | 第22-33页 |
1 实验材料 | 第22-25页 |
1.1 材料 | 第22页 |
1.2 初步筛选的基因 | 第22-23页 |
1.3 主要试剂和仪器 | 第23-25页 |
1.3.1 试剂 | 第23-25页 |
1.3.2 仪器 | 第25页 |
2 实验方法 | 第25-33页 |
2.1 设计引物 | 第25-26页 |
2.2 叶片DNA提取步骤 | 第26-27页 |
2.3 胚乳DNA提取步骤 | 第27-28页 |
2.4 RNeasy Plant Mini Kit试剂盒提取RNA | 第28-29页 |
2.5 tripure试剂提取RNA | 第29-30页 |
2.6 RNA纯化 | 第30页 |
2.7 RNA反转录成cDNA | 第30-31页 |
2.8 PCR反应体系和琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
2.9 5-azaC处理种子 | 第32-33页 |
第三部分 结果与分析 | 第33-45页 |
1 胚乳特异基因的表达验证 | 第33-37页 |
1.1 电泳结果 | 第33-35页 |
1.2 胚乳特异性基因的非印迹性验证 | 第35-36页 |
1.3 验证这4个基因的胚乳特异性 | 第36-37页 |
2 验证目的基因的发育时间特异性 | 第37-39页 |
2.1 基因表达的电泳检测 | 第37-38页 |
2.2 测序检测发育3d的目的基因SNP的表达情况 | 第38-39页 |
2.3 目的基因3d与5d时期基因表达情况对比 | 第39页 |
3 DNA甲基化对基因表达的影响 | 第39-45页 |
3.1 药品5-azaC对植株表型的影响 | 第40-41页 |
3.2 5-azaC对胚乳特异非印迹基因表达影响的电泳检测 | 第41-42页 |
3.3 LOC_Os07g08420的测序结果 | 第42-43页 |
3.4 验证材料特异性 | 第43-45页 |
第四部分 讨论及后续研究设想 | 第45-48页 |
1 讨论 | 第45-46页 |
1.1 本研究实验方法的科学性 | 第45页 |
1.2 DNA甲基化参与非印迹的调控 | 第45-46页 |
1.3 测序结果讨论 | 第46页 |
2. 后期的研究计划和展望 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53页 |