| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-32页 |
| 第一部分 人诱导性多能干细胞的培养及诱导细胞自噬条件的筛选 | 第32-49页 |
| 引言 | 第32-33页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-42页 |
| 2.1 各类细胞培养基配方 | 第34页 |
| 2.2 小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）的原代分离培养 | 第34-35页 |
| 2.3 MEF的冻存 | 第35页 |
| 2.4 MEF的失活 | 第35-36页 |
| 2.5 饲养层细胞（Feeder）的制备 | 第36页 |
| 2.6 hiPSCs的培养 | 第36-38页 |
| 2.7 拟胚体（hEB）的悬浮法制备和贴壁培养 | 第38页 |
| 2.8 实验分组 | 第38-39页 |
| 2.9 Western Blot检测LC3I/II和P62表达水平 | 第39-41页 |
| 2.10 LC3的免疫荧光染色法检测 | 第41-42页 |
| 2.11 拟胚体自噬小体超微结构的透射电镜（TEM）观测 | 第42页 |
| 2.12 统计学处理 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-46页 |
| 3.1 hiPSC的形态学特征以及多能性鉴定、hEB的诱导分化 | 第42-44页 |
| 3.2 Rapamycin诱导h EB自噬条件的筛选 | 第44页 |
| 3.3 Rapamycin联合NH4Cl调控hEB自噬水平的条件筛选 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 第二部分 自噬对人诱导性多能干细胞心肌定向分化的调控 | 第49-64页 |
| 引言 | 第49-50页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| 2 方法 | 第52-56页 |
| 2.1 实验分组 | 第52页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR检测心肌细胞分化特异性标志物 | 第52-53页 |
| 2.3 免疫荧光染色法检测cTnI阳性细胞率 | 第53页 |
| 2.4 流式细胞术检测cTnI阳性细胞率 | 第53-54页 |
| 2.5 Western Blot检测心肌细胞结构蛋白Mef-2c和cTn I表达水平 | 第54-56页 |
| 2.6 统计学处理 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-61页 |
| 3.1 自噬诱导hiPSCs心肌定向分化的最佳作用时间为分化第 4-6 天 | 第56-57页 |
| 3.2 增强自噬可提高hiPSCs心肌细胞定向分化效率 | 第57-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 第三部分 自噬促进人诱导性多能干细胞心肌细胞 定向分化的作用机制研究 | 第64-75页 |
| 引言 | 第64-65页 |
| 1 材料 | 第65-66页 |
| 2 方法 | 第66-70页 |
| 2.1 实验分组 | 第66-67页 |
| 2.2 实时荧光定量PCR检测Wnt通路下游基因表达水平 | 第67-68页 |
| 2.3 Western Blot检测Wnt通路蛋白dvl2、β-catenin表达水平 | 第68-69页 |
| 2.4 统计学处理 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-72页 |
| 3.1 自噬诱导剂可下调经典wnt/β-catenin活性 | 第70-71页 |
| 3.2 模拟激活wnt通路活性可抑制由自噬介导的促hiPSCs心肌分化作用 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-90页 |
| 个人简历和研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
