| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-17页 |
| 1.1 研究背景 | 第12-16页 |
| 1.1.1 真核生物启动子简介 | 第12页 |
| 1.1.2 真核生物启动子结构与功能的研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 肌肉特异性启动子在应用的过程中存在的问题及解决方法 | 第13-14页 |
| 1.1.4 结蛋白基因及其启动子的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2 研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-32页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株、质粒与细胞 | 第17页 |
| 2.1.2 工具酶、试剂盒和其他试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 DNA分析软件 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-32页 |
| 2.2.1 常规的分子生物学试验技术 | 第19-21页 |
| 2.2.2 牛结蛋白基因启动子CTCF调控元件的PCR定点突变与活性检测 | 第21-25页 |
| 2.2.3 连接多正调控元件序列的牛结蛋白基因启动子真核表达载体的构建与活性检测 | 第25-26页 |
| 2.2.4 带有两拷贝调控元件的牛结蛋白基因启动子的真核表达载体的构建与活性检测 | 第26-28页 |
| 2.2.5 带有多拷贝调控元件的牛结蛋白基因启动子的真核表达载体的构建与活性检测 | 第28-31页 |
| 2.2.6 数据分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-47页 |
| 3.1 牛DESMIN基因启动子 300 BP调控区的转录因子结合位点预测 | 第32-33页 |
| 3.2 牛结蛋白基因启动子的定点突变与活性分析 | 第33-36页 |
| 3.2.1 牛desmin基因启动子突变体的克隆 | 第33页 |
| 3.2.2 CTCF元件突变重组质粒的构建与测序 | 第33-34页 |
| 3.2.3 真核表达载体p GL3-desmin-CTCF的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.4 牛desmin基因突变启动子的活性分析 | 第35-36页 |
| 3.3 牛结蛋白基因启动子的改造与活性分析 | 第36-47页 |
| 3.3.1 连接多正调控元件序列的牛desmin基因启动子真核表达载体的构建与活性分析 | 第36-39页 |
| 3.3.2 带有两拷贝调控元件的牛结蛋白基因启动子的真核表达载体的构建与活性分析 | 第39-41页 |
| 3.3.3 带有多拷贝调控元件的牛结蛋白基因启动子的真核表达载体的构建与活性分析 | 第41-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 启动子活性的研究方法 | 第47页 |
| 4.2 调控元件定点突变对启动子活性的影响 | 第47-48页 |
| 4.3 多正调控元件序列对启动子活性的影响 | 第48页 |
| 4.4 两拷贝调控元件对启动子活性的影响 | 第48-49页 |
| 4.5 多拷贝调控元件对启动子活性的影响 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
