| 前 言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 1.1 植物细胞两相培养 | 第12-18页 |
| 1.1.1 植物细胞两相培养原理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物细胞两相培养优势 | 第13-14页 |
| 1.1.3 选择萃取剂或吸附剂应满足的要求 | 第14-16页 |
| 1.1.4 两液相培养中有机溶剂对细胞毒性的研究 | 第16-18页 |
| 1.2 药物引起细胞毒性的机理 | 第18-22页 |
| 1.2.1 外源性毒物引起的细胞调节失控 | 第18-20页 |
| 1.2.2 细胞稳态失调引起的毒性 | 第20-22页 |
| 1.3 植物细胞对胁迫的防御反应 | 第22-28页 |
| 1.3.1 植物防御反应中植保素的合成 | 第22-23页 |
| 1.3.2 植物细胞防御反应与程序化死亡 | 第23-25页 |
| 1.3.3 植物细胞内参与信号转导的分子及其作用 | 第25-28页 |
| 1.3.4 植物环境信号应答和适应机制蛋白质组学 | 第28页 |
| 1.4 本文研究意义及主要研究内容 | 第28-32页 |
| 第二章 有机相对红豆杉细胞代谢的影响 | 第32-44页 |
| 2.1 引言 | 第32页 |
| 2.2 研究材料与方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.2 细胞株系及其培养 | 第33页 |
| 2.2.3 有机溶剂及预处理 | 第33-34页 |
| 2.2.4 细胞活性测定 | 第34页 |
| 2.2.5 蛋白质含量的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.6 苯丙氨酸解氨酶(PAL)的提取与活性测定 | 第35页 |
| 2.2.7 酚类积累的测定 | 第35页 |
| 2.2.8 多酚氧化酶(PPO) | 第35页 |
| 2.2.9 紫杉醇的提取与测定 | 第35-36页 |
| 2.2.10 实验设计与数据处理 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-43页 |
| 2.3.1 对细胞活力的影响 | 第37页 |
| 2.3.2 对总蛋白含量的影响 | 第37-39页 |
| 2.3.3 对细胞次生代谢的影响 | 第39-43页 |
| 2.4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 有机相对红豆杉细胞膜透性的影响 | 第44-53页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 研究材料与方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.2 细胞株系及其培养 | 第45页 |
| 3.2.3 有机溶剂及预处理 | 第45页 |
| 3.2.4 细胞培养液电导率测定 | 第45页 |
| 3.2.5 Evans Blue 染色 | 第45页 |
| 3.2.6 丙二醛的测定 | 第45页 |
| 3.2.7 细胞膜环境扫描电子显微镜观察 | 第45-46页 |
| 3.2.8 实验设计 | 第46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 3.3.1 两相培养中有机相对红豆杉细胞膜形态的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.2 有机溶剂作用后培养体系电导率的变化 | 第48-49页 |
| 3.3.3 有机相对红豆杉细胞膜脂质过氧化水平的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.4 有机相对细胞膜完整性的影响 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 有机相诱导红豆杉细胞凋亡及相关蛋白质组研究 | 第53-69页 |
| 4.1 引言 | 第53-54页 |
| 4.2 研究材料与方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 试剂 | 第54页 |
| 4.2.2 细胞株系及其培养 | 第54页 |
| 4.2.3 有机溶剂及预处理 | 第54页 |
| 4.2.4 PI-Hoechst33342 双重染色及荧光显微镜观察 | 第54页 |
| 4.2.5 DNA 的提取与琼脂糖凝胶电泳 | 第54-55页 |
| 4.2.6 蛋白质的提取与双向凝胶电泳 | 第55-56页 |
| 4.2.7 实验设计 | 第56页 |
| 4.3 实验结果 | 第56-66页 |
| 4.3.1 油酸诱导悬浮培养东北红豆杉细胞发生凋亡 | 第56-58页 |
| 4.3.2 邻苯二甲酸二丁脂诱导悬浮培养东北红豆杉细胞发生凋亡 | 第58-60页 |
| 4.3.3 对凋亡率的影响 | 第60页 |
| 4.3.4 油酸诱导东北红豆杉细胞双向凝胶电泳图谱分析 | 第60-63页 |
| 4.3.5 邻苯二甲酸二丁脂诱导东北红豆杉细胞蛋白质双向凝胶电泳图谱分析 | 第63-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-67页 |
| 4.5 小结 | 第67-69页 |
| 第五章 有机相对红豆杉细胞遗传稳定性的影响 | 第69-79页 |
| 5.1 引言 | 第69页 |
| 5.2 研究材料与方法 | 第69-71页 |
| 5.2.1 试剂 | 第69-70页 |
| 5.2.2 细胞株系及其培养 | 第70页 |
| 5.2.3 有机溶剂及预处理 | 第70页 |
| 5.2.4 细胞有丝分裂指数(MI)和细胞异常有丝分裂的观察 | 第70页 |
| 5.2.5 实验设计 | 第70-71页 |
| 5.3 结果与分析 | 第71-77页 |
| 5.3.1 对细胞毒害作用诱发异常细胞的形态观察 | 第71-72页 |
| 5.3.2 对细胞有丝分裂指数的影响 | 第72页 |
| 5.3.3 对分裂期细胞的毒害作用 | 第72-74页 |
| 5.3.4 对间期细胞的毒害作用 | 第74-75页 |
| 5.3.5 细胞有丝分裂与细胞凋亡的相关性 | 第75-77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-78页 |
| 5.5 小结 | 第78-79页 |
| 第六章 有机相诱发红豆杉细胞氧迸发及抗氧化机理的研究 | 第79-95页 |
| 6.1 引言 | 第79页 |
| 6.2 研究材料与方法 | 第79-82页 |
| 6.2.1 试剂 | 第79-80页 |
| 6.2.2 细胞株系及其培养 | 第80页 |
| 6.2.3 有机溶剂及预处理 | 第80页 |
| 6.2.4 酶的提取与酶活测定 | 第80-81页 |
| 6.2.5 O2-.的测定 | 第81页 |
| 6.2.6 H2O2的测定 | 第81页 |
| 6.2.7 抗坏血酸测定 | 第81-82页 |
| 6.2.8 谷胱甘肽的测定 | 第82页 |
| 6.2.9 实验设计 | 第82页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第82-93页 |
| 6.3.1 有机相诱导活性氧的产生 | 第82-83页 |
| 6.3.2 有机相诱导O2-.迸发的主要机制 | 第83-85页 |
| 6.3.3 有机相对东北红豆杉细胞自由基清除系统酶活性的变化 | 第85-87页 |
| 6.3.4 有机相诱导下东北红豆杉细胞抗坏血酸及谷胱甘肽的变化 | 第87-93页 |
| 6.4 小结 | 第93-95页 |
| 第七章 有机相作用下红豆杉细胞离子流的改变 | 第95-104页 |
| 7.1 引言 | 第95页 |
| 7.2 研究材料与方法 | 第95-96页 |
| 7.2.1 试剂 | 第95页 |
| 7.2.2 细胞株系及其培养 | 第95页 |
| 7.2.3 有机溶剂及预处理 | 第95-96页 |
| 7.2.4 胞外 pH 值的测定 | 第96页 |
| 7.2.5 胞内Ca2+、胞外K+的测定 | 第96页 |
| 7.2.6 实验设计 | 第96页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第96-102页 |
| 7.3.1 邻苯二甲酸二丁脂诱导东北红豆杉细胞胞外培养基碱化 | 第96-99页 |
| 7.3.2 有机相对红豆杉细胞胞内钙含量的影响 | 第99-101页 |
| 7.3.3 有机相对红豆杉细胞胞外钾含量的影响 | 第101-102页 |
| 7.4 小结 | 第102-104页 |
| 第八章 结论与展望 | 第104-107页 |
| 8.1 结论 | 第104-105页 |
| 8.2 展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-120页 |
| 发表论文和参加科研情况 | 第120-121页 |
| 附录 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
