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miR156参与调控水稻褐飞虱抗性的分子机制研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第9-15页
    1.1 褐飞虱的生命周期和生活习性第9-10页
        1.1.1 生育历期第9页
        1.1.2 翅型分化第9页
        1.1.3 蜜露排泄第9-10页
        1.1.4 取食习性第10页
    1.2 水稻对褐飞虱抗性研究进展第10-13页
        1.2.1 植物激素与褐飞虱抗性第10-12页
            1.2.1.1 JA与褐飞虱抗性第10-11页
            1.2.1.2 SA与褐飞虱抗性第11页
            1.3.1.3 GA与褐飞虱抗性第11-12页
        1.2.2 代谢产物与褐飞虱抗性的关系第12页
        1.2.3 褐飞虱抗性基因研究进展第12-13页
            1.2.3.1 水稻褐飞虱抗性基因的定位和克隆第12页
            1.2.3.2 WRKY转录因子调控褐飞虱抗性第12-13页
    1.3 miR156介导的植物营养生长阶段转变与植物抗虫第13-14页
        1.3.1 植物发育与抗虫第13页
        1.3.2 miR156调控植物个体发育第13-14页
    1.4 研究目的和意义第14-15页
第二章 MIM156水稻植株的褐飞虱抗性分析第15-37页
    2.1 实验材料第15-17页
        2.1.1 供试水稻第15页
        2.1.2 供试褐飞虱第15页
        2.1.3 主要仪器第15-16页
        2.1.4 主要试剂第16-17页
    2.2 实验方法第17-20页
        2.2.1 褐飞虱行为测定第17页
        2.2.2 抗性等级评价第17页
        2.2.3 植物激素JA含量测定第17-18页
        2.2.4 水稻JA处理第18页
        2.2.5 RNA提取和qRT-PCR分析第18-19页
        2.2.6 石蜡切片第19-20页
    2.3 数据处理第20-21页
    2.4 结果与分析第21-34页
        2.4.1 MIM156转基因水稻鉴定第21-22页
        2.4.2 MIM156转基因水稻幼年到成年阶段转变提前第22页
        2.4.3 MIM156转基因水稻抗虫等级评价第22-23页
        2.4.4 MIM156转基因水稻中褐飞虱蜜露分泌降低第23-24页
        2.4.5 MIM156转基因水稻中褐飞虱产卵量下降第24-25页
        2.4.6 MIM156转基因水稻中褐飞虱存活率下降第25页
        2.4.7 MIM156转基因水稻中褐飞虱羽化率降低第25-26页
        2.4.8 接虫后MIM156转基因水稻叶鞘损伤程度减小第26-27页
        2.4.9 MIM156转基因水稻中抗虫相关基因表达量分析第27-28页
        2.4.10 MIM156转基因水稻褐飞虱取食以后JA合成基因表达分析第28-29页
        2.4.11 MIM156转基因水稻中褐飞虱取食后SA相关抗性基因表达分析第29-30页
        2.4.12 野生型水稻褐飞虱取食后SPL基因表达第30-31页
        2.4.13 MIM156转基因水稻中JA含量下降第31-32页
        2.4.14 MIM156转基因水稻中外施茉莉酸对褐飞虱的寄主选择敏感性加强第32-33页
        2.4.15 MIM156转基因水稻中外施茉莉酸对褐飞虱抗性的影响第33-34页
    2.5 讨论第34-37页
第三章 rSPL14载体构建和遗传转化第37-51页
    3.1 实验材料和方法第37-45页
        3.1.1 主要培养基第37-38页
        3.1.2 试剂配方第38页
        3.1.3 水稻基因组的提取第38页
        3.1.4 目的基因的获取第38-39页
        3.1.5 引物序列设计和目得基因的扩增第39页
        3.1.6 PCR产物胶回收第39-40页
        3.1.7 目得片段的连接和转化第40页
        3.1.8 阳性单克隆的筛选第40-41页
        3.1.9 质粒抽提第41页
        3.1.10 酶切连入终载体第41-42页
        3.1.11 连接第42页
        3.1.12 转化第42页
        3.1.13 电击转化农杆菌及阳性菌液检测第42-43页
        3.1.14 水稻遗传转化第43-44页
        3.1.15 转基因水稻的阳性检测第44-45页
        3.1.16 水稻转基因株系基因表达量检测第45页
    3.2 结果分析第45-48页
        3.2.1 rSPL14目得片段扩增第45-46页
        3.2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化第46-47页
        3.2.3 PCR鉴定阳性苗检测第47-48页
    3.3 讨论第48-51页
第四章 结论和展望第51-53页
参考文献第53-59页
附表第59-63页
致谢第63-64页

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