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心肌梗死后心力衰竭microRNA表达谱分析及功能探究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩写词表第15-16页
第1章 综述第16-34页
    综述1 microRNA简介第16-23页
        1.1 microRNA的发现第16-17页
        1.2 miRNA的生物合成及作用方式第17页
        1.3 miRNA主要检测方法及研究手段第17-23页
    综述2 miRNA在心力衰竭中的作用第23-34页
        2.1 心力衰竭概述第23-24页
        2.2 心梗后心脏重构的病理生理过程第24-25页
        2.3 正常心脏组织中的miRNA第25-26页
        2.4 心力衰竭中的miRNA第26-32页
            2.4.1 miRNA在心脏肥厚中的作用第27-29页
            2.4.2 miRNA在心肌细胞凋亡中的作用第29-30页
            2.4.3 miRNA在心肌纤维化中的作用第30-31页
            2.4.4 miRNA在心脏重构中的作用第31-32页
        2.5 miRNA在心力衰竭中的发展前景第32-34页
第2章 实验研究第34-110页
    前言第34-36页
    第1节 心梗后心衰大鼠左室心肌组织miRNA高通量测序及生物信息学分析第36-78页
        1.1 实验材料第36-37页
        1.2 实验方法第37-47页
            1.2.1 心肌梗死后心力衰竭大鼠模型构建第37-38页
            1.2.2 实验分组第38页
            1.2.3 观察指标第38-40页
            1.2.4 心肌组织病理形态学检查第40页
            1.2.5 心肌组织总RNA提取第40-41页
            1.2.6 RNA浓度及纯度测定第41页
            1.2.7 microRNA高通量测序及生物信息学分析第41-47页
        1.3 实验结果第47-74页
            1.3.1 超声心动图心功能变化第47-48页
            1.3.2 心肌肥厚指数第48-49页
            1.3.3 BNP水平第49-50页
            1.3.4 心肌组织病理形态第50-51页
            1.3.5 小RNA的高通量测序结果和分析第51-74页
        1.4 讨论第74-77页
            1.4.1 急性心肌梗死后心力衰竭模型构建及不同时期心功能改变第74-75页
            1.4.2 高通量测序筛选差异表达miRNA第75-76页
            1.4.3 差异表达miRNA靶基因预测及生物信息学分析第76-77页
        1.5 小结第77-78页
    第2节 高通量测序结果验证及心梗后大鼠不同时期miRNA表达水平分析第78-95页
        2.1 实验材料第78-79页
        2.2 实验方法第79-83页
            2.2.1 RNA提取第79页
            2.2.2 RNA浓度及纯度测定第79页
            2.2.3 引物设计与合成第79-80页
            2.2.4 逆转录反应第80-81页
            2.2.5 miRNA实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验第81-82页
            2.2.6 数据分析第82-83页
        2.3 实验结果第83-89页
            2.3.1 高通量测序结果荧光定量PCR验证第83-86页
            2.3.2 心梗后不同时期miR-31a-5p表达水平变化第86页
            2.3.3 心梗后不同时期miR-122-5p表达水平变化第86-87页
            2.3.4 心梗后不同时期miR-199a-5p表达水平变化第87-88页
            2.3.5 心梗后不同时期miR-208a-3p表达水平变化第88-89页
        2.4 讨论第89-94页
            2.4.1 miR-31a-5p第90-91页
            2.4.2 miR-122-5p第91-92页
            2.4.3 miR-199a-5p第92-93页
            2.4.4 miR-208a-3p第93-94页
        2.5 小结第94-95页
    第3节 miR-199a-5p及miR-31a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的影响第95-110页
        3.1 实验材料第96-97页
        3.2 实验方法第97-101页
            3.2.1 H9C2心肌细胞复苏培养及传代第97-98页
            3.2.2 MTS实验第98页
            3.2.3 细胞转染实验第98-99页
            3.2.4 实验分组第99页
            3.2.5 AnnexinV心肌细胞凋亡检测第99-100页
            3.2.6 细胞总RNA提取第100页
            3.2.7 反转录及实时荧光定量RT-qPCR实验第100-101页
        3.3 实验结果第101-107页
            3.3.1 MTS检测AngII对心肌细胞活性的影响第101页
            3.3.2 miR-199a-5p细胞转染效果第101-102页
            3.3.3 miR-31a-5p细胞转染效果第102-104页
            3.3.4 miR-199a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的作用第104-105页
            3.3.5 miR-31a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的作用第105-107页
        3.4 讨论第107-108页
        3.5 小结第108-110页
第3章 结论第110-112页
创新点第112-114页
局限性第114-116页
参考文献第116-128页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第128-130页
致谢第130页

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