摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-15页 |
1.1 褐飞虱的生命周期和生活习性 | 第9-10页 |
1.1.1 生育历期 | 第9页 |
1.1.2 翅型分化 | 第9页 |
1.1.3 蜜露排泄 | 第9-10页 |
1.1.4 取食习性 | 第10页 |
1.2 水稻对褐飞虱抗性研究进展 | 第10-13页 |
1.2.1 植物激素与褐飞虱抗性 | 第10-12页 |
1.2.1.1 JA与褐飞虱抗性 | 第10-11页 |
1.2.1.2 SA与褐飞虱抗性 | 第11页 |
1.3.1.3 GA与褐飞虱抗性 | 第11-12页 |
1.2.2 代谢产物与褐飞虱抗性的关系 | 第12页 |
1.2.3 褐飞虱抗性基因研究进展 | 第12-13页 |
1.2.3.1 水稻褐飞虱抗性基因的定位和克隆 | 第12页 |
1.2.3.2 WRKY转录因子调控褐飞虱抗性 | 第12-13页 |
1.3 miR156介导的植物营养生长阶段转变与植物抗虫 | 第13-14页 |
1.3.1 植物发育与抗虫 | 第13页 |
1.3.2 miR156调控植物个体发育 | 第13-14页 |
1.4 研究目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 MIM156水稻植株的褐飞虱抗性分析 | 第15-37页 |
2.1 实验材料 | 第15-17页 |
2.1.1 供试水稻 | 第15页 |
2.1.2 供试褐飞虱 | 第15页 |
2.1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
2.1.4 主要试剂 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-20页 |
2.2.1 褐飞虱行为测定 | 第17页 |
2.2.2 抗性等级评价 | 第17页 |
2.2.3 植物激素JA含量测定 | 第17-18页 |
2.2.4 水稻JA处理 | 第18页 |
2.2.5 RNA提取和qRT-PCR分析 | 第18-19页 |
2.2.6 石蜡切片 | 第19-20页 |
2.3 数据处理 | 第20-21页 |
2.4 结果与分析 | 第21-34页 |
2.4.1 MIM156转基因水稻鉴定 | 第21-22页 |
2.4.2 MIM156转基因水稻幼年到成年阶段转变提前 | 第22页 |
2.4.3 MIM156转基因水稻抗虫等级评价 | 第22-23页 |
2.4.4 MIM156转基因水稻中褐飞虱蜜露分泌降低 | 第23-24页 |
2.4.5 MIM156转基因水稻中褐飞虱产卵量下降 | 第24-25页 |
2.4.6 MIM156转基因水稻中褐飞虱存活率下降 | 第25页 |
2.4.7 MIM156转基因水稻中褐飞虱羽化率降低 | 第25-26页 |
2.4.8 接虫后MIM156转基因水稻叶鞘损伤程度减小 | 第26-27页 |
2.4.9 MIM156转基因水稻中抗虫相关基因表达量分析 | 第27-28页 |
2.4.10 MIM156转基因水稻褐飞虱取食以后JA合成基因表达分析 | 第28-29页 |
2.4.11 MIM156转基因水稻中褐飞虱取食后SA相关抗性基因表达分析 | 第29-30页 |
2.4.12 野生型水稻褐飞虱取食后SPL基因表达 | 第30-31页 |
2.4.13 MIM156转基因水稻中JA含量下降 | 第31-32页 |
2.4.14 MIM156转基因水稻中外施茉莉酸对褐飞虱的寄主选择敏感性加强 | 第32-33页 |
2.4.15 MIM156转基因水稻中外施茉莉酸对褐飞虱抗性的影响 | 第33-34页 |
2.5 讨论 | 第34-37页 |
第三章 rSPL14载体构建和遗传转化 | 第37-51页 |
3.1 实验材料和方法 | 第37-45页 |
3.1.1 主要培养基 | 第37-38页 |
3.1.2 试剂配方 | 第38页 |
3.1.3 水稻基因组的提取 | 第38页 |
3.1.4 目的基因的获取 | 第38-39页 |
3.1.5 引物序列设计和目得基因的扩增 | 第39页 |
3.1.6 PCR产物胶回收 | 第39-40页 |
3.1.7 目得片段的连接和转化 | 第40页 |
3.1.8 阳性单克隆的筛选 | 第40-41页 |
3.1.9 质粒抽提 | 第41页 |
3.1.10 酶切连入终载体 | 第41-42页 |
3.1.11 连接 | 第42页 |
3.1.12 转化 | 第42页 |
3.1.13 电击转化农杆菌及阳性菌液检测 | 第42-43页 |
3.1.14 水稻遗传转化 | 第43-44页 |
3.1.15 转基因水稻的阳性检测 | 第44-45页 |
3.1.16 水稻转基因株系基因表达量检测 | 第45页 |
3.2 结果分析 | 第45-48页 |
3.2.1 rSPL14目得片段扩增 | 第45-46页 |
3.2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第46-47页 |
3.2.3 PCR鉴定阳性苗检测 | 第47-48页 |
3.3 讨论 | 第48-51页 |
第四章 结论和展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附表 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |