中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩写词表 | 第15-16页 |
第1章 综述 | 第16-34页 |
综述1 microRNA简介 | 第16-23页 |
1.1 microRNA的发现 | 第16-17页 |
1.2 miRNA的生物合成及作用方式 | 第17页 |
1.3 miRNA主要检测方法及研究手段 | 第17-23页 |
综述2 miRNA在心力衰竭中的作用 | 第23-34页 |
2.1 心力衰竭概述 | 第23-24页 |
2.2 心梗后心脏重构的病理生理过程 | 第24-25页 |
2.3 正常心脏组织中的miRNA | 第25-26页 |
2.4 心力衰竭中的miRNA | 第26-32页 |
2.4.1 miRNA在心脏肥厚中的作用 | 第27-29页 |
2.4.2 miRNA在心肌细胞凋亡中的作用 | 第29-30页 |
2.4.3 miRNA在心肌纤维化中的作用 | 第30-31页 |
2.4.4 miRNA在心脏重构中的作用 | 第31-32页 |
2.5 miRNA在心力衰竭中的发展前景 | 第32-34页 |
第2章 实验研究 | 第34-110页 |
前言 | 第34-36页 |
第1节 心梗后心衰大鼠左室心肌组织miRNA高通量测序及生物信息学分析 | 第36-78页 |
1.1 实验材料 | 第36-37页 |
1.2 实验方法 | 第37-47页 |
1.2.1 心肌梗死后心力衰竭大鼠模型构建 | 第37-38页 |
1.2.2 实验分组 | 第38页 |
1.2.3 观察指标 | 第38-40页 |
1.2.4 心肌组织病理形态学检查 | 第40页 |
1.2.5 心肌组织总RNA提取 | 第40-41页 |
1.2.6 RNA浓度及纯度测定 | 第41页 |
1.2.7 microRNA高通量测序及生物信息学分析 | 第41-47页 |
1.3 实验结果 | 第47-74页 |
1.3.1 超声心动图心功能变化 | 第47-48页 |
1.3.2 心肌肥厚指数 | 第48-49页 |
1.3.3 BNP水平 | 第49-50页 |
1.3.4 心肌组织病理形态 | 第50-51页 |
1.3.5 小RNA的高通量测序结果和分析 | 第51-74页 |
1.4 讨论 | 第74-77页 |
1.4.1 急性心肌梗死后心力衰竭模型构建及不同时期心功能改变 | 第74-75页 |
1.4.2 高通量测序筛选差异表达miRNA | 第75-76页 |
1.4.3 差异表达miRNA靶基因预测及生物信息学分析 | 第76-77页 |
1.5 小结 | 第77-78页 |
第2节 高通量测序结果验证及心梗后大鼠不同时期miRNA表达水平分析 | 第78-95页 |
2.1 实验材料 | 第78-79页 |
2.2 实验方法 | 第79-83页 |
2.2.1 RNA提取 | 第79页 |
2.2.2 RNA浓度及纯度测定 | 第79页 |
2.2.3 引物设计与合成 | 第79-80页 |
2.2.4 逆转录反应 | 第80-81页 |
2.2.5 miRNA实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验 | 第81-82页 |
2.2.6 数据分析 | 第82-83页 |
2.3 实验结果 | 第83-89页 |
2.3.1 高通量测序结果荧光定量PCR验证 | 第83-86页 |
2.3.2 心梗后不同时期miR-31a-5p表达水平变化 | 第86页 |
2.3.3 心梗后不同时期miR-122-5p表达水平变化 | 第86-87页 |
2.3.4 心梗后不同时期miR-199a-5p表达水平变化 | 第87-88页 |
2.3.5 心梗后不同时期miR-208a-3p表达水平变化 | 第88-89页 |
2.4 讨论 | 第89-94页 |
2.4.1 miR-31a-5p | 第90-91页 |
2.4.2 miR-122-5p | 第91-92页 |
2.4.3 miR-199a-5p | 第92-93页 |
2.4.4 miR-208a-3p | 第93-94页 |
2.5 小结 | 第94-95页 |
第3节 miR-199a-5p及miR-31a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的影响 | 第95-110页 |
3.1 实验材料 | 第96-97页 |
3.2 实验方法 | 第97-101页 |
3.2.1 H9C2心肌细胞复苏培养及传代 | 第97-98页 |
3.2.2 MTS实验 | 第98页 |
3.2.3 细胞转染实验 | 第98-99页 |
3.2.4 实验分组 | 第99页 |
3.2.5 AnnexinV心肌细胞凋亡检测 | 第99-100页 |
3.2.6 细胞总RNA提取 | 第100页 |
3.2.7 反转录及实时荧光定量RT-qPCR实验 | 第100-101页 |
3.3 实验结果 | 第101-107页 |
3.3.1 MTS检测AngII对心肌细胞活性的影响 | 第101页 |
3.3.2 miR-199a-5p细胞转染效果 | 第101-102页 |
3.3.3 miR-31a-5p细胞转染效果 | 第102-104页 |
3.3.4 miR-199a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的作用 | 第104-105页 |
3.3.5 miR-31a-5p对AngII诱导的心肌细胞凋亡的作用 | 第105-107页 |
3.4 讨论 | 第107-108页 |
3.5 小结 | 第108-110页 |
第3章 结论 | 第110-112页 |
创新点 | 第112-114页 |
局限性 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-128页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第128-130页 |
致谢 | 第130页 |