摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 种群遗传学的几个重要概念 | 第11-13页 |
1.1.1 种群遗传结构 | 第11页 |
1.1.2 中性理论 | 第11-12页 |
1.1.3 集合种群 | 第12页 |
1.1.4 基因流 | 第12页 |
1.1.5 有效种群的大小 | 第12-13页 |
1.1.6 种群瓶颈 | 第13页 |
1.1.7 种群遗传多样性 | 第13页 |
1.2 兰科植物种群遗传学研究 | 第13-16页 |
1.2.1 常用的分子标记技术 | 第14-15页 |
1.2.2 分子标记的选择 | 第15-16页 |
1.2.3 分子标记技术在兰科植物中的应用 | 第16页 |
1.3 种群遗传学原理在濒危兰科植物保育中的应用 | 第16-19页 |
1.3.1 正确评估种群的遗传多样性 | 第17页 |
1.3.2 增加有效种群的大小 | 第17页 |
1.3.3 兰科植物的保育 | 第17-19页 |
1.4 论文的立题依据 | 第19页 |
1.5 研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
1.5.1 研究的主要内容 | 第19-20页 |
1.5.2 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 五唇兰自然种群的ISSR-PCR分子标记的研究 | 第21-38页 |
2.1 材料 | 第21-24页 |
2.1.1 样品的采集与保存 | 第21-22页 |
2.1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.3 主要药品与试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要溶液的配置 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-28页 |
2.2.1 DNA的提取与检测 | 第24页 |
2.2.1.1 DNA的提取 | 第24页 |
2.2.1.2 DNA的琼脂糖检测 | 第24页 |
2.2.2 ISSR-PCR扩增体系的优化 | 第24-25页 |
2.2.3 ISSR引物的筛选与退火温度的优化 | 第25-26页 |
2.2.4 ISSR-PCR扩增产物的检测 | 第26页 |
2.2.4.1 琼脂糖凝胶的制备 | 第26页 |
2.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
2.2.4.3 EB染色与照胶 | 第26页 |
2.2.5 数据的统计与分析 | 第26-28页 |
2.2.5.1 遗传多样性参数 | 第26-28页 |
2.2.5.2 软件的分析 | 第28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-38页 |
2.3.1 五唇兰基因组DNA的提取结果 | 第28-29页 |
2.3.2 ISSR-PCR反应中各因素的影响 | 第29-33页 |
2.3.2.1 PCR反应体系对扩增结果的影响 | 第29页 |
2.3.2.2 不同退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第29-30页 |
2.3.2.3 DNA浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第30页 |
2.3.2.4 Taq酶用量对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第30-31页 |
2.3.2.5 Mg~(2+)浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第31页 |
2.3.2.6 dNTP浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第31-32页 |
2.3.2.7 引物浓度对ISSR-PCR扩增结果的影响 | 第32-33页 |
2.3.3 ISSR引物的筛选 | 第33-34页 |
2.3.4 ISSR对五唇兰自然种群的多态性 | 第34-35页 |
2.3.5 ISSR对五唇兰自然种群的遗传多样性 | 第35-36页 |
2.3.6 ISSR对五唇兰种群间的遗传分化 | 第36页 |
2.3.7 ISSR对五唇兰种群间的遗传关系 | 第36-38页 |
第三章 五唇兰自然种群的SRAP-PCR分子标记的研究 | 第38-49页 |
3.1 材料 | 第38页 |
3.2 方法 | 第38-42页 |
3.2.1 DNA的提取与检测 | 第38页 |
3.2.2 SRAP-PCR反应体系的优化 | 第38-39页 |
3.2.3 SRAP-PCR引物的筛选 | 第39-40页 |
3.2.4 SRAP-PCR扩增产物的检测 | 第40-42页 |
3.2.4.1 聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第40-41页 |
3.2.4.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41页 |
3.2.4.3 银染 | 第41-42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
3.3.1 SRAP-PCR反应体系的优化及引物的筛选 | 第42-43页 |
3.3.2 SRAP对五唇兰自然种群的多态性 | 第43-45页 |
3.3.3 SRAP对五唇兰自然种群的遗传多样性 | 第45-46页 |
3.3.4 SRAP对五唇兰种群间的遗传分化 | 第46页 |
3.3.5 SRAP对五唇兰各种群间的遗传关系 | 第46-49页 |
第四章 ISSR与SRAP综合分析 | 第49-53页 |
4.1 ISSR和SRAP分析比较 | 第49-51页 |
4.1.1 五唇兰自然种群的遗传多样性 | 第49-50页 |
4.1.2 五唇兰种群遗传分化 | 第50页 |
4.1.3 五唇兰各种群间的遗传关系 | 第50-51页 |
4.2 ISSR和SRAP综合分析 | 第51-53页 |
第五章 总结与展望 | 第53-57页 |
5.1 五唇兰ISSR-PCR和SRAP-PCR反应体系的优化 | 第53页 |
5.2 五唇兰自然种群的遗传多样性 | 第53-54页 |
5.3 五唇兰自然种群的遗传结构 | 第54-55页 |
5.4 五唇兰自然种群的保育 | 第55-56页 |
5.5 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62页 |