| 中文摘要 | 第9-13页 |
| 英文摘要 | 第13页 |
| 符号说明 | 第18-20页 |
| 技术路线图 | 第20-21页 |
| 前言 | 第21-25页 |
| 第一章 HCV N53 对肝细胞QSG7701 生物学特性影响的研究 | 第25-49页 |
| 1 材料与方法 | 第25-34页 |
| 1.1 材料 | 第25-26页 |
| 1.1.1 细胞 | 第25页 |
| 1.1.2 细菌 | 第25页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第25页 |
| 1.1.4 质粒 | 第25页 |
| 1.1.5 主要试剂及来源 | 第25-26页 |
| 1.1.6 引物 | 第26页 |
| 1.1.7 主要仪器、设备 | 第26页 |
| 1.2 方法 | 第26-34页 |
| 1.2.1 实验分组 | 第26-27页 |
| 1.2.2 细胞培养 | 第27页 |
| 1.2.3 质粒制备、鉴定和纯化 | 第27-28页 |
| 1.2.4 HCV N53 基因稳定转染QSG7701 细胞及其筛选鉴定 | 第28-32页 |
| 1.2.5 转染细胞生物学行为的观察 | 第32-34页 |
| 2 结果 | 第34-46页 |
| 2.1 质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| 2.2 QSG7701 细胞转染及克隆的筛选、鉴定 | 第34-37页 |
| 2.2.1 G418 筛选转染细胞及克隆形成 | 第35页 |
| 2.2.2 转染细胞HCV N53 基因整和分析 | 第35页 |
| 2.2.3 转染细胞HCV N53 蛋白质表达分析 | 第35-37页 |
| 2.3 转染细胞生物学特性分析 | 第37-46页 |
| 2.3.1 光学显微镜观察 | 第38页 |
| 2.3.2 电子显微镜观察 | 第38-40页 |
| 2.3.3 流式细胞仪检测 | 第40-42页 |
| 2.3.4 细胞生长曲线测定 | 第42页 |
| 2.3.5 软琼脂集落实验 | 第42-43页 |
| 2.3.6 成瘤性检测 | 第43-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第二章 HCV N53转染肝细胞的蛋白质组差异表达分析 | 第49-76页 |
| 1 材料与方法 | 第49-60页 |
| 1.1 主要实验仪器 | 第49页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第49-50页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第50-53页 |
| 1.4 方法与步骤 | 第53-60页 |
| 1.4.1 细胞总蛋白质的抽提 | 第53页 |
| 1.4.2 双向凝胶电泳 | 第53-55页 |
| 1.4.3 凝胶图象分析 | 第55-58页 |
| 1.4.4 质谱分析 | 第58-60页 |
| 2. 实验结果 | 第60-69页 |
| 2.1 HCV N53 转染肝细胞双向凝胶电泳图谱的建立 | 第61-62页 |
| 2.2 凝胶蛋白质点匹配分析 | 第62-65页 |
| 2.3 差异蛋白质点的肽质量指纹图 | 第65页 |
| 2.4 蛋白质点鉴定结果 | 第65-69页 |
| 3. 讨论 | 第69-76页 |
| 第三章 HCV N53转染对QSG7701细胞蛋白磷酸化水平的影响 | 第76-84页 |
| 1. 材料与方法 | 第76-78页 |
| 1.1 材料 | 第76页 |
| 1.2 方法 | 第76-78页 |
| 1.2.1 Western blot 分析 | 第76-77页 |
| 1.2.2 免疫共沉淀 | 第77-78页 |
| 2. 实验结果 | 第78-80页 |
| 2.1 HCV N53 转染细胞中MAPK 的表达及活性水平 | 第78页 |
| 2.2 HCV N53 转染细胞中P38 的表达及活性水平 | 第78-79页 |
| 2.3 HCV N53 转染细胞中磷酸化JNK 活性水平 | 第79页 |
| 2.4 HCV N53 转染细胞中酪氨酸磷酸化水平的变化 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 综述一 | 第95-106页 |
| 综述二 | 第106-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
