| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1. 前言 | 第11-12页 |
| 2. 肠道病毒2B蛋白的翻译 | 第12页 |
| 3. 肠道病毒2B蛋白的跨膜拓扑结构 | 第12-14页 |
| 4. 肠道病毒非结构蛋白2B离子孔道特性对宿主细胞的影响 | 第14-18页 |
| 4.1 增加宿主细胞的膜结构通透性 | 第14-16页 |
| 4.2 扰乱宿主细胞内Ca~(2+)平衡 | 第16页 |
| 4.3 诱导宿主细胞凋亡 | 第16-18页 |
| 4.4 诱导细胞自噬 | 第18页 |
| 5. 基于2B蛋白的抗病毒药物研究 | 第18-19页 |
| 6. 展望 | 第19-20页 |
| 第二章 口蹄疫病毒非结构蛋白2B的结构特性研究 | 第20-34页 |
| 1. 材料 | 第20-21页 |
| 1.1 质粒和细胞 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第20-21页 |
| 2. 方法 | 第21-26页 |
| 2.1 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒的非结构蛋白2B的在线结构预测 | 第21页 |
| 2.2 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| 2.3 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒2B蛋白单体的跨膜方式研究 | 第22-23页 |
| 2.3.1 重组质粒转染及细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.3.2 荧光观察 | 第23页 |
| 2.4 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒2B蛋白单体的亚细胞定位研究 | 第23-24页 |
| 2.4.1 重组质粒转染及细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.4.2 荧光观察 | 第24页 |
| 2.5 亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒2B蛋白单体的相互作用研究 | 第24-26页 |
| 2.5.1 2B蛋白单体在真核细胞内的相互作用 | 第24-25页 |
| 2.5.2 2B蛋白单体体外寡聚化作用 | 第25-26页 |
| 2.5.2.1 2B蛋白的原核表达及纯化 | 第25-26页 |
| 2.5.2.2 2B蛋白的体外寡聚化作用 | 第26页 |
| 3. 结果 | 第26-33页 |
| 3.1 2B蛋白疏水性跨膜区预测 | 第26-27页 |
| 3.2 重组质粒的构建 | 第27页 |
| 3.3 2B蛋白单体在细胞中的跨膜拓扑结构 | 第27-29页 |
| 3.4 2B蛋白单体在细胞中的亚细胞定位 | 第29页 |
| 3.5 2B蛋白单体的相互作用 | 第29-33页 |
| 3.5.1 2B蛋白在细胞内的相互作用 | 第29-31页 |
| 3.5.2 2B蛋白在细胞外的相互作用 | 第31-33页 |
| 3.5.2.1 2B蛋白在大肠杆菌C43(DE3)中的可溶性表达及纯化 | 第31-32页 |
| 3.5.2.2 2B蛋白的细胞外寡聚化作用 | 第32-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 口蹄疫病毒非结构蛋白2B的功能特性研究 | 第34-46页 |
| 1. 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 质粒和细胞 | 第34页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第34-35页 |
| 2. 方法 | 第35-38页 |
| 2.1 2B蛋白在大肠杆菌中毒性分析 | 第35页 |
| 2.1.1 2B蛋白对大肠杆菌的增殖影响 | 第35页 |
| 2.1.2 2B蛋白在大肠杆菌中的表达观察 | 第35页 |
| 2.2 2B蛋白对BHK-21细胞内Ca~(2+)的影响 | 第35-36页 |
| 2.3 2B蛋白引发细胞发生自噬研究 | 第36-38页 |
| 3. 结果 | 第38-44页 |
| 3.1 2B蛋白对大肠杆菌的毒性分析 | 第38-39页 |
| 3.1.1 大肠杆菌BL21(DE3)和C43(DE3)的增殖 | 第38页 |
| 3.1.2 2B蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)和C43(DE3)中的表达 | 第38-39页 |
| 3.2 2B蛋白对BHK-21细胞内Ca~(2+)的影响 | 第39-40页 |
| 3.3 2B蛋白诱导细胞发生自噬 | 第40-44页 |
| 3.3.1 Western-blot检测表达2B蛋白的BHK-21细胞内的LC3的切割 | 第41页 |
| 3.3.2 免疫荧光法观察LC3在BHK-21细胞内的集聚 | 第41-43页 |
| 3.3.3 荧光观察LC3在H1299(GFP-LC3)细胞内的集聚 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
