中文摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
缩略语/符号说明 | 第18-20页 |
前言 | 第20-23页 |
研究现状、成果 | 第20-21页 |
研究目的、方法 | 第21-23页 |
一、多发性骨髓瘤骨病NOD/SCID小鼠模型的构建 | 第23-44页 |
1.1 主要试剂、仪器 | 第23-24页 |
1.1.1 主要试剂 | 第23页 |
1.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
1.1.3 主要溶液配制 | 第24页 |
1.2 实验方法 | 第24-27页 |
1.2.1 多发性骨髓瘤骨病NOD/SCID小鼠骨髓瘤骨病模型的建立 | 第24页 |
1.2.2 X线检测NOD/SCID小鼠胫骨骨损情况 | 第24-25页 |
1.2.3 流式细胞术验证RPMI-8226细胞副蛋白类型 | 第25页 |
1.2.4 ELISA检测小鼠血清Igλ副蛋白水平 | 第25页 |
1.2.5 显微CT分别检测3组NOD/SCID小鼠胫骨骨损情况 | 第25页 |
1.2.6 小鼠骨髓细胞瑞氏染色 | 第25-26页 |
1.2.7 小鼠骨髓免疫组织化学染色 | 第26页 |
1.2.8 小鼠骨髓抗酒石酸酸性磷酸酶染色 | 第26页 |
1.2.9 统计学处理 | 第26-27页 |
1.3 结果 | 第27-40页 |
1.3.1 X线检测NOD/SCID小鼠胫骨骨损情况 | 第27-28页 |
1.3.2 流式细胞术验证RPMI-8226细胞副蛋白类型 | 第28-29页 |
1.3.3 ELISA检测小鼠血清Igλ副蛋白水平 | 第29页 |
1.3.4 显微CT检测NOD/SCID小鼠胫骨骨损情况 | 第29-36页 |
1.3.5 小鼠骨髓细胞瑞氏染色 | 第36-37页 |
1.3.6 小鼠骨髓免疫组织化学染色 | 第37-39页 |
1.3.7 小鼠骨髓抗酒石酸酸性磷酸酶染色 | 第39-40页 |
1.4 讨论 | 第40-43页 |
1.5 小结 | 第43-44页 |
二、富含半胱氨酸蛋白 61(CRY61/CCN1)在多发性骨髓瘤骨病中的作用研究 | 第44-62页 |
2.1 主要试剂、仪器及研究对象 | 第44-48页 |
2.1.1 主要试剂 | 第44-45页 |
2.1.2 主要仪器 | 第45-46页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第46页 |
2.1.4 病例和对照 | 第46-48页 |
2.2 实验方法 | 第48-52页 |
2.2.1 构建稳定上调富含半胱氨酸蛋白 61(CRY61/CCN1)表达的RPMI-8226细胞系 | 第48-51页 |
2.2.1.1 慢病毒载体的构建、包装及病毒滴度检测 | 第48页 |
2.2.1.2 慢病毒CRY61/CCN1载体转染多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226 | 第48页 |
2.2.1.3 慢病毒CRY61/CCN1载体转染RPMI-8226细胞结果验证 | 第48-51页 |
2.2.2 多发性骨髓瘤骨病NOD/SCID小鼠模型的构建 | 第51页 |
2.2.3 显微CT检测NOD/SCID小鼠骨髓瘤骨病骨骨质破坏 | 第51页 |
2.2.4 ELISA测人血清CCN1及NOD/SCID小鼠血浆Igλ副蛋白水平 | 第51-52页 |
2.2.5 小鼠骨髓CD138免疫组织化学染色 | 第52页 |
2.2.6 小鼠骨髓抗酒石酸酸性磷酸酶染色 | 第52页 |
2.2.7 统计学处理 | 第52页 |
2.3 结果 | 第52-59页 |
2.3.1 慢病毒CRY61/CCN1载体转染RPMI-8226细胞结果验证 | 第52-53页 |
2.3.2 显微CT检测NOD/SCID小鼠骨髓瘤骨病骨骨质破坏 | 第53-56页 |
2.3.3 ELISA检测人血清CCN1水平及多发性骨髓瘤骨病NOD/SCID小鼠血浆Igλ副蛋白水平 | 第56-57页 |
2.3.4 小鼠骨髓CD138免疫组织化学染色 | 第57-58页 |
2.3.5 小鼠骨髓抗酒石酸酸性磷酸酶染色 | 第58-59页 |
2.4 讨论 | 第59-61页 |
2.5 小结 | 第61-62页 |
三、唑来膦酸抗多发性骨髓瘤细胞机制研究 | 第62-77页 |
3.1 主要试剂、仪器 | 第62-65页 |
3.1.1 主要试剂 | 第62-63页 |
3.1.2 主要仪器 | 第63-64页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第64-65页 |
3.2 实验方法 | 第65-68页 |
3.2.1 CCK-8 检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8826增殖抑制作用 | 第65页 |
3.2.2 流式细胞术检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8826凋亡作用 | 第65页 |
3.2.3 RPMI-8226细胞免疫荧光染色 | 第65-66页 |
3.2.4 实时荧光定量(RT-PCR)检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8226作用后Pim-2 及NF-kB变化 | 第66-67页 |
3.2.5 蛋白免疫印迹(Western blot)探索唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8226作用机制 | 第67-68页 |
3.2.6 统计学处理 | 第68页 |
3.3 结果 | 第68-75页 |
3.3.1 CCK-8 检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8826增殖抑制作用 | 第68-70页 |
3.3.2 流式细胞术检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8826凋亡作用 | 第70-72页 |
3.3.3 RPMI-8226细胞免疫荧光染色 | 第72-73页 |
3.3.4 实时荧光定量(RT-PCR)检测唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8226作用后pim-2 及NF-kB变化 | 第73-74页 |
3.3.5 蛋白免疫印迹(Western blot)探索唑来膦酸及其联合硼替佐米对RPMI-8226作用机制 | 第74-75页 |
3.4 讨论 | 第75-76页 |
3.5 小结 | 第76-77页 |
结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第83-84页 |
附录 | 第84-87页 |
综述 骨髓微环境中细胞因子影响骨髓瘤骨病的研究进展 | 第87-99页 |
综述参考文献 | 第94-99页 |
致谢 | 第99-101页 |
个人简历 | 第101页 |