| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 英文缩略词对照表 | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述和选题目的及意义 | 第12-26页 |
| 1 禽传染性支气管炎概况 | 第13-17页 |
| 1.1 IBV病原特征 | 第13-14页 |
| 1.2 基因组结构 | 第14-15页 |
| 1.3 IBV主要结构蛋白及其生物学功能 | 第15-17页 |
| 2 IB流行病学研究 | 第17-21页 |
| 2.1 IBV的分子变异机制 | 第18-19页 |
| 2.2 IB国外流行情况 | 第19-20页 |
| 2.3 IB国内流行情况 | 第20-21页 |
| 3 IB疫苗的研究 | 第21-25页 |
| 3.1 IB灭活疫苗 | 第21-22页 |
| 3.2 IB弱毒疫苗 | 第22-23页 |
| 3.3 IB基因工程疫苗 | 第23-25页 |
| 4 研究目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验内容 | 第26-55页 |
| 第一章 含鸡源启动子的真核表达载体的构建及其表达能力检测 | 第26-40页 |
| 1 材料 | 第26-28页 |
| 1.1 质粒、菌株与鸡胚 | 第26页 |
| 1.2 主要生物试剂 | 第26页 |
| 1.3 主要实验器材 | 第26-27页 |
| 1.4 常用试剂的配制 | 第27-28页 |
| 1.5 引物设计 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-35页 |
| 2.1 淋巴细胞的分离 | 第28页 |
| 2.2 淋巴细胞基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3 β-actin启动子的PCR扩增 | 第29页 |
| 2.4 β-actin启动子序列的克隆 | 第29-31页 |
| 2.5 从载体中替换CMV启动子 | 第31-33页 |
| 2.6 启动子替换后的真核载体对外源基因表达能力的检测 | 第33-35页 |
| 3 结果 | 第35-38页 |
| 3.1 β-actin启动子的扩增及克隆 | 第35-36页 |
| 3.2 启动子的替换 | 第36-37页 |
| 3.3 含EGFP基因的重组质粒的构建 | 第37页 |
| 3.4 EGFP在CEF中的表达 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-40页 |
| 第二章 IBV S1蛋白抗原表位的真核表达及免疫原性检测 | 第40-55页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| 1.1 质粒和毒株 | 第40页 |
| 1.2 实验动物及鸡胚 | 第40页 |
| 1.3 主要生物试剂 | 第40页 |
| 1.4 主要试验器材 | 第40-41页 |
| 1.5 常用试剂的配制 | 第41页 |
| 1.6 引物设计 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-48页 |
| 2.1 S1抗原表位基因的PCR扩增 | 第42页 |
| 2.2 抗原表位基因的克隆 | 第42-44页 |
| 2.3 含S1蛋白抗原表位基因的真核表达载体的构建 | 第44页 |
| 2.4 重组质粒转染CEF | 第44-45页 |
| 2.5 间接免疫荧光检测 | 第45-46页 |
| 2.6 动物免疫实验 | 第46-48页 |
| 3 结果 | 第48-52页 |
| 3.1 抗原表位基因的扩增 | 第48-49页 |
| 3.2 含S1蛋白抗原表位基因的重组质粒的构建 | 第49-50页 |
| 3.3 重组质粒在鸡胚成纤维细胞中的表达 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
